血清直接胆红素（D-BIL）测定

血清直接胆红素（D-BIL）测定.实验原理直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物，在酸性条件下呈红色。.标本：病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。.标本存放：15〜25℃保存可稳定2天；2〜8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。.标本运输：常温条件下避光保存运输。.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。.实验材料6.1试剂：申能总胆红素试剂盒试剂+试剂26.L16.L1试剂组成试剂1：16X64mlEDTA-Na2氯化钠氨基磺酸试剂2：6X16ml2,4-二氯苯胺重氮盐盐酸EDTA-Na20.07mmol/L6.6g/L70mmol/L0.09mmol/L130mmol/L0.02mmol/L试剂准备：试剂为即用式。试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2〜8℃,若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试齐必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.SOP文件质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪.操作步骤.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析io.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与n质控做为未知标本进行分析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。.计算方法以TruCalU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以umol/L报告。手工测定计算方法为：△Au直接胆红素（Pmol/L）= X校准液浓度△As.参考值范围：W6.8mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。.临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使60〜70%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此

可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。.操作性能1线性范围:1.7—171mol/L精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5,AU1000批内精密度小于4%或SDW0.04,总精密度小于5%或SDW0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20X(umol/L)S(umol/L)cv(%)批间精密度n=20X(Pmol/L)S(umol/L)CV(%)样品16.00.203.34样品16.20.193.12样品212.80.121.00样品213.00.191.46样品336.40.260.71样品335.40.461.30方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对85个样品进行DBIL检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下：y=0.95x+0.68umol/L；r=0.995。灵敏度：1.7mol/Lo病人结果可报告范围：1.7〜171Hmol/L15超出范围结果处理本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16.病危报警值的处理16.病危报警值的处理无。17.方法局限性本法线性上限为171mol/Lo样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度(1704umol/L,甘油三酯浓度W22.6nlmo