杀虫剂室内生物活性测定试验要求

杀虫剂

室内生物活性测定试验要求农业部农药检定所二○○八年十一月杀虫剂室内生物活性测定试验基本要求主要技术要点存在问题基本要求试验药剂：一般要求用原药。对照药剂：原药，作用机理、作用方式或结构类似，防治相同靶标已获登记常用品种。供试靶标：种类与申请登记的靶标相同，室内连续饲养2代以上，个体大小和生理状态一致。室内难饲养试虫，可以选择近似种或同属虫种。浓度设置：5个有效浓度。重复次数：4次。试验方法：根据药剂特性和生物试材特点，采用或参照«农药室内生物测定试验准则杀虫剂»（1－6部分，8－14部分）。数据统计与分析：计算出LC50、LC90、95％置信限、b值及其标准误混配制剂室内配比筛选试验：采用«农药室内生物测定试验准则杀虫剂»第7部分－混配的联合作用测定（5个配比，每个配比5个有效浓度）主要技术要点

药剂配置方法试验药剂试虫调查时间试验方法

主要技术要点试验目的药剂特性试验方法生物试材检查结果结果分析主要技术要点把握试验目的是确定生物试材生育期的依据，是确定试验方法的依据之一。确定药剂室内生物活性可采用的方法主要有点滴法、药膜法、夹毒叶片法、浸叶法、浸虫法、培养基混药法等确定药剂作用方式触杀活性测定：点滴法、药膜法等胃毒活性测定：叶片夹毒法等内吸活性测定：连续浸液（幼苗水培法）等熏蒸活性测定：锥形瓶法等确定药剂最适宜防治期卵、低龄幼虫（若虫、若螨）、高龄幼虫（若虫、若螨）、成虫（成螨）主要技术要点把握药剂特性药剂的理化性质－在各种溶剂中的溶解度药剂的理化性质确定药剂配置方法试验方法

室内生测试验常用的有机溶剂有丙酮、二甲基亚砜、甲醇、乙醇等；表面活性剂：Triton-X100，吐温80。作用机理、作用方式、作用特点确定对照药剂、试验方法和调查时间主要技术要点把握各种试验方法的特点点滴法：溶剂的选择一般为丙酮，有些丙酮中溶解度低的药剂可以加一定比例的其它有机溶剂；点滴不熟练的人员可以在丙酮中加一定比例的丁酮以便降低挥发的速度。夹毒叶片法：药剂稀释与点滴法基本相同，溶剂的选择一般为丙酮，有些在丙酮中溶解度低的药剂可以加一定比例的其它有机溶剂，但不能用水；进行药剂处理前，试虫一般要停饲4－8小时，也就是要试虫饥饿4－8小时；做好夹毒叶片接虫2－4小时后一定要淘汰未食完一张完整叶碟的试虫。药膜法：药膜的基质为玻璃表面或滤纸表面时，应选用有机溶剂形成药膜，溶剂的选择一般为丙酮，有些丙酮中溶解度低的药剂可以加一定比例的其它有机溶剂；药膜的基质为植物叶片时，应选用以水为连续相的溶液，溶液中除了依据药剂的性质加少量有机溶剂外，要有标准的表面活性剂（0.1~1%）。叶片的浸渍时间一般为10秒左右，然后阴干。主要技术要点把握好试验靶标的标准化一般要选择和防治对象同种的试虫进行室内试验，特殊情况下可以选择近缘种或同属；室内饲养一段时间的试虫作为虫源，特殊的试虫，或不能在室内完成连续多代饲养的试虫，可以考虑室内饲养一代或两代或从田间采集卵块待孵化出幼虫用于试验（注意要多个卵块的幼虫随机混合后用于测定）。直接用田间虫源测定时需要很大的样本容量，一般不推荐（特殊情况除外，例如某些介壳虫等）试虫的发育阶段要与田间防治虫态接近；试虫的虫龄、个体大小（体重等）、生理年龄要一致；主要技术要点把握试验结果检查试虫死亡的标准要一致；检查结果的时间要依据药剂的性质定，一般从几个小时到几天不等，对于昆虫生长调节剂以及昆虫病原微生物一般要在72小时以上；记录非观察指标以外的现象。主要技术要点把握好结果分析空白对照死亡率原则上不应该太高，一般小于5%可以不进行校正，大于5%要校正，大于20%视为无效测定，重新试验；一般要求测定药剂要有5个或5个浓度以上，每个浓度要4次重复，检查结果时4个重复的数据不要合并，每个重复单独进入机值分析；进行数据统计分析，计算LC50（LD50）及其置信限、LC95（LD95）及其置信限、b值及其标准误差。存在问题药剂浓度设置不能保证5个有效浓度；空白对照设置不合理；混