抗核抗体测定课件

抗核抗体的测定

抗核抗体的测定（antinuclearantibody，ANA）又称抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称，能与所有动物的细胞核发生反应，主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质，激发机体产生许多抗不同核成分的抗体；（antinuclearantibody，ANA）又称抗核抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程度的阳性率如系统性红斑狼疮（SLE，95%~100%）、类风湿性关节炎（RA，10%~20%）、混合性结缔组织病（MCTD，80%~100%）、干燥综合症（SS,10%~40%）、全身性硬皮病（85%~90%）、狼疮性肝炎（95%~100%）、原发性胆汁性肝硬化（95%~100%）等，抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程度的阳性率如系统性红斑狼ANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；ANA无器官特异性和种属特异性；ANA主要存在于血清中；将检出ANA作为AID存在的依据。ANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；

抗DNA抗体：抗dsDNA/抗nDNA、抗ssDNA/抗dDNA等抗组蛋白抗体(AHA)：抗H1、抗H2A、抗H2B、抗H3、抗H4抗体等

抗非组蛋白抗体：抗nRNP/抗U1RNP、抗Scl-70、抗SSA、抗Sm、抗SSB、抗Jo-1、抗Rib抗体、

AnuA、抗DNP、抗D’E多肽抗体、抗DM53抗体抗RANA抗体、抗着丝点、抗Ku抗体等

抗核仁抗体：抗PM-Scl抗体、抗Th/To抗体、抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗体等（一）ANA的类型和临床意义

ANA谱抗DNA抗体：抗dsDNA/抗nDNA、抗s①抗天然DNA(nativeDNA,nDNA)抗体，又称抗双链DNA(doublestrandedDNA,dsDNA)

抗体。②抗变性DNA(denaturedDNA,dDNA)

抗体，又称抗单链DNA(singlestrandedDNA,ssDNA)抗体。对SLE有高特异性;SLE诊断标准之一。缓解期降低70%～90%SLE活动期增高药物疗效抗dsDNA抗体抗DNA抗体①抗天然DNA(nativeDNA,nDNA)抗体，

抗组蛋白抗体（anti-histonicantibody,AHA）：由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都有特异性抗体；AHA检出百分率抗dsDNA507090100药物诱导性狼疮只能检出此SLEAHAAHA抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体（anti-histonicantibod

可提取性核抗原(extractablenuclearantigen,ENA)

是盐水或磷酸盐缓冲液可提取性核抗原的总称，是非组蛋白的核蛋白，属酸性核蛋白抗原，由许多小分子量的RNA和多肽组成。抗ENA抗体可提取性核抗原(extractablenuclear有特异诊断价值的有以下七种：

①抗nRNP(nuclearRNP,nRNP)抗体；②抗Sm抗体；③抗SSA抗体；④抗SSB抗体；

⑤抗Scl-70抗体；⑥抗Jo-1抗体；

⑦抗核糖体抗体。有特异诊断价值的有以下七种：抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%~40%）抗U1-RNP抗体：MCTD95%~100%（高滴度）抗SSA抗体：SS40%~95%，其它CTD抗SSB抗体：

SS40%~90%，其它CTD抗Scl-70抗体：PSS25%~70%,标记性抗体抗Jo-1抗体：PM/DM25%，标记性抗体抗rRNP（Rib）抗体：

SLE特异性抗体

（10%~20%）抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%~40%）抗DNP抗体（抗核蛋白抗体）：核蛋白(DNP)抗原由DNA和蛋白质组成。DNP抗原有不溶性和可溶性两种，可分别产生相应的抗体。检出百分率抗DNP20406080SLE非活动期

SLE活动期抗不溶性DNP抗体抗DNP抗DNP100RA滑膜液中抗DNP抗可溶性DNP抗体抗DNP抗体抗DNP抗体（抗核蛋白抗体）：核蛋白(DNP)抗原由DNA和

抗核小体抗体（anti-nucleosomeantibody，AnuA)

是细胞核染色质的基本单位;

细胞凋亡而致核小体大量蓄积，诱导B细胞产生的AnuA是SLE

特异性的标志抗体。抗dsDNA抗体抗核小体抗体抗dsDNA和抗Sm阴性的SLE阳性率为60%～80%，特异性＞97%。抗核小体抗体抗核小体抗体（anti-nucleosomeanti（二）ANA的检测方法

将患者血清先进行稀释，可以做定量试验，在1:80稀释仍呈阳性时，对SLE的诊断有较大的参考价值。形成胞核基质—ANA—抗人Ig·FITC1.荧光免疫法（二）ANA的检测方法将患者血清先进行稀释，可以做定量试验

间接法：第一步：荧光素标记抗抗体第二步：已知Ag固定＋待测Ab——洗涤再加入抗Ab*——洗涤——镜检。特点：

1.制备一种荧光抗体，可检测多种Ag或Ab。

2.既可检测Ag，又可检测Ab。

3.灵敏度高，但易产生非特异性荧光AgAb（？）抗－Ab*间接法：第一步：荧光素标记抗抗体特点：

1.制备一种荧抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体测定课件抗核抗体核型与相关疾病核型荧光图形抗体相关疾病核膜型核周环状荧光抗dsDNASLE、慢活肝炎均质型核呈均质荧光抗DNA、AHA、AnuASLE、RA、PSS、慢性肝病斑点型核内颗粒状荧光抗ENAMCTD、SLE、PSS、SS、PM核仁型核仁有荧光抗核仁抗体PSS、雷诺现象、SLE着丝点型核浆细小相同颗粒荧光抗着丝点PSS、CREST综合征抗核抗体核型与相关疾病核型荧光图形抗体相关疾病核膜型核