紫玉润唇膏外用的安全性评价

紫玉润唇膏外用的安全性评价

慢性唇炎是指仅发生在嘴唇红部的慢性非特异性炎症性疾病，尤其是年轻女性。1实验材料1.1实验动物的生产20只健康白色家兔，雌雄参半，每只家兔的体重在200～250g之间;36只已成年的健康豚鼠，雌雄参半，每只豚鼠的体重在240～300g之间，以上所有实验动物均由西南医科大学实验动物中心提供，其生产许可证号为:SCXK(川)2018-17，使用许可证号为:SYXK(川)2018-065。所有动物均为单笼饲养，常规自由饮食(食用饲料由实验动物中心提供，厂商:成都达硕实验动物有限公司)，饮水无限制(为人饮用自来水)，整个试验期间实验室的温度控制在18℃～25℃之间，实验前使其在实验动物房中适应3d，常规喂养。1.2润唇膏、士林中药紫草、玉竹、甘草均由泸州市百草堂药业有限公司提供;紫玉润唇膏由西南医科大学附属中医院制剂室协助完成制作;凡士林由南昌白云药业有限公司提供。(批准文号:赣食药准字F20050006);2,4-二硝基氯苯由上海地浦化工有限公司提供。1.3实验设备电子称、电推剪、75%酒精、无菌注射器、油纸、绷带、胶布、棉球。2实验方法2.1皮肤刺激测试2.1.1皮肤多次清洗家兔腰椎两侧皮肤将20只白色健康家兔随机分为完整皮肤组和破损皮肤组，每组10只，雌雄参半。在涂抹紫玉润唇膏前12h使用电推剪分别对20只家兔进行脱毛处理(脱毛区域为背部脊柱两侧毛发，脱毛时应注意保持皮肤的完整性，不得损伤表皮)，所有家兔的脱毛面积约为5cmx5cm。使用无菌注射器5号针头在破损皮肤组的脱毛区域划“井”字形作为标志，以表皮渗血为度。整个实验均采用家兔同体自身左右两侧皮肤进行对照。实验前，用0.9%生理盐水反复清洗家兔背部脊柱两侧脱毛区域，共清洗3次;实验时，将紫玉润唇膏均匀涂抹于家兔脊柱右侧脱毛区域，空白对照组则将凡士林均匀涂抹于家兔脊柱左侧脱毛区域，涂抹面积约为5cmx5cm，紫玉润唇膏和凡士林的涂抹剂量均为0.4g/只;涂抹完毕后，在两侧用药部位先用一层油纸覆盖，继而用无刺激性的绷带和胶布加以固定，封闭24h。在用药24h以后，去除胶布、绷带、油纸，使用温水将脊柱两侧的受试物全部清洗掉，并在清洗完受试物后的1h、24h、48h、72h，于相同的自然光照条件下观察并记录两侧脱毛区域用药后是否发生红斑、水肿不良反应，以及红斑、水肿消退的时间和程度。实验结果均参考皮肤刺激反应评分标准。2.1.3皮肤刺激反应评分模式根据《药理实验方法学》2.1.4强度分值与+前时间强度分值小于0.5为无刺激性，强度分值在0.5～2.99之间为轻度刺激性，强度分值在3.0～5.99之间为中度刺激性，强度分值在6.0～8.0之间为强刺激性。具体积分计算方式:刺激指数平均分值=(红斑总分+水肿总分)/动物数量2.2皮肤过敏试验2.2.1紫玉润唇膏组、空白凡士林组、阳性对照将36只已成年的健康豚鼠随机分成3组，每组12只，雌雄参半，即紫玉润唇膏组、空白凡士林组、阳性对照组(0.1%2,4-二硝基氯苯)。在涂抹受试剂前12h使用电推剪分别对所有豚鼠背部脊柱两侧进行进行脱毛处理，每只豚鼠面积为4cm×4cm。2.2.2皮肤多次刺激试验在豚鼠背部脱毛区域涂抹紫云润唇膏(0.3g/只)后，先用一层油纸覆盖，再用无刺激性的绷带和胶布加以固定，使其充分接触皮肤，6h后使用酒精棉球清除受试物，隔日再进行1次致敏接触，共三次。空白凡士林组(0.3g/只)和阳性对照组(0.1%2,4-二硝基氯苯，0,1mL/只)方法同前。2.2.3过敏试验于末次涂抹受试物14d后，每组分别再次涂抹相应的受试物，方法和剂量同前，并于涂抹6h后，在清除受试物即刻、24h、48h、72h观察实验豚鼠有无过敏反应以及哮喘、呼吸困难、站立不稳等严重的全身性过敏反应，并记录发生过敏反应的时间节点。2.2.4皮肤过敏性实验症状反应评分标准参考文献3结果3.1皮肤主动状态的特征通过观察，10只实验家兔完整皮肤组在单次给药实验中涂抹了紫玉润唇膏后，在清洗涂抹物后的1h、24h、48h、72h不同时间节段中，均没有发生红斑或水肿不良反应，其皮肤状态与左侧凡士林组相同，平均皮肤反应刺激强度分值小于0.5分;10只实验家兔破损皮肤组在本实验中(排除正常皮肤被无菌注射器针头划伤后在“井”字处出现的暗红色结痂)，涂擦紫玉润唇膏后，在清洗涂抹物后的1h、24h、48h、72h不同时间节点里，均未没有发生红斑或水肿不良反应，其皮肤状态与左侧凡士林组相同，其平均皮肤反应刺激强度分值均小于0.5分。两组结果表明紫玉润唇膏与凡士林均对家兔完整皮肤和破损皮肤均无刺激性。见表1。3.2多次给药皮肤刺激性实验通过观察，在多次给药后，紫玉润唇膏和凡士林对实验家兔完整皮肤组和破损皮肤组均没有引起红斑或水肿反应，两组平均皮肤刺激反应分值无显著差异，其皮肤刺激反应强度分值均小于0.5，表明紫玉润唇膏和凡士林在多次给药后对完整皮肤和破损皮肤均未出现明显刺激性，两组比较无明显差异，具体结果见表2。3.3皮肤主动光敏试验照组(0.1%2,4-二硝基氯苯)相比较，紫玉润唇膏组和空白凡士林组的试验豚鼠在局部用药后，受试皮肤均未出现红斑、水肿、全身性过敏等反应，致敏率均为0%，表明紫玉润唇膏外用对皮肤无过敏性反应。见表3。4草性寒的治疗紫玉润唇膏是由紫草、玉竹、甘草三味中药组成，其中紫草性寒，味甘、咸，归心、肝二经，有凉血、活血、解毒、透疹消斑的作用，可用于治疗血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹