从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序

..从业人员安康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的菌检测的方法，以标准操作程序，保证检测数据的有效性。二、适用范围：存的梯相关操作。三、生物安全要求BSL-2生物安全试验室的生物安全柜中进展。四、试剂及仪器设备试剂Cary-Blair运送培育基、亚硒酸增菌液S〔SB--脱氧胆酸琼脂XL、麦康凯琼脂、沙门显色培育基、结晶紫沙门培育基Y、TS--〔MI志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管仪器设备恒温培育箱、微生物鉴定仪五、采样方法标本应为颖的或转移至Cary-Blair运送培育基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到Cary-Blair运送培育基的粪便拭子。肛拭子不是最正确标本，仅在病人无粪便标本时承受。粪便标本：应采集自然排出的颖粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样局部。盛于清洁、枯燥、无吸水性的无菌容器，避开混入尿液、水和其他物质。肛拭标本：假设无法获得粪便〔如排便困难或婴幼儿4-5cm童约2-3c2-3入Cary-Blair运送培育基。1h；Cary-Blair24小时内送检。六、检验程序粪便标本或肛子粪便标本或肛子XLD或麦康凯SBG增菌可疑菌落接种TSIMIUXLD或显色平板可疑菌落接种TSIMIU生化符合者做血清凝集和系统生化反响生化符合者做血清凝集和系统生化反响菌株保存管保存菌株上送七、操作步骤XLD平板〔YS平板、麦康凯平板〕1管9ml改进亚硒酸盐磺绿增菌肉汤SB〔或SF液。1个无菌拭子取少量标本〔可见血或黏液的部位收集〕XLD平板的第一区，接着把拭子放入SBGXLD平板的其余区进展划线接种。假设是Cary-Blair运送培育基的粪便拭子，则轻搅混合标本后接种增菌液与平板。36℃±1℃培育，SBG的最正确增菌时间是液划平板。观看平板：取培育后的平板，观看有无可疑菌落。XLD平板可疑菌落观看：志贺菌在XLD平板上为粉红或无1-2mm，而大局部的大肠杆菌类的菌落为黄色、混浊、凸起、潮湿、边缘整齐或不规章2-3mm。大多数沙门菌在XLD平板上中心黑色的透亮、光滑、潮湿、边缘整齐、圆形的菌落〔2〕7.4.２YS平板可疑菌落观看：7.4.浅粉色、半透亮、光滑、潮湿、边缘整齐或不规章、圆形菌落，直径2-3mm；大多数沙门菌为无色菌落，粉红色，带或不带黑心，伤寒沙3-4mm。7.4.４SBG肉汤增菌：SBG16~18XLE36℃±118～24h。沙门显色平板2-3mm。7.4.4建议的初步筛查方案〔初步生化特征见表1：大局部沙门菌大局部沙门菌伤寒沙门菌枸橼酸杆菌TSI〔斜面〕TSI〔底面〕TSI〔产气〕MIU〔动力〕MIU〔吲哚〕MIU〔尿素〕A〔黄色〕A〔黄色〕A〔黄色〕+〔黑色〕小局部--+〔黑色〕+〔黑色〕+〔气泡〕--+〔气泡〕+〔气泡〕+〔气泡〕+〔布满+〔布满-〔沿接种+〔布满+〔布满+〔布满生长〕生长〕线生长〕生长〕生长〕生长〕-〔黄色-〔黄色-〔黄色加试剂加试剂-〔黄色圆环〕圆环〕圆环〕变红色〕变红色〕圆环〕-〔黄色〕-〔黄色〕-〔黄色〕-〔黄色〕-〔黄色〕+〔红色〕A：粪便〔或肛拭子〕SBG或SF增菌XLD分别接种TSI和MIUB〔或肛拭子〕SBG或SF增菌YS分别接种TSI和MIUC：粪便〔或肛拭子〕 SBG或SF增菌 XLD和麦康凯分别 接种TSI和MIUD：粪便〔或肛拭子〕 SBG或SF增菌 YS和沙门显色分别 接种TSI和MIUE：粪便〔或肛拭子〕 SBG或SF增菌 XLD和沙门显色分别 接种TSI和MIU生化初步鉴定3~5个分别较好的单个可疑菌落，分别接种到三糖TS-〔MI361℃培育18～242。系统生化试验沙门菌和志贺菌初步鉴定阳性菌经转种养分琼脂单，取单个菌落〔APE20E或全自动生化鉴定系统进展。血清学试验志贺菌血清学试验挑取生化反响实筛符合志贺菌的养分琼脂斜面，首先用四D群)。凝集者则用B群多价、D群和A1、A2、血清分别凝集。C群或A3～12C群的四种多价和A群另三种多价血清做玻片凝集。沙门菌血清学试验挑取生化反响实筛符合沙门菌的养分琼脂斜面，首先用A-F群O多价血清做玻片凝集反响。OO4→O10→O9→O7→O8→O19→O2→O11挨次凝集。H抗原凝集有不消灭自凝时，才可以报告阳性结果。结果报告最终综合生化及血清学结果，可以报告检出〔或未检出〕沙门菌〔或志贺菌。接在检验软件中录入相应结果。其他单位可以设计特地的报告格式反响给送检单位或送检科检测结果为阴性，可以报告为未检出肠道沙门菌和志贺菌；检测结果为阳性，依据检测状况报告具体的型别。检验部门应当保存全部受检样品的根本信息，检测到阳