蓝莓红景天复合口服液的研制

蓝莓红景天复合口服液的研制

蓝莓是蓝莓属的一种多年生灌木。蓝莓果实中含有丰富的花青素、多糖、黄酮、尼克酸以及多种维生素、不饱和脂肪酸、超氧化物歧化酶、矿物质等成分,具有抗氧化、降血脂、抗衰老、保护视力及减少心脑血管疾病1材料和方法1.1试剂与仪器蓝莓:采于吉林省白山市靖宇县;红景天:购于吉林市江城大药房;纤维素酶:酶活性50000U/g,深圳恒生生物科技有限公司;20g~22g清洁级健康昆明种雄性小白鼠:购于吉林大学动物实验中心,生产和使用许可证号:SCXK(吉)2013-0001;血尿素氮(BUN)测定试剂盒、血乳酸(BLA)测定试剂盒、肝糖原(LG)测定试剂盒、肌糖原(MG)测定试剂盒:南京建成生物工程研究所;其他试剂均为分析纯。JY92-2D超声波细胞粉碎机:宁波新芝生物科技股份有限公司;HWC-3型微波提取设备:天水华圆制药设备科技有限公司;HH-2数显恒温水浴锅:江苏省金坛市科技仪器有限公司;LG10-2.4A高速离心机:北京医用离心机厂;SHZ-Ⅲ循环水真空泵:上海亚荣生化仪器厂;722N可见分光光度计:上海佑科仪器仪表有限公司;XSC型小鼠恒温游泳池:淮北正华生物仪器设备有限公司;DY89-II型电动玻璃匀浆机:宁波新芝生物科技股份有限公司;2695高效液相色谱仪:大连依利特有限公司。1.2方法1.2.1蓝莓复合装盒的制备1.2.1.1.流程蓝莓浓缩液:蓝莓→粉碎→酶解→灭酶→超声波提取→离心→减压浓缩→蓝莓浓缩液1.2.1.微波提取蓝莓多糖、红景天苷,制备蓝莓多糖口服液蓝莓清洗后冷冻,加入6倍的蒸馏水打浆,加入0.5%的纤维素酶,在40℃条件下酶解100min,100℃灭酶,然后进行超声波提取(提取时间40min,提取温度50℃,超声功率80W),将提取液以3000r/min离心10min进行分离,取上清液,用旋转蒸发器浓缩至蓝莓多糖含量为1mg/mL,备用红景天粉碎过50目筛,加入10倍量的蒸馏水浸泡90min,微波提取3次,每次90s,合并提取液,用旋转蒸发器浓缩至红景天苷含量为1mg/mL,备用将蓝莓浓缩液、红景天浓缩液、白砂糖、β-环糊精、纯净水等进行混合调配,过滤,除去杂质,将调配好的口服液灌装在玻璃瓶内,每瓶100mL,在80℃下杀菌30min。冷却,成品。1.2.1.3、蓝莓糖含量和红景天含量的测定蓝莓多糖含量的测定:采用硫酸———苯酚法红景天苷含量的测定:采用高效液相色谱法1.2.2最佳制备经验：红景天复合口服液在单因素试验的基础上,选择影响口服液感官评价结果较大的4个因素(蓝莓浓缩液、红景天浓缩液、白砂糖、β-环糊精),采用L1.2.3感官评价标准组织食品专业30名同学对蓝莓红景天复合口服液进行感官评价,评价指标包括:色泽、口感、滋味、组织状态。采用模糊数学评价法,满分100分,评价标准见表1。1.2.4抗疲劳试验1.2.4.对不同实验剂量小鼠的影响将适应7d后的小鼠按体质量随机分为对照组和低、中、高3个不同实验剂量组,每试验组各10只小鼠。分别将口服液浓缩10倍,20倍,40倍作为实验的低、中、高3个剂量组1.2.4.水温+小鼠末次给样30min后,将小鼠尾部负上小鼠自身重量5%的砝码,放入恒温游泳池中,水温(25±0.5)℃,放入小鼠开始计时,至小鼠沉于水面下10s后不能浮出水面的时间作为力竭游泳时间1.2.4.小鼠血乳酸、血尿素氮的检测将游泳力竭的小鼠即刻于眼眶采血,离心,取上清液,按照试剂盒提供的方法检测血乳酸(BLA)和血尿素氮(BUN)含量。将采血后的小鼠立即取肝脏和股四头肌,经生理盐水漂洗,滤纸吸干,匀浆,备用。按照试剂盒提供的方法检测肝糖原(LG)和肌糖原(MG)含量1.3独立样本t检验实验数据用SPSS13.0软件分析,实验结果均用“ue0af±s”表示,将3个不同剂量实验组分别与对照组进行独立样本的t检验,P<0.05为差异具有显著性意义,P<0.01为差异具有极显著性意义;多组数据采用方差分析。2结果与分析2.1单因素试验结果。蓝莓红景天复合口服2.1.1蓝莓浓缩汁添加量的试验蓝莓多糖具有良好的抗疲劳作用由表2可知,在蓝莓浓缩汁添加量为35mL~40mL时,口服液呈透明状态,而随着蓝莓浓缩汁添加量的增加,口服液酸度增加,口感和透明度均下降,所以选择35、40、45mL作为正交试验的水平范围。2.1.2红景天浓缩汁的制备红景天具有多种活性成分,其中红景天苷具有显著的抗疲劳作用红景天中含有大量的鞣质,导致红景天浓缩汁具有苦、涩味。由表3可知,当红景天浓缩汁添加量超过30mL时,苦涩味道难以掩盖,对口服液的口感影响较大。所以选择20、25、30mL作为正交试验的水平范围。2.1.3白砂糖添加量的确定蓝莓浓缩汁口感偏酸,红景天浓缩汁口感偏苦、涩,因此在蓝莓浓缩汁、红景天浓缩汁、β-环糊精添加量不变的情况下,每100mL口服液添加不同质量的白砂糖,通过感官评价,确定白砂糖的最佳添加量。结果见表4。由表4得出,在添加量为4g~6g之间甜味偏淡,蓝莓浓缩汁偏酸,使得口服液整体口感偏酸,不润滑,评分偏低,在添加量为10g~12g时偏甜。所以选择7、8、9g作为正交试验的水平范围。2.1.4-环糊精添加量的确定在蓝莓浓缩汁、红景天浓缩汁、白砂糖添加量不变的情况下,每100mL口服液添加不同质量的β一环糊精,通过感官评价,确定β-环糊精最佳添加量。结果见表5。β-环糊精具有包埋作用,可以适当降低苦、涩味。由表5得出,β-环糊精的添加量0.15g时口服液的苦涩味减弱,添加量达到0.20g时,无明显苦味和涩味,并且口服液具有蓝莓和红景天的香味。所以选择0.15、0.20、0.25g作为正交试验的水平范围。2.2正交试验中培育的蓝莓红景天复合制剂的结果在单因素试验的基础上,选择蓝莓浓缩汁、红景天浓缩汁、白砂糖、β-环糊精为考察因素,进行L由表6可知,最佳配方为A2.3对小鼠负压游泳时间的影响疲劳最直接的表现就是运动耐力的下降,小鼠负重游泳试验是测定小鼠疲劳状况和运动耐力的常用实验方法。复合口服液对小鼠负重游泳时间的影响见表7。由表7可知,与对照组相比,口服液低、中、高剂量组的小鼠负重游泳时间均有所延长,低剂量组和中剂量组具有显著性(P<0.05),高剂量组具有极显著性(P<0.01);小鼠负重游泳时间与对照组相比,分别延长23.25%,49.33%和68.06%。实验结果说明蓝莓红景天复合口服液能延长小鼠运动时间,提高小鼠运动耐力,具有缓解疲劳的作用。2.4血尿素氮与血乳酸含量的变化当机体长时间紧张运动会使体内能源物质肌糖原、肝糖原含量减少;蛋白质的分解代谢加剧及乳酸含量增加。肝糖原和肌糖原是机体运动的主要能量来源,机体内肝糖原和肌糖原含量的增多,可以提供更多的能量。无氧条件下,当体内糖原被分解产生大量乳酸,释放出能量的同时,也会加速蛋白质与氨基酸的分解,使血中尿素氮含量增高。因此,血尿素氮和血乳酸的含量可以反映疲劳的程度。复合口服液对小鼠体内生化指标的影响见表8。由表8可知,与对照组相比,低、中、高剂量组小鼠中的LG含量均有所增加,且均具有显著性差异(P<0.05);MG含量低剂量组与对照组相比无显著性差异(P>0.05),中剂量组和高剂量组呈显著性差异(P<0.05);BUN和BLA含量与对照组相比都有所下降,其中BUN的低剂量组无显著性差异(P>0.05),中剂量组和高剂量组呈显著性差异;BLA低剂量组、中剂量组和高剂量组与对照组相比均呈显著性差异(P<0.05)。实验结果说明,蓝莓红景天复合口服液可以提高小鼠体内肝糖原和肌糖原的储备能力,提高小鼠体内有氧代谢能力,减少血乳酸的生成;蛋白质的分解代谢作用也会减慢,降低小鼠运动后产