高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中的腹泻性贝类毒素、河豚毒素

高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中的腹泻性贝类毒素、河豚毒素

近年来，由于食用含有海洋垃圾的鱼雷和贝类，发生了一起中毒事件。这与海洋污染日益严重密切相关。毒性有害浪潮的频发频率和规模都有所增加。1材料和方法1.1水产品的类型为了解福建省市售水产品的污染真实情况,使监测数据更加可靠,采用多级分层抽样,分别采取不同地市、销售点、包装及不同种类水产品。监测的毒素有DSP类[软海绵酸(OA)、鳍藻毒素(DTX1)]和TTX。1.2销售点和水产品采集的水产品主要来自近几年中毒事件报道较多的4个市,包括福州、莆田、宁德和泉州市。销售点选择人们日常采购地点包括农贸市场、超市、食杂店等,包装包括定型包装和散装;水产品的选择主要是我省海鲜中毒事件报道较多的螺类、双壳贝类、鱼干、海蟹类等。依据相关文献报道,螺类及双壳贝类体内带毒的高峰期主要集中在6—8月1.3仪器、试剂和仪器超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱仪,配有电喷雾离子源(液相系统:ACQUITYUPLC,美国Waters公司;质谱系统:API5000,美国ABSCIEX公司)、组织捣碎机(FW117型,天津市泰斯特仪器有限公司)、离心机(美国BeckmanCoulter公司)、Milli-Q超纯水(美国Millipore公司)、毒素标准物质(加拿大国家研究委员会)AtlantisHILICSilica色谱柱(3μm,150mm×2.1mm);ACQU1TYUPLCBEHC18色谱柱(1.7μm,2.1mm×100mm)。1.4有害因素风险检测检验方法参照《2013年国家食品污染和有害因素风险工作手册》(TTX的测定标准操作程序、DSP液相色谱串联质谱法测定的标准操作程序)上相应的方法进行检测。1.5质量控制2结果2.12微生物毒素的产品种类在连续2a抽检的5类406份水产品中,共计检出含有海洋生物毒素的水产品有4大类42份,其中,海虾类2a均未检出,螺类、鱼干类和海蟹类2a均有阳性检出,双壳贝类2014年有检出,见表1。2.1.14年与2014年检出率比较2013年5类水产品中海洋生物毒素检出率为6.25%,2014年的检出率为15.38%。2014年的阳性检出率高于2013年的阳性检出率,差异有统计学意义(χ2.1.2生物毒素检出情况连续2a的监测,5类406份水产品中共计检出含有海洋生物毒素的有42份,总检出率为10.34%;不同水产品的检出率差异有统计学意义(χ2.2水产品中螺蟹类和双壳贝类的检出率在抽检的406份水产品中,主要污染的毒素有OA、DTX1、TTX这3类。其中2013年5类水产品检出为TTX,2014年OA、DTX1、TTX均有检出,螺类与海蟹类以TTX检出为主,双壳贝类主要检出的为OA。其中,2014年TTX的检出率(30.51%)高于2013年TTX检出率(15.25%),差异有统计学意义(χ2.3洋生物毒素的测定2013与2014年螺类中主要是织纹螺检出海洋生物毒素,烤鱼干也有毒素检出,海蟹类中主要以圆尾鲎污染为主,本文所采集的10只圆尾鲎只有1只未检出;2014年双壳贝类中以淡菜检出为主。2.43-2014年污染较严重的水产品中.在检出的各类水产品中以检出TTX为主,TTX含量因种类不同存在较大的差异,见表3。2013和2014年污染较为严重的主要是织纹螺和圆尾鲎,采用秩和检验,2013年这两种水产品平均TTX含量差异有统计学意义(P<0.01),2014年织纹螺与圆尾鲎的平均TTX含量差异也有统计学意义(P<0.05)。3讨论3.1检测方法目前用于检测海洋生物毒素的方法有小鼠生物测定法3.2织纹螺等抗菌材料近年来,随着食用水产品中毒事件的增多,许多省份对水产品的监测调查也引起了重视马丹等我省织纹螺污染情况严重可能与沿海地区赤潮频发,织纹螺摄食有毒藻类有关;我省虽是传统的产鲎大省,但鲎品种主要是中华鲎,该品种较少引起中毒。在国内外报道较多的鲎中毒主要是食用圆尾鲎引起,本次调查中采集的10只圆尾鲎有9只检出TTX,且TTX含量最高可达668μg/kg,我省的圆尾鲎可能是从南海贩运过来的4建立健全食品生产管理制度,加强样品前处理宣传本次仅对6—9月份的市售水产品进行抽查,不排除部分海产品存在季节性变化规律。为了使调查结果更全面,建议可对市售水产品进行季节性抽检。织纹螺品种较多,有带毒、不带毒、季节性带毒品种,且螺类外观多相近,普通百姓不易区分,建议相关监管部门加强对织纹螺品种鉴定的培训,开展有针对性的食用危害健康教育。对于福建省市售水产品出现毒性很强的圆尾鲎,为了防止发生食鲎中毒的事件,建议监管部门加强市场监管,严格控制外地圆尾鲎的流入。作者声明本文无实际或潜在的利益冲突对采样人员进行培训,尽量做到随机抽样,避免抽样产生的误差太大。在样品前处理过程中,清洗好前处理设备,防止交叉污染。在样品测定时在样品中加入标准物质进行平行测定,并做空白对照,并对样品加标回收率进行测定,确保结果数值的准确性。对超过线性范围的被测溶液