仿制药分析方法与稳定性研究课件

仿制药分析方法的验证和药品稳定性的研究谭海松PhDNov27,2011仿制药分析方法的验证和药品稳定性的研究谭海松PhD主要内容仿制药的GMP要求仿制药分析方法的验证仿制药稳定性的研究主要内容仿制药的GMP要求FDA官员来制药公司检查时的留言我们并不期望在检查过程中所有事情都是完美无缺的,但是我们的确希望所检查到的东西全在你们的有效控制之中.FDA官员来制药公司检查时的留言我们并不期望在检查过程中所有药检局对仿制药的要求仿制药品系指仿制国家已批准正式生产并收载于国家药品标准的品种.仿制药与被仿制药应具有相同的剂型,剂量,质量,用途,用法,效果和安全度.药检局对仿制药的要求仿制药品系指仿制国家已批准正式生产并收载仿制药的质量控制药品测试分析方法分析方法验证科学性(理论正确)药品质量可靠性(避免人为和仪器误差)准确性(正确反映真实值)仿制药的质量控制药品测试分析方法分析方法验证科学性药品质量可分析方法验证的前提:GMP标准标准物和试剂仪器操作人员分析方法验证标准作业程序

(SOP)实验室……分析方法验证的前提:GMP标准标准物和试剂仪器操作人员分析方标准物和试剂的SOP要求包装上注明生产厂家,批号和有效期如生产厂家没有提供有效期,SOP要规定有效期实验记录要有所用到的标准物和试剂的生产厂家,批号和有效期标准物和试剂的SOP要求包装上注明生产厂家,批号和有效期分析仪器的SOP要求所有分析仪器都要有使用记录分析仪器在使用前要用标准物校准分析仪器每半年进行一次仪器校准分析仪器的SOP要求所有分析仪器都要有使用记录HPLC在使用前用标准物校准举例溶剂空白定量限或分离效率检查标准物溶液-1(注射3次)标准物溶液-2(注射3次)样品溶液(每隔10个样品注射标准物溶液-1,2)

. .标准物溶液-1标准物溶液-2定量限或分离效率检查溶剂空白HPLC在使用前用标准物校准举例溶剂空白实验室的SOP要求所有仪器都要有校准日期或相应的注释所有样品和溶液都要有批号,有效期和来源实验室中的工作人员要有必要的安全防护实验室要保持整洁实验室的SOP要求所有仪器都要有校准日期或相应的注释工作人员的SOP要求每个工作人员都要有相关SOP的培训记录工作人员每年至少参加一次GMP培训工作人员的SOP要求每个工作人员都要有相关SOP的培训记录主要内容仿制药的GMP要求仿制药分析方法的验证仿制药稳定性的研究主要内容仿制药的GMP要求仿制药的研发过程找到原料药稳定性的研究专利保护将失效或专利挑战生物等效性临床试验简化新药(ANDA)申请分析方法的研究和验证配方和生产工艺的研究

仿制药的研发过程找到原料药稳定性的研究专利保护将失效或专利挑成品药片分析样品的制备实例把10片药品放于500毫升容量瓶中,加入400毫升溶剂,以200rpm摇30分钟,然后加入溶剂到刻度.摇匀后,以8,000rpm高速离心10分钟,取上清液用高压液相色谱(HPLC)进行分析.分析方法的验证API全部溶于溶剂HPLC正确分析出样品溶液的浓度分析结果的可靠性成品药片分析样品的制备实例把10片药品放于500毫升容量瓶中分析方法验证的内容API全部溶于溶剂 准确度,精密度正确分析出样品溶液的浓度 专属性,线性,范围,检测限,定量限分析结果可靠性

耐用性,精密度分析方法验证的内容API全部溶于溶剂分析方法验证内容专属性线性准确度精密度范围检测限,定量限耐用性样品溶液稳定性分析方法验证内容专属性分析方法验证-专属性专属性的定义

在其它成分可能存在下,分析方法能够正确检测出被分析物的特性.专属性的测定举例:高压液相色谱分析方法验证-专属性专属性的定义高压液相色谱的系统适用性色谱峰的容量因子:1<k<20色谱峰分辨率:R>=1.5色谱峰的拖尾系数:T<2.0主要成分色谱峰纯度:>=99.9%(LC/MS,DAD,UV)高压液相色谱的系统适用性色谱峰的容量因子:1<k<20高压液相色谱的系统适用性色谱峰的容量因子:k=t/tM-1色谱峰分辨率:R=2(t2-t1)/(W1+W2)高压液相色谱的系统适用性色谱峰的容量因子:k=t/tM-1高压液相色谱的系统适用性色谱峰的拖尾系数:T=W0.05/(2f)高压液相色谱的系统适用性色谱峰的拖尾系数:T=W0.05/高压液相色谱的系统适用性色谱峰分辨率:2.0色谱峰的拖尾系数:1.0高压液相色谱的系统适用性色谱峰分辨率:2.0分析方法验证-线性线性的定义

在测定范围内,检测结果与被分析物浓度呈线性关系的程度.线性的测定 在被分析物浓度20%-150%内,至少测5个浓度.例如20%,80%,100%,120%,150%

最小二乘法线性回归,R>=0.999分析方法验证-线性线性的定义线性举例-HPLC线性举例-HPLC线性举例-HPLC线性举例-HPLC分析方法验证-准确度准确度的定义

测定结果与真实值之间的接近程度.向制剂中加入已知量的被测物进行回收率测定来验证.

准确度的测定 在3个浓度(80%,100%,120%)中,每个浓度制备3个样品.每个浓度3个样品的平均回收率必须在98-102%.分析方法验证-准确度准确度的定义分析方法验证-精密度精密度的定义

同一样品多次取样测试结果的接近程度

精密度的测定:%RSD<=2%(6个样品) 重复性:同一分析人所得结果的精密度 中间精密度:同一实验室,不同的日期,设备和人员所得结果的精密度 重现性:不同实验室,不同人员所得结果的精密度分析方法验证-精密度精密度的定义分析方法验证-范围范围的定义

分析药品达到一定准确度,精密度和线性的区间.范围的要求 含量测定:80-120%

含量均匀度测定:70-130% 溶出度:50-150%

杂质测定:规定限度±20%分析方法验证-范围范围的定义分析方法验证-检测限和定量限

检测限:试样中被分析物能被检测到的最低量,一般定义为信噪比大于3:1定量限:试样中被分析物能被定量测定的最低量,一般定义为信噪比大于10:1

分析方法验证-检测限和定量限检测限:试样中被分析物能被检检测限和定量限信噪比的测量检测限和定量限信噪比的测量分析方法验证-耐用性

耐用性的定义

测定条件发生小的变动时,测定结果不受影响的承受程度

耐用性测定的举例:高压液相色谱 流动相:组成,pH值,流速的变动

色谱柱:厂家,批号,柱温的变动

分析方法验证-耐用性耐用性的定义分析方法验证-样品溶液稳定性

样品溶液稳定性的定义

样品溶液在一定储藏条件下可被重复使用的时间样品溶液稳定性的测定 样品溶液稳定性测定结果是初始结果98.5-101.5%.

分析方法验证-样品溶液稳定性样品溶液稳定性的定义仿制药分析方法的来源中国药典美国药典（USP）欧洲药典（EP）日本药典（JP）原料药厂家文献仿制药分析方法的来源中国药典分析方法验证的参考文献ICHQ2-ValidationofAnalyticalProcedures美国药典（USP）分析方法验证的参考文献ICHQ2-Validation主要内容仿制药的GMP要求仿制药分析方法的验证仿制药稳定性的研究主要内容仿制药的GMP要求稳定性测试目的考察原料药或制剂的性质在温度,湿度,光线等条件的影响下随时间变化的规律.为药品的生产、包装、贮存、运输条件和有效期的确定提供科学依据,以保证临床用药安全有效.稳定性测试目的考察原料药或制剂的性质在温度,湿度,光线等条稳定性测试的趋势包括更多的贮藏条件以使临床实验可在不同国家进行提早开始稳定性研究来附和不同国家药检局的要求稳定性测试的趋势包括更多的贮藏条件以使临床实验可在不同国家进稳定性测试需要控制的条件测试内容和标准贮存条件

测试频率测试完成时间稳定性测试需要控制的条件测试内容和标准原料药的测试内容和标准外观变化:颜色物理性质变化:晶型,熔点,热失重,水含量主要成分含量:97-103%杂质含量：<0.15%原料药的测试内容和标准外观变化:颜色仿制药对原料药的要求与被仿制药品的原料药具有相同的物理化学性质:如盐,晶型和异构体(对映体)原料药的杂质限度原料药杂质的含量应低于质控限度杂质的种类和含量与被仿制药相同如杂质的含量明显高于质控限度且与被仿制药不同,应做必要的安全性研究原料药中基因毒性杂质要被有效控制仿制药对原料药的要求与被仿制药品的原料药具有相同的物理化学性原料药的杂质限度最大日剂量报告限度鉴定限度质控限度<=2g0.05%0.10%或1.0mg0.15%或1.0mg>2g0.03%0.05%0.05%原料药的杂质限度最大日剂量报告限度鉴定限度质控限度<=2原料药中基因毒性杂质的控制基因毒性杂质举例alkylatingelectrophiliccenter,unstableepoxide,aromaticamines,aromaticnitro,azo-structure,N-nitroso-group基因毒性杂质的控制限<1.5ug/day原料药中基因毒性杂质的控制基因毒性杂质举例药物制剂的测试内容和标准外观变化:颜色主要成分含量：变化小于5%降解产物:<0.2%溶出度:>70%at45min物理性质:水含量,颗粒度药物制剂的测试内容和标准外观变化:颜色制剂的杂质限度最大日剂量报告限度鉴定限度质控限度<1mg0.1%1.0%,5ug1.0%,50ug1-10mg0.1%0.5%,20ug1.0%,50ug10-100mg0.1%0.2%,2mg0.5%,200ug100mg-1g0.1%0.2%,2mg0.2%,3mg1g-2g0.05%0.2%,2mg0.2%,3mg>2g0.05%0.1%0.15%制剂的杂质限度最大日剂量报告限度鉴定限度质控限度<1mg0溶出度测定模拟人体的消化过程溶出度测定模拟人体的消化过程溶出度测定的重要性控制药物制剂质量的一个重要指标决定药物制剂稳定性的一个重要依据用来评价药物制剂质量是否受原料药,配方,生产工艺和生产地变化的影响

溶出度测定的重要性控制药物制剂质量的一个重要指标USP1:转篮法溶出度测试过程中,药品滞留在转篮里可以调节缓冲液的值而不影响篮里的药品适用于片剂,胶囊等USP1:转篮法溶出度测试过程中,药品滞留在转篮里USP2:桨法溶出度测试过程中,药品留在容器底部的中间适用于片剂,胶囊和悬浮液等USP2:桨法溶出度测试过程中,药品留在容器底部的中间USPII

溶出度测定仪器USPII溶出度测定仪器USPII溶出度测定举例USPII溶出度测定举例USP3:往复式圆筒法药品随圆筒在溶液中做上下运动不同缓冲液可放在不同容器中适用于片剂,胶囊和缓释药等USP3:往复式圆筒法药品随圆筒在溶液中做上下运动USPIII

溶出度测定仪器USPIII溶出度测定仪器52USPIII溶出度测定举例52USPIII溶出度测定举例USPIII溶出度测定举例USPIII溶出度测定举例溶出度测定方法的要素选择适当缓冲液(pH):API在缓冲液中的溶解度是药品100%释放的5-10倍.设定适当的转速(USPI,USPII):50rpm,75rpm,100rpm使用适当的分析方法:UV,HPLC

溶出度测定方法的要素选择适当缓冲液(pH):API在缓冲液海南华益泰康药业有限公司成立于2010年6月，海口市引进的重大科技项目，总投资1亿元人民币。以新药研发为主，集生产、销售于一体的综合性国际化医药企业。公司关键核心研发人员均来自美国，有10年以上在美国著名制药医药公司药物制剂开发和技术管理的经验。海南华益泰康药业有限公司成立于2010年6月，海口市引进的重海南华益泰康药业有限公司公司总建筑面积达1万多平方米，4000平米的制剂研发和生产车间，2500平米的分析研发和质量控制实验室。生产车间及研发实验室完全按照美国GMP要求标准建设，并引入国外药厂的现代化设计和管理理念为产品把关。目前有近十个项目处于研发阶段，大部分是缓释和肠溶等复杂剂型。海南华益泰康药业有限公司公司总建筑面积达1万多平方米，400分析实验室仪器设备液相色谱：安捷伦1260和1100型气相色谱：安捷伦7890加顶空自动进样紫外可见：安捷伦8453加自动进样器溶出仪：安捷伦708加自动进样器溶出仪USPIII：安捷伦(Varian)Bio-Dis傅里叶红外：岛津Prestige分析实验室仪器设备液相色谱：安捷伦1260和1100型

稳定性测试的贮存条件气候带温度(OC)湿度(%RH)温带2145地中海气候,亚热带2560干热带3025湿热带3070国际气候带

稳定性测试的贮存条件气候带温度(OC)湿度(%RH)温带2

稳定性测试的贮存条件贮存条件最短时间(月)长期试验25°C/60%RHor30°C/65%RH12加速试验40°C/75%RH6

稳定性测试的贮存条件贮存条件最短时间(月)长期试验25°稳定性测试的储存条件贮存条件最短时间(月)长期试验5°C±3°C12加速试验25°C/60%RH6稳定性测试的储存条件贮存条件最短时间(月)长期试验5°C稳定性测试的储存条件贮存条件最短时间(月)长期贮存-20°C±5°C12稳定性测试的储存条件贮存条件最短时间(月)长期贮存-20°光照稳定性的测试总光照：1.2millionluxhours光强：200watthours/㎡实验要求：裸露在光源下放在包装中光照稳定性的测试总光照：1.2millionluxho成品药有效期的确定稳定性好的药品一般以长期试验结果来确定有效期综合加速试验和长期试验结果进行统计分析如三批统计分析结果差别较小,取平均值为有效期如统计分析结果差别较大,取最短的为有效期成品药有效期的确定稳定性好的药品一般以长期试验结果来确定有效稳定性的测试频率

长期试验第一年:每三个月测一次第二年:每六个月测一次第二年以后:每年测一次加速试验六个月时间:至少测三次,包括起始点和第六个月的点.稳定性的测试频率长期试验稳定性的测试时间和有效期贮存条件(°C/%RH)测试时间(月)13691218每年结束5

T

T

T30/65or25/60

TTTTTTT40/75(T)TT

50TT

光照试验T

有效期61212182430+12结束稳定性的测试时间和有效期贮存条件测试时间(月)136912

测试完成时间测试时间(月)完成时间(天)<1141-321>328测试完成时间测试时间(月)完成时间(天)<1141稳定性测试样品的选择最少采用三批样品采用一定规模生产的样品能够代表大规模生产条件下的产品质量合成路线配方包装

稳定性测试样品的选择最少采用三批样品稳定性测试样品生产规模的要求口服固体制剂:片剂,胶囊等10000个制剂单位大体积包装的制剂:静脉输液稳定性试验所需总量的10倍以上稳定性测试样品生产规模的要求口服固体制剂:片剂,胶囊等哪些变化需要重测原料药的稳定性改变合成路线改变合成过程中最后的纯化步骤改变大规模生产的步骤改变分析方法和规格要求哪些变化需要重测原料药的稳定性改变合成路线哪些变化需要重测成品药的稳定性不同的制剂和配方改变主要添加剂的比例改变生产步骤,生产设备和生产地改变药品的包装哪些变化需要重测成品药的稳定性不同的制剂和配方稳定性研究的特点周期长样品选择较严格重测率高成本较高稳定性研究的特点周期长稳定性研究的参考文献ICHQ1A-StabilityTestingofNewDrugSubstancesandProductsICHQ1B-StabilityTesting:PhotostabilityTestingofNewDrugSubstancesandProductsICHQ3-Impurities稳定性研究的参考文献ICHQ1A-StabilityTFDA483举例YourfirminvalidatedanalyticaldatawithoutanyscientificjustificationYourinvestigationattributesanunknownpeaktoinjectorcontaminationbutthispeakwasnotpresentinprevioussystemsuitabilityorsampleinjectionsYourcorrectiveactionaddressesproductdispositionbutdoesnotaddresshowtopreventreoccurrenceoftheOOSresultFDA483举例YourfirminvalidateFDA483举例Stabilityfailureswereattributedtoine