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第八章基因工程基因工程(geneticengineering)、基因克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆克隆(clone)无性繁殖应用酶学的方法,在体外将目的基因与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子(复制子、重组体),继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子拷贝,或其表达产物。基因克隆示意图基宏因葛工肯程挺大最事守记1机9服7宿3述C纽奉o狭h粱e闹n电第刻一蓝例爷成愁功唤的螺克栽隆挣实意验1斤9移7雁8G牛e导n触e波n艰t苹e屋c肿h很公待司阿人嫌胰秒岛的素婚世山界筋上辉第离一水种榜基泳因映工克程才蛋创白直药泳物1扁9夫8挎2第督一笔个雁基允因伤工宜程正药煌物斤-街-竿重拆组糊人盆胰鸭岛偷素阶在端英荒、票美话获循准厨使占用1甜9则8叼5第动一抢批和转幕基坐因依家假畜算(周兔捧、厅猪技和圆羊氏)甜,糠中姿国冻转辽基胀因持鱼1络9尽9隆3基浮因鼠工羞程看西滩红财柿湿在沾美坦国逗上绣市1续9绑9怜7英给国射罗脚斯厨林挡研脸究半所帐多植莉参羊1誉9胳9制9谊.举9中阀国武获埋准会加许入窜人脂类离基过因仆组域计姓划宁.夸负棋责广测德定浮人漏类浓基务因鹿组恶全旷部临序订列括的俯1纯%2钥0拦0第0嗽.宏6高.危2贝6科击学服家尘公培布连人圈类置基烧因赏组淘工钱作含草烫图2务0提0不1承.精2热.否1六1公量布匹人卖类蝴基尊因财组协基搜本陕信主息生剃物给技耗术已工举程列:基侮因讽工捧程烤、联蛋奥白段质储工居程状、理酶飘工拾程抄、司细绪胞洗工际程胰阵岛扛素人馒生帽长皱激突素干骄扰义素白既细横胞修介骆素搭2粒盘细龟胞是集泉落芦刺悉激吨因芝子粒凶细稼胞强巨地噬掏细察胞联集贷落敌刺粥激脏因姥子红暖细箱胞寇生驰成锹素验E纳P徐O组版织练纤吗溶横酶搞原嗓激斜活疾剂生俊长白激困素促枕生鹊长俊素抗役血乒友洲病证因壁子套Ⅷ脱春氧僵核呼糖滔核倡酸吃酶葡猾糖斥脑局苷溜脂厘酶鼠邪单泪克购隆倍抗爹体自以然撕界孝的蜂基饺因锐转答移婶和颠重晴组基妄因只重咏组付(银g僚e荐n危e稍t照i踩c的r宿e理c韵o抵m料b饰i猴n顺a象t窝i景o吩n鼻)吃——整辛段来D漏N蜂A获在秃细轰胞爷内酬或嘴细而胞靠间筒,习甚缓至面不饼同该物君种哭间宫进利行硬交约换气,雹并强能瓣在拾新欧的饺位菌置王上拼复驶制窑,夜转摆录貌和轿翻匠译自握然悼界泄的妙基涌因之转坊移忙和棋重联组呜是虎无延目贞的基开因会工倡程羊有紫目治的结矛合输作锐用质狂粒臂D漆N陶A胃从朗一划个嘴细老胞赖(眠细事菌良)澡转勾移仙至庙另纱一属个培细术胞魄(互细象菌杨)转矿化靠作坏用t南r搂a避n类s卖f销o屋r锦m往a芳t牙i馅o扯n通兽过柔自床动载获腾取巾或头人砖为尊地纽奉供苏给嚷外率源未D跨N钳A孩,超使棒细案胞泪或责培拨养镇的帽受悦体际细肃胞仇获设得悉新膨的柜遗徐传悬表功型丘的控过遮程转纸导跃作军用t忆r许a行n辫s蛋d生u跨c证t装i欺o拒n病语毒自、电噬赠菌惜体翠介夸导溶缸菌予途梅径汁;洽溶根原旧菌询途袋径基释因异工仓程工嫁具州酶载律体重就组穿D估N症A怪技磁术只的睛基障本钥过给程真星核耗细套胞泡转血染克舌隆以基就因寄的志表停达工佛具超酶限制性核酸内切酶切割DNADNA连接酶生成3′-5′磷酸二酯键DNA聚合酶Ⅰ探针标记、补平3′末端反转录酶cDNA合成多聚核苷酸激酶5′磷酸化、探针标记末端转移酶3′末端多聚尾碱性磷酸酶切除末端磷酸基常侮用怖的卫工课具棚酶残:一壁把窑特孤殊香的挂剪宝刀勒—限菠制腿性疲内熊切哗酶劝的遍发她现阿未尔窝伯(华A此r态b智e翠r终)、你史苏密仿斯(升S议m平i胀t再h私)和贩内片森胳斯(鱼N招a加t前h抄a善n刘s拘),拍获杆1柜9爬7配8吴年婚诺粗贝殊尔袜生史理毅学泉和谋医姐学假奖1岁9舱5栗3话年恶,乏A葡r展b蛙e诞r浸研眯究村噬钳菌赔体丑与恰细数菌炸(稠A斜、礼B路)臣的积关抬系弟。发我现续1蜻0赛0邀-坚2薯0佩0泛个讽子拉代亿噬些菌粱体棋中拍,棉只浆有校1弱个杂可同感真染编B奏,孝即窑其虫他扣的腹噬侧菌痒体配在贪B着中缴受剖到嚼限复制忆,贴唯甘有意这狱一域个沉受每到闻修蛋饰腰(邻甲沿基伙化逼)桨后永感妄染龙成胖功颈。细永菌层B油:箱在剃缺究甲淡硫彼氨目酸疗的弱培愚养妹基已中曲,戚细寨菌观死均亡煮。原所因子:广细航菌迁无旧法衬对土自婶己张的括D危N哄A料进武行逃修已饰恼。假节设扔:朗限容制夕性周内元切弹酶廊与冬修寻饰惩酶引。1摄9千6迅7济年燃,喇S员m飘i茧t帐h凭,园分统析插限开制螺性汪内圆切烤酶陵的挣识侍别导和垦切今割熟序拨列幻玉,键认盒为纽奉它粉由丈5讲-事6筑个楚碱辫基齿组逮成原远因羊:骡限欲制塘性土酶抛将俭T7D肌N凡A芹切核成唯平野均幸长斧度减为神1社0烤0哲0巡寿碱殿基喇的磁片贼段先。识效别男和亭切骆割肌序永列沟:鼻中毅心丘对饿称秤的至回结文追结者构生。限倍制赠性练酶剖:俱H购i邻n萍d烛ⅡN屠a精t意h搏a小n穗s婆:木用盐限云制案性赠酶虫切骡割初猴额子泛S姑V4深0D泳N探A荷,赴D丝式N帖A及测弓序底。限斯制向性器核屿酸上内矮切北酶百(拣r哄e生s戚t匠r附i祸c扎t絮i红o悄n纵e浸n第z芽y败m位e扁)识敌别筹双歪链圈D珍N踏A或内嫁部践特蛾异萍位俘点蚂并罪裂衰解阴磷炼酸繁二偏酯时键分锯类逐:候Ⅰ闲型测、Ⅱ灶型、贞Ⅲ齿型命递名但:E听c辩o管RⅠ桐(E:移属库名搏;c斥o:笑种叼名匀;R:址株葵;各Ⅰ药:谈发界现协次耍序图)识洋别裁和拦切园割牧位挖点回震文校结跪构铁4前~粱6廉b尝p出维现马两陷种研末禁端粘致性岗末勺端粘旦端平因头朗末阻端平怀端同问工阀异组源牌酶梅:来异源翻不灰同载,应但括能润识系别察和猎切眯割辞同眠一仿位挖点同皆尾学酶慨:识苗别地序雹列坦不款同说,睁但献产棉生忽相瓦同惭的税粘杂性枯末撕端粘送性晒末纪端楚与居平要头范末珍端修们饰甚酶D栋N变A夏聚必合辟酶雕Ⅰ逆做转沾录款酶宫(结r喝e问v撞e玻r肉s屈e秃t亭r运a体n疗s纳c埋r亭i作p冒t叠a馒s杯e恭)T4D修N解A穗连娱接配酶毁(科T4l斜i异g嘱a摄s影e输)碱父性宗磷毕酸配酶版(佳a草l炎k擦a坡l锯i施n竞e架p撇h亲o败s蕉p夜h管a资t悠a计s仓e蛋)末招端岸脱瓜氧普核段苷闪酰垃转懂移眯酶谱(孟t街e轨r华m粗i沃n其a紧l赶d该e农o淡x狮y过n盘u墨c糟l米e蛮o糊t拆i原d吧y贪l本t毯r早a弄n摊s船f池e骂r妥a蚊s便e攻,朝T寺d红T拍)T蒸a盘qD昂N呈A任聚饿合宿酶D守N版A聚茄合圾酶夺Ⅰ愧(询p杏o变l也Ⅰ隔)俭的膝活版性5罗′廊至弄3郊′带的际聚狸合胶活聋性5姓′询→沸3扣′汽方痛向核涂酸孝外态切匆酶纷活摄性5轰′喂→电3权′据外僵切霉酶胶活维性3低′顺→羽5狂′盛外额切恩酶激活籍性p酷o撒l旨Ⅰ句经谱枯小草期杆嘴菌伐蛋侍白猾酶奥裂脑解钥可萍得乱大宵、价小唯两舅个轻片仇段大样片糕段遣(K赛l夕e日n真o弄w秆片悉段)宣:谎聚仅合知活观性节、炎3钻′晨→搞5悬′董外店切亚活殃性常裕用漠的阅工道具饶酶核异酸西外竟切乒酶烛活冶性3际′悦→律5眨′终外兔切仙酶瓜活续性5贪′张→右3惧′浓外涝切公酶押活屋性末叨端闲脱糠氧瞎核乎苷距酰着转奖移遍酶劲(记T托D危T呢)载军体瞧v览e诱c梢t震o牺rD改N席A牺,驰能型在翼宿唐主鹊细花胞魂中丑进伪行妇自字我谦复糕制凭和杂表口达克踩隆拣载偶体疾、必表福达驶载牙体原正核梦载写体:袜质构粒眼(毯p应B侍R虑3悔2备2匀,摇p卵U产C姜…片)被噬处菌换体罢(岔λ磨,办M步1腿3射)秘等真税核守载朗体:葡动量物闹病孟毒益载误体挨p骆L怕X早S掀N戏等常汪用罚的团克雁隆瘦载靠体质默粒岸(为p跑l席a军s黑m壮i奖d凉)—谦存为在犹于摸细坡菌嫩染设色披体促外快的虚小耻型悄环烧状社双刺链笔D详N拐A叫分孙子理虽想贩的好质量粒拷去贝女数喇多遣;两解三售个快遗晕传速标裹志狐,朝如催抗若药套性题基简因右:抗沫氨旨苄月青群霉继素快基篇因转(师a次m据pr)、抗旅四烛环吉素尚基板因椒(竭t泉e娇rr);β-半坛乳败糖池苷庭酶药基缴因许(l惰a乱cZ正)筛饥选融标史志多两个纳限泽制设酶茅的纪单廊一咱切晒点予,垦即多飘克他隆败位们点(购m秒u哪l叙t垄i倾p蚊l降e构c这l生o奶n金i险n茎g香s索i仙t蚀e斤s国,葵M忽C丽S慰)常档用半的员克洽隆园载李体λ加噬荣菌具体膀(舟λ恭p踩h覆a午g葱e占)基竭因腹组括分颂三恐个是区抬域另:婚左搁侧捕区视、中舰间走区(俗非罗必比需揭区搜)耳、掘右逝侧纯区D效N晚A列,给替各换哥型首载岔体挺,称外局源蹄D械N解A唉:长9打~球2泽3皂k俘b常度用峰:丘E效M底B材L添系惕列丛、搬λ舅g已t私系企列率、使c今h乐a殖r哈o档n待系宣列粘集性沟质扰粒欢(弓c巧o教s毕m李i销d你)眼:围λ歌D笼N仰A扫的希c盈o骆s沈区薪+狡质减粒块,巡寿双茅链海环槽状粱D峰N赵A僵,异克扣隆愁容部量鲜:鼠4寺0共~倘5腰0哑k缸bM用1织3统噬狂菌谁体最搭大望优更点怖:悦产掘生泽单徒链绞D年N榆Ac诞o梦s惩:盟c叠o咐h厌e逃s侍i疑v宣e建-票e捷n锄d士s扣i赌t秩e特刷点聋:R仇F罗D翅N歉A产:r耕e基p遣l伶i遍c絮a屑t菊i谱o西n用a山l嚷f畜o申r屯m凑D拌N辞A优锄点生:表狐达扑载密体刃(饿e再x饿p珠r铸e非s删s次i亦n缩慧g仙v五e鼓c议t蚂o畏r姿)特尘点开:镜带学表织达仿构匀件姻—线转符录角和扛翻肢译残所幼需沟的互D耗N秒A熔序即列大踏肠胜杆醋菌丘表栋达谨载洁体茅:橡含森启杂动范子案—礼核妇糖饭体样结服合池位探点越—察克候隆擦位谊点技—睡转婆录融终蓝止半信摊号启摆动趣子羡:饼t小r棕p咳-例l殿a摸c资(疫t咏a祸c弊)丝式启果动句子砍、翁λ兄噬查菌呼体画PL启简动塘子被、柔T痰7歇噬水菌饶体桑启搏动倘子核鸭糖著体倦结恶合旋位度点隶(轮r漠i蚀b因o惜s写o电m佛e匀-傍b泡i倍n揪d抚i置n乒g译s贴i颗t欧e僚,霜R贪B逝S左)京:各起珍始禽密尺码岛子置(改A椅T搜G项)博和葬S黄D使序血列转项录疮终蓬止蒜序尼列哺鉴乳萄动乱物膜表刚达你载季体真倾核减表悄达弊元臭件封:光启箩动暗子跑/成增姑强灯子百—棒克羡隆剖位州点栗—崖终虑止粘信营号具和凶加屯p屠o烈l穗y割(年A取)外信鞋号重册组常D近N困A屯技君术搅的宇基秆本奥过工程目慢的氧基线因纯的侍制趟备载漂体义的姑选娇择宋和僵制袖备D漫N饶A胶分北子谣的饮体接外塌连案接将容外懂源赖D梳N永A祝导遍入蹲宿嘱主肚细馋胞目厕的限基昌因并的馒筛庆选享和糊鉴写定目怪的氏基津因婶(妈t携a森r辫g摘e殊tD瓶N赖A朗)的府制房诚备目者的眯基丧因毒(境外裹源菜基链因娱)制窄备槽基信因葱组脆D劳N狱A基份因广文杜库皮(悄g惰e疼n圾o纤m丙i沫c饱l规i浮b姥r能a罚r学y先)—宫存桨在烛于纯转运化肥细缘瑞菌添中粘、载克邮隆辞载壤体孝携盈带百的冠所共有木基悦因驴组妙D楼N司A摔的刚集怜合制办备餐c铃D鸟N众Ac勿D血N应A廉文石库刻(资c选D乖N熄A饮l府i讯b五r墓a女r狂y暂)制哪备呈用份于解表篇达正的昏基辛因趟片足段久:势P危C突R今技边术隶、判化戒学诉合删成载颂体国的售选恢择原和位制戚备吊:λ喜噬闲菌声体柏、恋粘油性恶质米粒亲、腾p有U星C杂系纸列免、忍M姿1赌3双噬停菌矮体D筝N科A播分委子分的途体问外体连蔬接惯(面D陶N悼A麻连胶接软酶放)粘样性乒末脆端群连拆接连纵接败效诊率贞高相厘同跨酶名切研末瓶端平丝式端鸡连明接连开接全效恭率证低人筝工建接牧头漠(骆l枪i威n巨k弄e仗r天)代法同潜聚肌物端接需尾拨法同纺聚得物近接楚尾阿法将谅外保源烫D照N否A歌导叹入兆宿乓主眼细龟胞基忠因族工长程未菌H芬B怒1记0优1日,必J窄M糠1旱0慈9转痛化跟(悦t至r巾a腊n银s份f戚o滩r嫩m音a集t背i贿o清n住)制东备感常受勒态柔细们胞冷阵的姿氯看化仪钙笑处法理堡,洪细陈胞皂处征于盖最波适辞摄堪取质和执容项忍趋外禽来克D议N透A袍的糕生绢理遥状浑态感闲染锁(榜i君n物f析a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