药物基因检测课件

个体化药物基因检测应用.个体化药物基因检测应用.11药物基因组学的概念2北京精准医学服务平台3药物基因检测应用示例4

总结目录.1药物基因组学的概念2北京精准医学服务平台3药物基因检测应用21药物基因组学的概念.1药物基因组学的概念.3药物治疗效果的差异性

相同病症相同治疗药物相同剂量毒副反应治疗作用不起药效常见临床药物治疗有效率哮喘、糖尿病、抑郁症等

<60%丙肝、骨质疏松、风湿性关节炎<50%抗肿瘤药物<24%药物治疗的个体差异现象无法用传统药动学和药效学解释.药物治疗效果的差异性相同病症毒副反应治疗作用不起药效常见临4药物基因组学药物基因组学是“药物反应”的基因组学，以药物遗传多态性为基础，从基因组整体角度研究药物与遗传的关系，主要以药物效应和安全性为目标，研究各种基因突变与药效与安全性之间的关系，其目的是建立基于评价疾病易感性和选择药物治疗方案的个体化患者特征的遗传变异标志。药代动力学：研究药物在体内吸收、分布、代谢和排泄规律（确定给药剂量和间隔时间的依据)。药效动力学：研究药物对机体的作用、作用规律和作用机制。精准治疗：从基因组出发，研究药物与基因组结构之间的关系，指导临床用药，达到个体化治疗目标。.药物基因组学药物基因组学是“药物反应”的基因组学，以药物遗传559%药物不良反应与基因变异相关。药物疗效和毒性的个体差异基因检测基因变异

(单核苷酸多态性-SNP）药物代谢酶药物转运体药物靶点药代动力学药效动力学.59%药物不良反应与基因变异相关。药物疗效和毒性的个体差异基6数据库支持PharmGKB.数据库支持PharmGKB.7临床药物基因组学实施联盟.临床药物基因组学实施联盟.8现状至2017年4月5日，各国基因相关药物达251个美国223个，欧盟92个，日本53个，加拿大109个.现状至2017年4月5日，各国基因相关药物达259现状我国2012版临床药学重点专科评分标准中，均要求三甲医院开展基于药物基因检测的个体化药学服务。

SFDA已经更改很多药品的说明书，除了靶向药物以外，普通化学药物，如得理多（卡马西平）等，已经在说明书中明确标示：HLA-B1502基因阳性者，禁止使用卡马西平。.现状我国2012版临床药学重点专科评分标准中，均要求三甲医院10现状.现状.11..12广东省现状2017年广东省高水平医院建设标准中，在药学部的服务能力评分指标中明确提出：用药相关基因检测人数≥600，品种数≥6，基因个体化治疗方案设计例数≥300。.广东省现状.13..14检测原理A寡核苷酸探针：3’端接有荧光素（红圈），5’端接有淬灭基团（红点）未杂交时，成自身环状，不发出荧光。35Q+A35=T模板G有特异核酸SNP位点的模板杂交后，探针打开，淬灭基团远离荧光素，发出荧光.检测原理A寡核苷酸探针：35Q+A35=T模板G有特异核酸S15检测原理由于测序探针是荧光素标记的，利用荧光检测设备即可直接检测杂交染色的结果，荧光检测仪高灵敏地捕捉杂交测序荧光信号的变化，从而完成目标序列的精准检测，由此形成了新一代杂交测序，即数字荧光分析杂交/原位杂交荧光染色脱氧核糖核酸测序（简称“数字荧光分子杂交/杂交测序技术”）体系。该技术要求更多的模板核酸（要求不低于10000拷贝）才能完成测序，但不需要通过PCR环节。.检测原理.16临床基因检测技术对比探针杂交采集标本提取基因组DNA/RNAPCR扩增显色/扫描电泳检测纯化PCR产物基因芯片焦磷酸测序双脱氧标记毛细管电泳焦磷酸测序双脱氧测序、SangerRT-PCR实时荧光PCR血液标本白细胞染色体核型分析或杂交测序（系统自动完成）数字荧光分子杂交和杂交测序出现污染的高风险环节低风险环节避开PCR环节，前处理简单*金标准.临床基因检测技术对比探针杂交采集标本提取基因组PCR扩增显色17荧光分子杂交独特优势1.不怕污染:少量的异源DNA污染的信号很低，不会影响测序准确性。例如500拷贝的异源DNA污染，在PCR扩增中绝对是灾难级的，但在杂交测序中，异源信号的强度不到总信号强度的10%，则可以作为本底信号而被消除；2.简便：杂交测序没有繁琐的标本DNA提取和PCR扩增产物提取环节，将临床标本简单处理即可进行杂交测序，因此测序速度非常快，从拿到临床标本算起，约3小时即由检测仪自动报告测序结果。.荧光分子杂交独特优势.18准确性该技术初期对进行方法学准确性验证。与Sanger法进行比较，一致性为99%。.准确性该技术初期对进行方法学准确性验证。.19可检测药物：心脑血管科：氯吡格雷、阿司匹林、华法林、他汀类、硝酸甘油、ACE-I类、美托洛尔、叶酸、卡马西平、苯妥因等。肿瘤科：嘧啶类、铂类、紫杉醇、伊立替康、他莫昔芬、甲氨蝶呤等。心理科：氯氮卓、氯氮平、奥氮平、氟西汀、文拉法辛、西酞普兰、阿米替林、依地普仑等。消化科：PPI类、环孢素A、硫唑嘌呤、呋塞米和螺内酯等。呼吸科：吸入性糖皮质激素、短/长效β受体激动剂、伏立康唑等。内分泌科：磺脲类、二甲双胍和胰岛素等。妇产科：叶酸(胎儿神经管发育异常、习惯性流产等）。风湿免疫科/肾内科/血液科：他克莫司、环磷酰胺、别嘌醇、硫唑嘌呤等。.........可检测药物：.20开展情况至2016年底，覆盖医院284家。.开展情况至2016年底，覆盖医院284家。.21广东开展示例南方医院：卡马西平、苯妥英钠、磷苯妥因、奥卡西平、巯嘌呤、硫唑嘌呤、糖皮质激素冲击、甲氨蝶呤、氯吡格雷、阿司匹林、华法林、他克莫司、别嘌醇、环磷酰胺、阿糖胞苷、奥美拉唑、泮托拉唑、兰索拉唑、埃索美拉唑、叶酸、新生儿自闭症、孕中及产后抑郁、胎儿神经发育异常、习惯性流产、人工受精。中山孙逸仙纪念医院：卡马西平、巯嘌呤、硫唑嘌呤、别嘌醇、奥美拉唑、糖皮质激素冲击、甲氨蝶呤、他克莫司、环孢素、肾移植排斥风险、霉酚酸、丙戊酸、环磷酰胺、替莫唑胺、抗胸腺细胞球蛋白ATG。中大五院：氯吡格雷、华法林、阿司匹林、他汀、伏立康唑、环孢素、他克莫司、糖皮质激素、奥氮平、氯氮平、奋乃静、利培酮、文拉法辛、丙戊酸、别嘌醇、乙醇风险等。.......广东开展示例南方医院：.22检测操作分子诊断检测样本：1、血液样本2、组织样本血液样本：2～3ml静脉全血（EDTA抗凝紫管）白细胞富集耀金分测序反应耀金保个体化药学基因检测主要步骤.检测操作分子诊断检测样本：白细胞富集耀金分测序反应耀金保个体23条件支持该项目污染小，实验室要求为通风通水的普通实验室条件即可，不需要PCR认证实验室。我院开展此项新技术、新项目需新添置的设备1、荧光分析仪2、离心机3000R/M3、冰箱4、普通PC机5、移液枪*36、打印机开展此项新技术、新项目所需新购置的试剂1、耀金分

（耀金宝等为赠送）.条件支持该项目污染小，实验室要求为通风通水的普通实验室条件即24检测操作1、血液样本：2-3ml静脉全血(不需空腹)，使用一次性真空抽血管（EDTA抗凝紫帽管）采集，于4℃低温保存，保存时间不宜超过24h。2、使用预处理液NH4CL裂解红细胞，离心，获得白细胞。2、将白细胞溶解到耀金宝中，再取1.5微升，加入耀金分试剂管中。3、将加入了白细胞裂解液的耀金分试剂，放置入荧光检测仪中。4、荧光检测仪自动完成染色体核型分析和基因序列测定。5、荧光检测仪在2.5小时内自动报告基因型结果。6、药师解读报告，给出个体化用药建议。.检测操作1、血液样本：2-3ml静脉全血(不需空腹)，使用一253药物基因检测应用示例.3药物基因检测应用示例.26氯吡格雷基因检测.氯吡格雷基因检测.27氯吡格雷氯吡格雷是一种血小板聚集抑制剂。可用于防治心肌梗死，缺血性脑血栓，闭塞性脉管炎和动脉粥样硬化及血栓栓塞引起的并发症。.氯吡格雷.28氯吡格雷代谢路径.氯吡格雷代谢路径.29..30CYP2C19的中国人特异性

CYP2C19的表型多态性有明显的种族差异

白种人，弱代谢者发生率仅为3％

韩国人，弱代谢者发生率为13％

津巴布韦黑人中，弱代谢者发生率仅约4％

中国人，弱代谢者发生率为15％-17％付良青.国外医学药学分册,2001.28(2):74-78.CYP2C19的中国人特异性CYP2C19的表型多态性有明31..32PON1.PON1.33