【公开课】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（课件）

探究·实践土壤中分解尿素的细菌的分离与计数思考讨论——选择培养基配方的设计尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业产生中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解为NH3，NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。讨论1．如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？2．该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？注：本课件设计思路取自刘永生老师课件讨论1：如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？

设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。讨论2：该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。培养基一培养基二1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是_______________；该类培养基的主要用途为_____________________。2.从目的用途上来讲，

属于选择培养基，目的是为了获得

。3.两种培养基共有的培养基成分有：

。固体添加了凝固剂琼脂分离、鉴定、计数、保存培养基二能分解尿素的微生物碳源、氮源、无机盐、水思考：仅通过选择培养基可以知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌吗？提出问题土壤中含有能分解尿素的细菌，我们如何分离它们？每克土壤样品究竟含有多少这样的细菌？基础知识只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离处分解尿素的细菌。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践土壤取样细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3～8cm的土壤层。因此，取样时，一般要铲去表层土。你打算在什么样的土壤中取样？样品稀释测定土壤中细菌的数量，一般需要1×104、1×105和1×106倍稀释进行平板培养。第一次做实验适当放宽，以保证能选取菌落数为30～300之间的平板。接种涂布平板的方法进行接种。设置对照。培养30～37℃培养1～2d，每隔24h菌落计数一次，选择菌落数目稳定时的记录作为结果观察相同的培养条件下，同种微生物会表现出稳定的菌落特征。观察你分离得到的菌落，记录菌落特征（如形状、大小和颜色等）设计实验防止培养时间不足导致的菌落遗漏。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践进一步实验对分离的菌株进行生化鉴定。若取土样5g，稀释1×105倍，取0.1mL稀释液涂布在三个平板上，培养后三个平板上的菌落数依次为46、47、54。求每克土样中有多少分解尿素的细菌。解：三个平板上的菌落数平均值=（46＋47＋54）个/3=49个；1×105倍稀释后稀释液中的种群密度=49个÷0.1mL=490/mL；因为已经高倍稀释，所以稀释液1mL≈1g，因此稀释液中种群密度可记作490个/g；未稀释前菌液的种群密度=490个/g×105=4.9×107个/g土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践到社会中去活菌计数广泛应用于食品卫生、水源污染度的检验和土壤含菌量的测定等方面。如果你感兴趣，可以从下列项目中选做一个，并走访相关部门或企业，了解它们是如何进行检测的。1．空气中微生物总数的检测2．水中细菌总数的检测3