基因重组及遗传

第五章细菌基因重组及遗传分析基因重组（generecombination）是指不同来源的遗传物质通过转移和交换而重新组合的过程。高等动植物和许多产生有性孢子的真核微生物的基因重组都是通过有性世代来完成。在细菌中，提供部分遗传物质或少数基因的一方称为供体（donor），而获得基因的另一方称为受体（recipient）。第一节转化（Transformation）转化：是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型细胞的DNA而使受体的基因型和表型发生相应变化的现象。转化现象的发现和转化因子的证实对促进现代分子生物学的诞生和发展产生了巨大的推动作用。

在实验室条件下，通常用CaCl2、cAMP、低温培养、PEG介导及电脉冲等方法转化细菌或其它微生物。细菌转化的过程大体可分为三个阶段：感受态的出现DNA的吸附和进入DNA的整合感抖受眉态户的稳出赵现感现受原态榜（c萝o侍m墨p来e爸t者e眼n童c伤e）粗：是议指观受忙体菌细万胞腔最膏容播易到接弟受培外日源D好N据A并厕使彻之苍不处被D击N咽A酶拖降蔽解可的铸生轨理艇状猛态惧。一舰、逢转员化坦过盯程叮和雷机异制细蚕菌诉细尊胞认在第特饶定许时炭期绍产仆生充一液种染称箱为猛感描受董态途因泰子廉的艘小杨分咱子痛蛋贵白啦（5下-莫1夕0铺k帜D）胳。设这刺种躺感劲受衡态寄因授子蓝可寇与谎细赠胞岁表飞面魂受缩慧体袭蛋沙白温结虾合变，霜使匪细访胞雁产述生冷感申受小态床特敌异翼蛋匆白傻，爷其贞中陪包张括历细游胞吧壁廉自年溶为素钻。否自赵溶远素曲使寒细雾胞办表吵面盘的D臭N平A结棉合拉蛋阶白渐及卵核妈酸幕酶酒裸间露余出哨来断，阵使移其铜具盾有轿与D晌N鱼A结聚合励的愿活坚性游。美因脑此芦，缺当紫细辜菌趋表折面齿出筛现框许督多D改N抛A结巨合火位陷点杠时滩，叮就仁意歼味潮着朱细侵菌培出话现党了妙感垮受塑态疲。4遗.进粘入晶细沙胞答的吧单踩链挂与沈寄槽主D郊N桂A同这源抵区盏重潜组棒并宅整健合恼到克染横色仓体辅上革垫兰姥氏拴阳眠性斜菌1羞.双欢链D各N酱A片兼段倍在D纷N怒A结肾合嘱蛋断白胜（源黑惠色出点董）娱的茫帮返助婶下抗吸勾附仇到阴细爬胞畏表照面煮并州由来核概酸坚酶损（浸紫绳色孕椭通圆互）傅切挥成虎缺故口2班.由素核伸酸悼酶的降祝解乔其扭中普一努条敲单孩链3害.未验被堪降男解脸的鸟单哗链致与耽感研受布态谢特雕异止蛋况白疗相拨互繁作附用会并齿进扮入吴细隆胞D蓄N杆A的医吸中附扮和肚进妙入在坊流甘感殿嗜锻血菌中同，迁其徐感补受柄态讨细矛胞搞形啦成允一预种黑结肥合铜双躬链D树N柔A的游膜坏结纠构毛，迅称忆为掉转变化彩小展体懒（t左r翅a致n橡s兼f誉o筋r沿m息a勾s懂o穴m茧e）役。牙该隆小租体幅吸厌附D辞N螺A后腾，墨与键细粘胞殖的仆内警外资膜眼相卡融菌合转而逗转虏入渣细贩胞艇内买侧麦，脆再生将逝双序链蒙变孔成尖单舍链D烦N家A。转添化泥小婶体双掀链D仿N建A被讽转萝化合小什体侄摄肤取转哪化揪的糟双才链D巨N焰A（3秃0筋-窜5奴0娃k苗b）弄结桶合菌到革膜方受心体劳上很料快越进乏行躲同后源辜重长组级使柄外糖源D争N循A整歼合旋到伤染锄色首体被上革由兰等氏娇阴找性日菌D如N狱A在嫌进割入迁感罢受勿态亡细栽胞之前百，畜要涛经抽过健可航逆划性痛吸仓附垂和阻不寻可薪逆聚性蔬吸雕附饰。可溜逆想吸丘附标的D盆N裤A对D宽N垃A酶辨敏湿感歇，绣并悠可喝以听洗汗脱任下淹来家。霞随基着坏感胳受孕态迁细宾胞属膜吧蛋越白赠的战参才与震，贤可押逆灶性纺吸漏附多逐米步俗向呆不柿可勺逆宗吸剃附零转质化沫，撇不橡可园逆筋吸脾附D痒N弱A对D当N探A酶复不混敏毛感层。吸粥附辈到搞细裙胞冷表虫面疲是上双财链D钩N末A，菊而础不割是喉单再链D阻N铃A实妈验季证葵明扒：肺沿炎昏链充球象菌农的腰转弊化哭因桑子锦在1弟0哪0含℃下棒逐痕渐桃失法去温转郑化阁活钟性(逆D耽N辟A发批生园变泽性)。在剂逐谋渐秀冷休却绢过耀程妄中谱活奏性竭逐畅渐众恢纸复(单乓链D丧N惯A复系性居成征双屑链)。说县明且完刃整被的D香N虫A双籍链狮结弊构则对连于汇转忍化怖活促性股来罩说会是列必顿要采的伞，快转阀化弓的士第伴一守步占，晋需秀要撤双见链D宋N甘A才哀能愚结孟合范到差细希胞科表运面花的蛇结拒合冰位原点钞上茧。当D狠N君A吸剃附傲后己，哄被谊酶黄解吵开遗成井单肝链D痕N陵A，再只售有捎单序链D婆N慈A才奔能泰进刘入竭细飞胞耕内荡并渔与舞受喝体贱染尝色肃体D薪N桂A进恶行箱整漫合辅。流岁感荷嗜瓜血惹菌悬特光异良性套摄饶取鼠序排列栗：5狮’失A联A旁G狐T震G膨C塑G挖G暗T奥C兼A司3肚’淋词病丈奈喝瑟福球骡菌乒特地异澡性才摄躁取机序烦列元：5酬’雄G景C稀C希G投T着C放T叔C宏A吩A亡3云’在列流晒感畏嗜位血蒜菌报的招染圈色坏体址上召有6遇0惯0个诵拷讨贝藏的奥摄障取扯序秋列茂。忌摄默取磁序展列渔虽公然懒只妄有1梨0蜂-暮1涛2浊b锁p，能但问很遥少栗随隐机舍地针出良现丽在坊其转他猫物街种躲的D猜N妄A序译列哥中悉，短因恳此伪这莫些舟细走菌目对店外吧源D勤N后A的煤吸青收陪具久有嫩选铺择例性请。为昆什摘么承有简些晶细络菌烛对范摄教取穷的D兽N萌A有翅特腥异撞性散要先求岂呢点？近酸年肢来胶的弯研欠究字表计明输，G-菌扮和G＋菌俘对恒单史链D球N普A也冷能窃进速行住有罗效厨转腥化盐，近但谨一药般陕是用在鹊较奶低可的p街H值滨下向进样行薄的枝。外尖源D己N师A片塔段套在志受戚体般细桨胞棕中顶的惩命恩运拣：淡外寇源D匙N莲A（旷红榜色廊）转惜化问到玻受绑体怀细狐胞岛后裤，胃通字过荣同尖源淘重萝组秩整企合薪到难染吃色俗体桑上鬼，朗否卷则卷被淹降竹解减成姻核舅苷章酸史。D轰N特A的赞整唉合转贸化永为突相番同毯或贫相围近吉物旬种限之测间硬的赵同泼源碌重翼组梁提店供底了肺可笑能生性蔑，掉是沉自域然齿界电中顷基品因讲交隔换顾的颜一倾条玩重认要罩途杀径坊，防在掌生渣物掉变派异夸和名进享化沙中辈起扛着犬重爸要散作走用妹。转投化英的灭效抛率彼决偷定晃于型下着列帝三农个糠内迁在跌因出素惠：受狸体绘细雕胞士的良感母受猎态铃，折决毒定烈转击化D锦N看A能搂否桂进金入逮细分胞受础体读细娱胞注的俯限详制飞系楚统多，焰决茅定趣转虑化D俗N权A在敢整偿合进前蜻是铲否裕被旨分农解供猫体控和宜受宴体D搜N抛A的愉同尝源昼性罚，识决制定踏转牛化D唇N艺A的总整秧合忠。弱由疏于缩慧转加化D趁N抽A总慎是豆与还顺寒序昆相读同陶或盏相椅似果的污受属体D引N曾A配倦合骗，忽所不以狭亲饱缘工关嚼系倚越厨近攀的钓其妥同党源冰性钢也挡越值强遭，初转捞化挠效视率离也四越脚高施。二棒、输人学工涛转蛾化通晕过懂二歉价没阳后离析子趁处但理愉，俩大叫肠挠杆殖菌储等良部壤分G-细处菌模能窗产谱生脾感袍受盒态通单过现制剥备抵原朱生竖质应，纵大纯多环数纺细登菌微特偶别纲是魔某谢些G+细时菌已暮知得许求多纤细轨菌尊包拉括杀大株肠研杆捉菌呜均相无踪蝶自余然欣转数化朋的堤能虎力柄，里但旬经滑人察工斗诱挪导虾可裁使风它锅们绕形狮成淹感垒受禽态扬。贡如惊：1妇9蒜7迁0年M浪a名n霉d陶e码l和H信i眉g艘a首捷先势发篮现D鲜N童A在统含瓣有哀高喜浓讨度C渡a2拔+的妇条切件千下颤能察够狠被控受销体形细油胞烘摄熄入窃和交转叨化捏，由随岁后踏的梅实催验部证散明轮由C有a2惜+诱交导级的势人跌工木转纱化桌的挣大勤肠阁杆残菌倍中采，船其至转某化D暴N佣A必福须盒是造一绘种关独验立D拼N纤A复献制编子纸。大掉肠杜杆站菌炭的皆转抱化随振着获研逐究遥技元术晨的筋改丑进凭和锦经忌验闸的匆积租累周，串人藏们疯已折经骆建础立大了寸用C熟a2链+、M旨g2绞+等汉诱育导终转汽化罪的演标啦准盖程附序央，比能楼对薄大贯肠颗杆仗菌饰菌嫌株C驻6捉0握0、J章M惯l需0汪1、J净M自l杯0见9、D完H锡5啄a等络进舱行愧有笔效圆的依转弄化瞎。先符将不大泡肠律杆沸菌火培旗养胖至O笋D6昨0细0=加0孙.抱5～1接脚着飞用5继0酒-状1拨0孝0观m采m犁o孤l／L铜C宗a进C焦l2处胃理放制霉备吃成丢感房诚受复态稿细残胞然溪后笼将D津N结A与慌感忽受冲态融细跃胞包混琴合在剂冰论浴折中别反愉应2午0巾-叔4鼻0川m奖i秀n进夜行4矩2窜℃热灭击送可场增屈加D丛N述A的弓吸裙收情（1同07个苗转犁化惜子/狱u序g质压粒D垃N馆A）最汉经顾典碌的陡转雾化冰方片法常是迷：由蓬于标异沫源务的秀质接粒D诱N俯A分苍子吧能格够碧进惨入马大粉肠奥杆亿菌犯细鸦胞归，棵所女以厚大贷肠芝杆就菌舱摄食取D路N绳A是迅非滨选倍择职性哥的狼。P阵E益G介固导虎的胞转腔化不昼能住自霜然装形伏成引感肃受吼态列的G+细魂菌冬如升枯此草咱芽怜孢矮杆携菌阵和块放附线怖菌轮，僵可惠通恨过聚跟乙沫二遭醇(冠p叠o瓦l格y搅e蜜t从h递y循l牲e仇n虑e续g伐l锦y谷c惧o兵l，P伏E疾G，壮一祝般俯用P驳E消G默6焦0和0槐0壁)的缴作磁用帐实每现川转疮化库。这纺类封细危菌胳必护须确首炊先雷用乏细仅胞拍壁帆降宪解集酶娘完和全顺除孔去郊它遵们张的斥肽简聚交糖哨层友，湿然搅后奇使竹其侍维畜持宜在绒等返渗骨的筐培牢养互基背中贼，烧在P凶E瘦G存彻在毯下破，佛质蒜粒匠或泻噬悠菌怜体D么N磨A可烂被帝高探效锣地探导疮入珠原坦生额质狱体迹。电些脉遣冲陶法欺（电颜穿鹊孔亦法）在束许贡多挎细译菌痕和启真轿核挑系脱统强中承，闪它荡们染既之无蜜自跌然养的尾感签受嘱态泊呈总现嘱也柏不到能砌用坡上凯述街的警方婆法进建霉立悦感寄受建态置。诞因膀此讲人齐们岂发镜展顺了纠一镜种芳新屈的凉将宿核抵酸概分坡子岁导然入控细咽胞愉的朋方羡法肝，号最障突摄出通的酱是电李穿相孔(刃e逃l贺e族c单t察r匹o扶p逼o纳r毅a洋t暴i当o苏n魂)法趣和透基钟因秩枪(敢b唱i劫o诵l血i粮s晴t疑i懒c辉)转点化已法。电价穿毅孔完法僻：是劳用萌高提压夫脉插冲与电棚流梅击锡破家细号胞诉膜砖或锁将例细付胞仆膜柱击读成维小按孔锻，俭使码各揪种刑大樱分堤子(包喝括D胳N毒A潜)能誓通俩过欣这击些耐小置孔乖进后入芹细瓶胞懒，纸所惑以割又毫称缠电碎转损化滋。电饶场兼强芝度羊、锁电栏脉却冲医的州长海度雨和D蹈N协A浓碗度基叠因前枪(目b研i低o绿l芬i堆s栋t选i赌c还)转怨化基峰因易枪商转焰化赔法葡首到先既由S仁a惊n舟f赶o粉r棵d报贩道体，似该乖方纽奉法贱是趋将舒包覆裹抚有D霜N尾A的脱钨是颗费粒闸像脚子谷弹废一淡样浴用挽高姨压宵射菠进排细绞胞股并监使D画N冰A留拍在矮细鼓胞变内常，递特鞠别阁是扶留深在舅细单胞田器狱中孙。用课这授种经方造法孝首惭次云成婆功微地有将D纸N暑A导逆入组酵拔母胳线壶粒扶体对并勤引墓起挪线银粒储体娱遗雷传玩变壮化驾。蔽基戚因仪枪摸转活化注现访在戴被殿广瞒泛观地贪应划用给于丙植混物售的敞转墨化尚中三次、犹建车立萄转迅化等方塞法券的抱策胳略被乖转湿化泰对犯象救（丛转盗化拴受咸体背）转迎化D次N浑A的段构超建鲁（谋目兼的杜）转庙化孤方映法瓦选铺择四逼、走转愿化猾应侄用在最转为化奔中铲，静如观果击转瓦化基因们子赔的骡两晌个神基凉因第是拖连堂锁填的赶，罗那储么撑它彻们挤可雨以斧同槽时颠被西转举化姻，壶也拾称像为炉共核转僚化匹，锹连船锁问的极两盗个栽基歼因南距促离罩越码近昂，型其秩共宰转县化镜频写率叶越邻高振，街反加之允则结低昼。别利刮用优共涨转歼化有率备和娱连管锁屡的妄二逗基拒因梳间违的舅距键离厉的脏反裁比汉关慢系摔可羽进誓行即基胜因家定要位写的租工圾作弱。1踪蝶.连遣锁众检仗测2次.遗寸传往图告谱惭的斧绘眯制t撞r拜p且2+h咏i蛮s赤2+t米y结r忆1+（中供倾体招）×t筝r醒p涌2-h炸i翠s单2-t认y狼r纯1-（课受呀体府）检的必转习化跟类龙型t许r质p玻2济-扒h督i梅s留2重小组努率=2碰6镇0华0仍+因1关0政7揪+拾3能6胡6匪0却+慌4率1名8×帝1节0师0斑%更=禁3辞4赞%1饥1往9视4坚0减+面1破1杰8框0佣+韵2砌6得0语0聋+楚1梳0樱7扶+燥3再6胀6腰0陷+胖4筋1善8t择r扩p个2贞-朵t茶y锐r桶1重览组蛇率=2峡6古0荷0遇+躲1敬1净8持0忌+抄3返6胡6晕0沸+勾6辫8辟5×散1雪0切0沿%翼=犁4矿0壁%1鹿1崖9棚4唤0慰+杨1达0要7谈+毁2谋6虏0筑0房诚+哄1然1巾8税0挤+冈3键6掘6脚0赌+腹6览8葱5h追i故s峰2恋-亏t蹈y演r孝1重勉组嫩率=4牙1哨8微+掏1四1竹8来0蚕+厘6湖8嫁5禁+宽1亡0络7×花1削0拣0振%柔=妇1蜜3响%1扯1逐9宏4祝0斗+塔3荣6号6典0原+密4肥1叶8枪+纷1猜1绪8银0业+勾6尤8个5零+浩1惊0条7trp2his2tyr1

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