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文档简介
淀粉测定的技能要求目录页试剂的配制一样品预处理二样品的测定四结果计算五硫代硫酸钠标准溶液的标定三试剂的配制一氢氧化钾-乙醇溶液:称取氢氧化钾50g,用95%乙醇溶解并稀释至1000mL。80%乙醇溶液:量取95%乙醇842mL,用水稀释至1000mL。1.0mol/L盐酸溶液:量取盐酸83mL,用水稀释至1000mL。氢氧化钠溶液:称取固体氢氧化钠30g,用水溶解并稀释至100mL。蛋白沉淀剂分溶液A和溶液B:a)溶液A:称取铁氰化钾106g,用水溶解并稀释至1000mL。b)溶液B:称取乙酸锌220g,加冰乙酸30mL,用水稀释至1000mL。试剂的配制一碱性铜试剂:溶液a:称取硫酸铜25g,溶于100mL水中。溶液b:称取无水碳酸钠144g,溶于300mL~400mL50℃水中。溶液c:称取柠檬酸50g,溶于50mL水中。将溶液c缓慢加入溶液b中,边加边搅拌直至气泡停止产生。将溶液a加到此混合液中并连续搅拌,冷却至室温后,转移到1000mL容量瓶中,定容至刻度,混匀。放置24h后使用,若出现沉淀需过滤。取1份此溶液加入到49份煮沸并冷却的蒸馏水,pH应为10.0±0.1。试剂的配制一碘化钾溶液:称取碘化钾10g,用水溶解并稀释至100mL。盐酸溶液:取盐酸100mL,用水稀释至160mL。0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液:称取26g五水合硫代硫酸钠(或16g无水硫代硫酸钠),加0.2g无水碳酸钠,溶于1000mL水中,缓缓煮沸10min,冷却。放置2周后用4号玻璃滤锅过滤。溴百里酚蓝指示剂:称取溴百里酚蓝1g,用95%乙醇溶并稀释到100mL。淀粉指示剂:称取可溶性淀粉0.5g,加少许水,调成糊状,倒入盛有50mL沸水中调匀,煮沸,临用时配置。样品预处理二1.试样制备2.淀粉分离3.水解(技能要求)1.试样制备取有代表性的试样不少于200g,用绞肉机绞两次并混匀。绞好的试样应尽快分析,若不立即分析,应密封冷藏贮存,防止变质和成分发生变化。贮存的试样启用时应重新混匀。(技能要求)2.淀粉分离称取试样25g(精确到0.01g,淀粉含量约1g)放入500mL烧杯中,加入热氢氧化钾-乙醇溶液300mL,用玻璃棒搅匀,盖上表面皿,在沸水浴上加热1h,不时搅拌。然后,将沉淀完全转移到漏斗上过滤,用80%热乙醇溶液洗涤沉淀数次。根据样品的特征,可适当增加洗涤液的用量和洗涤次数,以保证糖洗涤完全。(技能要求)3.水解将滤纸钻孔,用1.0mol/L盐酸溶液100mL,将沉淀完全洗入250mL烧杯中,盖上表面皿,在沸水浴中水解2.5h,不时搅拌。溶液冷却到室温,用氢氧化钠溶液中和至pH约为6(不要超过6.5)。将溶液移入200mL容量瓶中,加入蛋白质沉淀剂溶液A3mL,混合后再加入蛋白质沉淀剂溶液B3mL,用水定容到刻度。摇匀,经不含淀粉的滤纸过滤。滤液中加入氢氧化钠溶液1滴~2滴,使之对溴百里酚蓝指示剂呈碱性。硫代硫酸钠标准溶液的标定三1.操作技能2.计算
(技能要求)1.操作技能称取0.18g已于120℃±2℃干燥至恒量的工作基准试剂重铬酸钾,置于碘量瓶中,溶于25mL水,加2g碘化钾及20mL硫酸溶液(20%),摇匀,于暗处放置10min。加150mL水(15℃~20℃),用配制的硫代硫酸钠溶液滴定,近终点时加2mL淀粉指示液(10g/L),继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时做空白试验。(技能要求)2.计算硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度按下列公式计算:c——硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L);m——重铬酸钾质量,单位为克(g);V1——硫代硫酸钠溶液体积,单位为毫升(mL);V2——空白试验消耗硫代硫酸钠溶液体积,单位为毫升(mL);M——重铬酸钾的摩尔质量,单位为克每摩尔(g/mol)[M(1/6K2Cr2O7)=49.031]。样品的测定四准确取一定量滤液(V3)稀释到一定体积(V4),然后取25.00mL(最好含葡萄糖40mg~50mg)移入碘量瓶中,加入25.00mL碱性铜试剂,装上冷凝管,在电炉上2min内煮沸。随后改用温火继续煮沸10min,迅速冷却至室温,取下冷凝管,加入碘化钾溶液30mL,小心加入盐酸溶液25.0mL,盖好盖等待滴定。用硫代硫酸钠标准溶液滴定上述溶液中释放出来的碘。当溶液变成浅黄色时,加入淀粉指示剂1mL,继续滴定直到蓝色消失,记下消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积(V5)。同一试样进行两次测定并做空白试验。结果计算五1.葡萄糖量的计算2.淀粉含量的计算(技能要求)1.葡萄糖量的计算消耗硫代硫酸钠毫摩尔数X按下列公式计算:
式中:X———消耗硫代硫酸钠毫摩尔数;V0———空白试验消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,单位为毫升(mL);V5———试样液消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,单位为毫升(mL);c———硫代硫酸钠标准溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L)。根据X从表1中查出相应的葡萄糖量(m0)。表1硫代硫酸钠的毫摩尔数同葡萄糖量(m0)的换算关系Xm/mgXm/mgXm/mg12.41025.01847.124.81127.61950.037.21230.32053.049.71333.02156.0512.21435.72259.1614.71538.52362.2717.21641.32465.3819.81744.22568.4922.4(技能要求)2.淀粉含量的计算淀粉含量按下列公式计算:
式中:c——淀粉含量,单位为克每百克(g/100g);m0——葡萄糖含量,单位为毫克(mg);0.9——葡萄糖折算成淀粉的换算系数;V4——稀释后的体
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