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文档简介
棉籽饼粕中
游离棉酚含量的测定一般用在70%丙酮水溶液或在3-氨基-1-丙醇存在下,用异丙醇和正己烷的混合溶剂提取游离棉酚,用比色法、高效液相色谱法测定。比色法:有苯胺法、三氯化锑法、甲氧基苯胺法、间苯三酚法、紫外分光光度法等。苯胺比色法准确度高、精密度好,也是国标方法。HPLC法准确度高,干扰少。HPLC法所测得的结果往往低于比色法。
原理在3-氨基-1-丙醇存在下,用异丙醇与正己醇的混合溶剂提取游离棉酚。苯胺与棉酚结合为苯胺棉酚,在最大吸收波长(440nm)处进行比色测定。该方法适用于棉籽粉、棉籽饼粕和配合饲料中游离棉酚含量的测定。样品粉碎机及分样筛分析天平电动振荡器恒温水浴锅分光光度计容量瓶、具塞锥形瓶、玻璃漏斗、移液管、量筒、玻璃珠四、仪器与器皿(1)异丙醇;(2)正己烷;(3)冰乙酸;(4)3-氨基-1-丙醇;(5)苯胺;(6)异丙醇、正己烷混合溶剂:6:4(V/V);(7)溶剂A:取500ml异丙醇、正己烷混合溶剂,2ml3-氨基-1-丙醇,8ml冰乙酸和50ml水,放入1000ml容量瓶中。再用异丙醇、正己烷混合溶剂定容至刻度。五、试剂六、操作方法(1)游离棉酚的提取:称取1-2g棉籽饼粕样品于250ml具塞锥形瓶中,加入20粒玻璃珠。准确加入50ml溶剂A。塞紧瓶塞。于振荡器上剧烈振荡1小时(每分钟120次左右)。用干燥的定量滤纸过滤。过滤时在漏斗上加盖一表玻璃皿。弃去最初几滴滤液。收集滤液于100ml具塞锥形瓶中。(2)以下操作见下表(3)测定吸光度值:在440nm波长处以a0为参比溶液测定空白液b0的吸光度;以a为参比液测定样品测定液
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