中药化学黄酮类化合物培训课件

中药化学黄酮类化合物概述

定义：泛指两个苯环通过3个碳原子相互连接而成的一系列化合物。

2中药化学黄酮类化合物概述3中药化学黄酮类化合物抗癌抗HIV抗氧化概述4中药化学黄酮类化合物19996467种《TheHandbookofNaturalFlavonoids》Harborn20058000种黄酮醇数量最多1707种异黄酮结构类型最多10种概述5中药化学黄酮类化合物概述分布广泛：高等植物，特别是被子植物中。粮食蔬菜水果荞麦大豆大葱韭菜蒜苗柑橘柚子6中药化学黄酮类化合物存在形式：多与糖结合成苷存在，部分以游离态存在。7中药化学黄酮类化合物生源合成：莽草酸途径和乙酸-丙二酸途径。8中药化学黄酮类化合物黄酮类化合物生物合成示意图9中药化学黄酮类化合物生物活性1.抗肿瘤活性槲皮素水飞蓟素柚皮苷杨梅黄酮

抗自由基直接抑制癌细胞生长抗致癌因子10中药化学黄酮类化合物生物活性2.抗炎镇痛

黄岑苷

甘草苷（Liquiritin）消化性溃疡药日本

11中药化学黄酮类化合物生物活性3.雌激素样作用植物雌激素（phytoestrogensPE）一类植物来源具雌激素活性的非甾族杂环多酚类化合物12中药化学黄酮类化合物生物活性4.抗菌抗病毒白刺总黄酮青霉素类作用

金丝桃素抗HIV

花青素抗HIV13中药化学黄酮类化合物生物活性5.抗氧化抗衰老

清除自由基14中药化学黄酮类化合物生物活性6.抗肝脏毒活性

15中药化学黄酮类化合物第一节结构和分类黄酮和黄酮醇类二氢黄酮和二氢黄酮醇类异黄酮和二氢异黄酮类查耳酮和二氢查耳酮类黄烷-3-醇和黄烷3,4-二醇类花色素类双黄酮类其他黄酮类16中药化学黄酮类化合物17中药化学黄酮类化合物（一）黄酮和黄酮醇类18中药化学黄酮类化合物（二）双黄酮类19中药化学黄酮类化合物（三）二氢黄酮和二氢黄酮醇类20中药化学黄酮类化合物（四）查耳酮和二氢查耳酮21中药化学黄酮类化合物（五）异黄酮和二氢异黄酮类22中药化学黄酮类化合物23中药化学黄酮类化合物（六）噢弄类硫磺菊素24中药化学黄酮类化合物（七）花色素类植物色素25中药化学黄酮类化合物（八）黄烷-3-醇和黄烷-3,4-二醇类26中药化学黄酮类化合物其它类27中药化学黄酮类化合物28中药化学黄酮类化合物组成黄酮苷的糖：糖的种类：单糖类：如D-葡萄糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖及D-葡萄糖醛酸等。双糖类：槐糖、龙胆二糖、芸香糖、新橙皮糖等。

三糖类：龙胆三糖、槐三糖等。酰化糖类：2-乙酰基葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖等。连接位置：黄酮、双氢黄酮和异黄酮苷：多在7-OH上连有糖。黄酮醇和双氢黄酮醇苷：多在3-OH上连有糖或在3,7-二个OH连有糖。花色苷：多在3-OH上连有一个糖或形成3,5-二葡萄糖苷。

C苷：糖多连在6或8位。在各类结构中，A、B环常见有羟基、甲基、甲氧基、异戊烯基等。

29中药化学黄酮类化合物7.2理化性质1.物理性质：形态、颜色、旋光性、溶解度2.化学性质：酸性、碱性3.显色反应：还原显色反应与金属盐类络合反应其它显色反应30中药化学黄酮类化合物1.物理性质（1）形态：多为结晶固体，黄酮苷多为无定形粉末。（2）颜色：与交叉共轭体系、助色团数目、取代基位置有关。共轭体系黄酮（醇）及其苷：灰黄-黄查耳酮：黄-橙黄异黄酮：淡黄二氢黄酮（醇）：无花色素：pH<7（红），pH=8.5（紫），pH>8.5（蓝）助色团与取代基7-,4’-引入-OH、-OCH3等供电基，颜色加深。31中药化学黄酮类化合物32中药化学黄酮类化合物花色素的颜色与pH有关：33中药化学黄酮类化合物1.物理性质（3）旋光性：分子内是否含有手性因素。游离黄酮：二氢黄酮(醇)、黄烷(醇)、二氢异黄酮黄酮苷：多为左旋（来自糖）

34中药化学黄酮类化合物1.物理性质（4）溶解度

黄酮苷元难溶于水，易溶于甲醇、乙醚、氯仿、稀碱等。非平面型分子＞平面型分子（与分子排列、分子间引力有关）花色素（离子）＞异黄酮、二氢黄酮（非平面）＞黄酮（平面）引入-OH，水溶性增加；引入-OCH3、异戊烯基等，脂溶性增加。

35中药化学黄酮类化合物黄酮苷难溶于乙醚等，易溶于热水、醇、吡啶、稀碱等。多糖苷＞单糖苷3-羟基糖苷＞7-羟基糖苷

分子扭曲，7-OH极性36中药化学黄酮类化合物2.化学性质（1）酸性：与酚-OH数目、位置有关。

7,4’-二OH黄酮＞7或4’-OH黄酮＞一般酚-OH＞5-OH黄酮

5%NaHCO3

5%Na2CO30.2%NaOH

4%NaOH37中药化学黄酮类化合物（2）碱性：吡喃酮氧原子有弱碱性，能与强酸（浓硫酸）成佯盐，但不稳定。黄酮（醇）：黄-橙，有荧光二氢黄酮（醇）：橙（冷）-紫红（热）查耳酮：橙红-洋红异黄酮、二氢异黄酮：黄橙酮：红-洋红

浓盐酸：花色素橙酮查耳酮显红色其余无色！38中药化学黄酮类化合物3.显色反应（1）还原显色反应

盐酸-镁粉硼氢化钠（2）与金属盐类试剂的络合反应

锆盐-枸橼酸三氯化铝氨性氯化锶（3）其它反应与碱的反应与五氯化锑的反应Gibb’s反应39中药化学黄酮类化合物（1）还原显色反应盐酸-镁粉反应：黄酮类化合物的首选反应。方法：样品/甲醇+Mg+HCl，放置或加热，红~紫红。分子中特别是在B环上有羟基或甲氧基取代，颜色加深。机理：形成阳碳离子。注意：异黄酮、查耳酮、橙酮、儿茶素(－)，但要对照。排除中药提取液本身的颜色的干扰。40中药化学黄酮类化合物

硼氢化钠反应：二氢黄酮类的专属性还原剂，红~紫色。方法：样品/甲醇+NaBH4+1%HClPC的显色剂：先喷2%NaBH4/甲醇，1min后熏浓盐酸蒸气。A环与B环有一个以上羟基或甲氧基取代，颜色加深。41中药化学黄酮类化合物42中药化学黄酮类化合物（2）与金属盐类试剂的络合反应

3-OH、4-C=O，5-OH、4-C=O，邻二酚羟基有色络合物

Al3+、Mg2+、Sr2+、Zr4+、Pb2+、Fe3+等

43中药化学黄酮类化合物锆盐-枸橼酸反应

判断黄酮分子中是否有3-OH或5-OH。s/MeOH+2%ZrOCl2，黄色，示有3-或5-OH。

再加2%枸橼酸/甲醇，黄色保存，示有3-OH；

黄色褪去，示有5-OH。

44中药化学黄酮类化合物醋酸镁反应s/EtOH+1%MgOAc/MeOH荧光二氢黄酮类：天蓝色黄酮异黄酮：黄色橙黄色褐色45中药化学黄酮类化合物三氯化铝反应

最常用的显色剂（试管、TLC、PC）。s/EtOH+1%AlCl3/EtOH，UV下观察。

一般黄酮：鲜黄色荧光4’-OH或7,4’-二OH黄酮（醇）：天蓝色荧光46中药化学黄酮类化合物氨性氯化锶反应：

邻二酚羟基，绿-棕-黑色。

s/MeOH+0.01MSrCl2/MeOH+NH3/MeOH

47中药化学黄酮类化合物（3）其它颜色反应与碱的反应：鉴别黄酮类化合物类型。

与五氯化锑的反应：区别查耳酮。

s/无水CCl4+2%SbCl5：查耳酮：红或紫红其它黄酮：黄-橙Gibb’s反应：判断黄酮5-OH对位有无取代基。未取代黄酮：蓝或蓝绿色

48中药化学黄酮类化合物各类黄酮的颜色*示有荧光49中药化学黄酮类化合物第三节提取和分离1.提取方法：乙醇或甲醇法热水法碱水或碱醇法2.精制方法：溶剂萃取法

pH梯度萃取法络合法3.分离方法：柱色谱法（聚酰胺、硅胶、葡聚糖凝胶等）4.实例50中药化学黄酮类化合物

1.提取方法(1)乙醇或甲醇提取法苷元：高浓度的醇（如90％～95％）等。苷：60％左右浓度的醇。

51中药化学黄酮类化合物(2)碱（水或醇）提取法稀NaOH：浸出能力大，但杂质较多，需先迅速过滤除杂。石灰水：浸出能力中，能沉淀除去鞣质、多糖等杂质。5%NaOH/EtOH：浸出效果好，但收率降低。注意：酸碱度不宜过大。

52中药化学黄酮类化合物(3)热水提取法仅限于提取黄酮苷类，杂质较多，故不常使用。如槐花米中提取芦丁53中药化学黄酮类化合物

2.分离方法

(1)溶剂萃取法：主要用于分离苷元和苷Petroleumether:色素甲氧基黄酮苷元

Diethylether:

游离黄酮

Ethylacetate:多羟基黄酮苷元单糖黄酮苷

n-Butylalcohol

：两糖以上黄酮苷54中药化学黄酮类化合物55中药化学黄酮类化合物（2）聚酰胺吸附聚酰胺56中药化学黄酮类化合物

铅盐沉淀中性醋酸铅：沉淀邻二酚羟基或羧基黄酮碱式醋酸铅：沉淀一般酚羟基黄酮。

（3）铅盐法57中药化学黄酮类化合物（4）硼酸络合邻二酚羟基黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水。可用于分离。58中药化学黄酮类化合物

（5）pH梯度萃取法59中药化学黄酮类化合物60中药化学黄酮类化合物聚酰胺硅胶氧化铝葡聚糖凝胶（6）柱色谱法61中药化学黄酮类化合物

聚酰胺柱层析氢键吸附62中药化学黄酮类化合物形成氢键能力：水>有机溶剂>碱性溶剂洗脱能力：水<醇<丙酮<NaOH<甲酰胺<DMF63中药化学黄酮类化合物64中药化学黄酮类化合物

规律：（1）数目：能形成氢键的基团数目越多，吸附力越强，柱上越难被洗脱。（2）位置：当数目相同时，如所处位置易形成分子内氢键，吸附力减小。（3）苷元相同时，洗脱先后顺序是：叁糖苷＞双糖苷＞单糖苷＞苷元。（4）黄酮类被吸附强弱的顺序为：黄酮醇＞黄酮＞二氢黄酮醇＞异黄酮。（5）芳香化程度越高，共轭双键越多，吸附力越强：查耳酮＞二氢黄酮。65中药化学黄酮类化合物66中药化学黄酮类化合物硅胶柱色谱黄酮苷元：氯仿-甲醇黄酮苷：氯仿-甲醇-水氧化铝柱色谱不与铝离子络合的黄酮的分离葡聚糖凝胶柱色谱黄酮苷：分子筛作用，分子量大的先出柱黄酮苷元：吸附作用，酚羟基越多，吸附越强。高效液相色谱（HPLC）

反相柱。洗脱剂为水-甲醇/乙腈（含适量甲酸或乙酸）67中药化学黄酮类化合物3.提取分离实例

（1）槐花米中芦丁的提取分离（2）黄芩中黄芩苷的提取分离（3）葛根中葛根总黄酮的提取分离68中药化学黄酮类化合物（1）槐花米中芦丁的提取分离

槐花米:治疗毛细血管脆性引起的出血

高血压辅助治疗芦丁：有效成分含量高69中药化学黄酮类化合物70中药化学黄酮类化合物（2）黄芩中黄芩苷的提取分离

黄岑：清热解毒常用中药【来源】唇形科植物黄芩Scutellariabaicalensis

Georgi的根。71中药化学黄酮类化合物73中药化学黄酮类化合物（3）葛根中总黄酮的提取分离

增加脑及冠状血管血流量解痉作用

降血糖作用

雌激素样作用【来源】豆科多年生落叶藤本植物野葛Puerarialobata(Willd.)

Ohwi或甘葛藤PuerariathomsoniiBenth.的根。74中药化学黄酮类化合物75中药化学黄酮类化合物（无邻二酚羟基）76中药化学黄酮类化合物第四节黄酮类化合物的检识1.理化检识：性状显色反应2.色谱检识：纸色谱薄层色谱77中药化学黄酮类化合物1.理化检识

物理检识：根据黄酮类化合物的形态、颜色等。化学检识：利用显色反应。（1）母核：HCl-Mg、NaBH4、碱性试剂、SbCl5等。（2）取代基：锆盐-枸橼酸、氨性氯化锶等。78中药化学黄酮类化合物2.色谱检识纸色谱法（PC）：分离黄酮及黄酮苷，常用双向层析。第一向：醇性展开剂，如BAW、TBA、水饱和正丁醇等。正相，极性小的化合物Rf值大。适合游离黄酮。第二向：水性展开剂，如水、2～5％乙酸等。反相，极性大的化合物Rf值大。适合黄酮苷。显色剂：UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。79中药化学黄酮类化合物

薄层色谱法（TLC）

硅胶：极性小的弱酸性黄酮类化合物。展开剂多用有机溶剂系统，如甲苯:甲酸乙酯:甲酸(9:3:1)。聚酰胺：游离黄酮苷元及其苷。展开剂极性要强，大多含醇、酸或水，如丙酮:水(1:1)。纤维素：分配色谱，分离黄酮和苷。用醇性或水性展开剂。显色剂：紫外光；2%三氯化铝甲醇液等。80中药化学黄酮类化合物第五节

结构测定常规检查：外观盐酸-镁粉反应薄层检查熔点检查与标准品对照81中药化学黄酮类化合物波谱分析：UVIRNMRMS82中药化学黄酮类化合物UV常用术语：生色团：分子中产生所示谱带的主要功能团。