人教选修三《基因工程的基本操作程序》

1．2基因工程的基本操作程序学习导航1.掌握目的基因获取的常见方法。

[难点]2.学会基因表达载体构建的方法和要求。

[重点]3.理解目的基因导入受体细胞的具体过程。4.掌握目的基因检测与鉴定的具体操作。

[要点]新知初探思维启动一、目的基因的获取1..从基因文库中获取目的基因将含有某种生物的不同______的DNA片段导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物不同的基因，称为基因文库。基因基亿因府文屋库失包减括膏两粘种伙：_齿_雹_纱_响_皇_喇_滩_文惕库众，狱即抹包亿含米一床种她生第物奋所祥有贺基饭因基的己文悄库送；_即_把_监_兴_敞_潮_伏_项_膛_文刑库,即凡只恨包递含村一嘴种表生缘瑞物烘的帮一晃部我分元基兼因牌的滩文皱库吩，角如c需D麻N迹A文伶库岩。2呆.利绣用P兰C两R技垫术械扩逮增抽目倾的塑基宏因(处1眨)迅P砖C陕R的袋含落义腹：状是累一薯项乳在卸生替物_酬_者_翅_拳_逮_复书制宾特梨定D堡N释A片暴段托的招核拿酸警合塔成莲技市术柴。(猎2形)目构的仗：糠短宾时功间贼内豆大别量淋扩孟增茂目捧的廉基尸因脱。(怒3秀)原宋理屋：_弱_可_孝_崇_涨_心_革_弓_蠢_橡_声_蔬_龄_轻_僵_。基租因助组部级分丸基秆因体秧外D塌N引A双曾链杜复恰制(陈4爷)过且程慢：第勺一之步医：池加房诚热桶至9待0～9悔5℃裙,_厌_罗_均_兆_帅_失_轮_派_怨_国_酒_掀_耻_丸_;第框二稿步斥：闷冷累却花至_庙_管_表_饥_骨_迈_逢_豪_℃，美引孤物蹄与娇两侦条洽单疑链D陕N妖A相浑应瞧互彩补涨序锻列浩结透合运；第渗三炼步政：零加子热挡至7狗0～7返5℃，谜热怪稳匹定D渐N忧A聚读合吵酶(贝T摧a某q酶)从娱引虾物耻起天始额进狭行牛互蓄补丑链需的析合修成飞。如珍此雾重僚复偶循托环榨多萄次照。(筐5则)特妹点局：碎指蜂数作形胞式虚扩萌增执。D仗N苹A解欺链顷为倾单榆链5亲5～6筹0想请一阿想1．P墙C奥R过男程絮中迎，蛛需驱要傅解无旋赖酶秘吗患？蚕所乞需防要昨的D抽N潜A聚搏合斩酶柔应信具甜有妻什帽么允特冻点索？【提槽示】P浊C凳R过渴程愉中轨，D惧N蛇A双亲链乏解衡开蜜是烂在谅高况温虑下独完她成悉的猫，葱不其需需要犹解偏旋辆酶座；司由串于P爸C延R过轧程熔温楚度王较强高治，煮所鸽以疾需定要戒能恨耐嗓高存温泳的D蜡N直A聚啄合织酶侵。3河.用亡化乘学衫方贴法阳人盯工弱合奔成如浆果吴基竹因颠比骗较_的_堂_句,核箱苷片酸炕序枪列鬼又枕已残知,也唱可房诚以不通胃过D射N榨A合支成赤仪餐用裁化族学堆方宜法槽直柱接位人蛙工喷合途成叨。二惯、悔基忙因卵表躁达淋载种体凳的斑构壤建基公因吹表菠达鬼载钥体撒的食组嫩成绒：陕必共须棚有税启脊动错子歉、_盖_被_抓_腊_傻_皆_钟_瓦_肉_炉_痕_、荒终胜止到子狗以遭及夺标遇记奖基必因醉等火。小目刘的回基早因三脸、屡将们目仓的阀基创因幼导炒入凉受阻体竭细述胞1混.纱.转追化_听_赠_吸_安_瞎_报_许_乞_萝_讽_进谱入效受余体妙细絮胞苏内票，畜并押且晕在揭受华体矩细敢胞剪内汉维课持委稳架定亿和臣表峡达检的筋过护程恐，裁称袄为陡转敌化忙。2德.常析用渠的扒导拥入乳方母法(腾1贪)将鹊目脆的败基灰因对导或入戒植灰物插细邀胞脸：愿采瓶用外最搞多许的迹方常法欧是_摇_醉_眉_串_泛_底_迹_转音化变法丝式，视其套次斩还嘱有兄基露因广枪码法未和轿花甜粉袭管狡通威道惠法孙。目谣的逗基惕因农捏杆蛋菌(讨2恭)将寇目救的找基炉因翻导始入赞动膊物训细钩胞证：投最粒常婚用旨的勇方俊法糟是_割_傅_事_才_剃_败_焦_呀_宫_技养术莲。使此鲜方宿法蚕的圣受屿体咐细垦胞考多此是_狭_填_味_臭_宝_筝_弦_件_。(瘦3昨)将历目随的牵基业因稼导伙入淋微炉生忧物城细壮胞昏的舍方隶法素：①用_珠_震_府_砍_熊_窗_处返理饮细散胞趴，拢使典细啦胞怕处肚于薪能飘吸驳收重周叉围捡环则境础中D虑N基A分估子锈的姑生滥物舱状修态,这睬种鲜细坊胞蛋称格为_吩_米_可_耍_伙_肚_搞_细瘦胞段。②固将托重损组箱表弱达撞载铃体D唯N突A分烦子歪与遍感菜受杰态阻细拒胞损混趴合芬，服在龄一岁定熄温榨度脚下善完卖成右转讽化插过疗程络。显侍微满注疲射受喝精谈卵C台a2＋感溉受古态想晨一羽想2．羊从岗细糟胞床器戏的絮功路能搜上蜜分仓析患，巩若吊通狱过云基洒因梨工阴程寺生定产始人恨的卸糖级蛋拘白价，啦可朱以嗓用份大趣肠扎杆说菌叶吗垄？【提隐示】不丢可刘以泡，纳糖储蛋梅白挎上贡的腹糖发链倡是深在虎内脱质击网森和耻高区尔旅基化体橡上忘加艺工懂完临成苏的饥，耐而甘内勺质答网否和毕高义尔杆基炊体埋存源在永于辆真宰核绕细偿胞拳中狠，是大蹲肠盯杆疾菌环是殖原挤核拢生遣物筹，龄细迁胞垮中愉不夏含桌有器这吸两键种灵细乳胞缺器丧。四哄、舌目抛的伙基物因恼的开检旬测隶与袍鉴饺定1辱.壶.首靠先姻要缺检请测健转存基度因汪生脑物租的D蜡N碌A上院是比否划插霞入四了_折_刷_傻_鼓_斜_截_继_漏_删,方妹法商是旁采志用_进_冈_矿_梁_愚_仪_酬_卡_胁_贪_乐_国_都_技厌术利。2既.其前次捷还敬要博检淋测暮目你的丑基委因傅是艳否久转薪录测出躺了_荐_昨_仙_捞_遣_厕_咱_招,方童法鄙是鸡采拐用_奖_途_拿_费_酬_己_枕_感_拨_技棋术吹。目作的捉基御因D狮N州A分券子们杂巾交m帝R刑N胃A分台子定杂犹交3洗.最述后门检脆测栽目子的逐基甜因若是亡否间翻膏译常成_购_凡_梅_剂_素_旦_作_火,从气分袄子效水莲平聚检绢测嘉的土方疲法如是赖采质用_象_凯_肿_睡_奔_择_残_尺_傲_浙_郑_转_勾_技肆术第。4碍.有而时疾还骆需稼进湾行_胳_鸽_嚷_胶_姜_拦_程_感_猾_洞_水肌平泛的展鉴艳定笋。换如伸需脖要拐做港抗填虫骆或冲抗宵病窗的顶接煮种庸实组验奏等奖。蛋肃白腐质抗鸣原—抗抄体扇杂屡交个偿体骨生押物假学要点突破讲练互动要虎点绝一“目鸦的乡丰基友因研的戴获违取”应贯注妄意吓的熟几搞个却问促题1离.止.仪P允C减R技虏术总与D件N脸A复吹制很的腐比越较比较项目DNA复制PCR技术区别解旋方式解旋酶催化DNA在高温下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在PCR扩增仪中)比较项目DNA复制PCR技术区别酶DNA解旋酶、DNA聚合酶耐热的DNA聚合酶温度细胞内温和条件控制温度，需90℃～95℃高温结果合成DNA分子合成DNA片段或基因联系(1)模板：均需要脱氧核苷酸双链作为模板(2)原料：均为四种脱氧核苷酸(3)酶：均需DNA聚合酶(4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸2并.人纺工滥合上成稻目园的陵基屡因告常斧用梳方晒法人怀工瞒合腐成相目近的婶基椅因饱的暗方粮法葬主槽要嚷有诉两顽种筹。(显1神)反朋转我录价法功，朗主渗要窑用辣于础相装对配分某子出质枣量扫较犬大酒而吊又鞠不距知章其徒序偷列斯的子基跃因攀，情它斯是使以潮目饿的应基进因回的m阁R失N甚A为号模管板碎，朋借霞助远反米转杨录锈酶市合计成拣碱怪基云互念补栏的尸单彩链D鸽N透A，揉然械后傅在D毙N息A聚刷合扶酶尼的派作讲用疼下哀合吨成到双殿链D离N汁A，殃其盏过格程灿如聚下拳：(挂2发)化绳学坊合污成捎法估，徒即劲依咽照弱某冶一矩蛋共白判质良的碎氨跌基娃酸羽序吉列贩，弟通礼过怒密炉码携子匹推南算讽出典其制基司因萌序球列非，仇然脂后徒直哀接阅合巨成押目材的知基爆因痒，踢其迁过惩程迷如朴下躁：(礼2召0傅1果2恒·青励岛贞市杜高窗二骡期掩末)伴1战9摊7猎0年泰，雪科亡学倚家船证唐实努了R驰N停A病代毒象能绝依纹赖R遮N论A合唉成D较N弓A的窗过酱程铅，辽并晨发蕉现谦了火催辩化惑此纤过兆程膜的别酶袭。银下予面泄为耳形颠成c页D读N绵A的缸过基程勿和P追C盖R扩差增示过槽程貌示必意辞图垫。漏请矩根胜据脂图墓解宽回形答危下扔列勒问仓题虏：例1(洽1雾)催钩化①过降程渠的若酶捏是_看_墓_霸_念_啄_脆_固_；呢核舱酸司酶H的鼓作匀用他是_卧_欣_栋_永_久_显_仇_。(苗2杠)③过稳程覆也老称秧为D叮N访A的挽变宝性赔，吉此凑过留程项在茶温弄度未高染达9腿0～9亦5℃时贪才窄能倾完匀成视，达说休明D喝N描A分诱子臂具倾有_埋_消_艘_封_仿_跨_延_性爆。(谷3伶)由负图意中漫信切息拐分肃析纠可庙知躁，俘催示化②性⑤过废程主的绩酶喝都疼是_品_咽_药_催_宽_捷_牢_懂_蒸_俩_眼_院_常_，致两室者钓在膛作鼓用零特诉性务上舞的训区压别煌是_磁_沿_斯_屈_哲_尼_亡_或_缴_锄_鸡_桐_役_银_练_污_疼_胶_地_缩慧_帜_略_诵_症_理_谊_抛_惜_留_五_纽奉_显_庭_擦_巾__亭_离_王_胁_待_堆_姨_服_叹_假_闸_妇_掏_求_赏_愧_抢_痒_痛_裹_微_师_尼_日_房诚_奶_啄_影_狸_第_师_弓_蹄_片_医_。(宁4崇)如疏果R泽N康A单傻链摇中悔有乌碱讽基1闭0同0个花，季其爆中A占2龟5晴%，U占1灰5景%，艰则题通逝过博该爽过富程闪合促成矩的贪一暮个乱双怪链D针N欢A片世段智中哨有热胞赖嘧川啶_骆_铸_裳_再_梅_师_窄_个令。【解仔析】根傍据规图臂示孔可燥以脱看凉出静，学该隙过酬程亩是R缩慧N寸A在昆逆缴转离录表酶条的里催均化暴作悠用陡下全形轿成c酬D榴N欢A跑(负期链D拿N话A抄)，郊构裂成R焦N没A蛙—组D矩N歉A中波间农体痕。便中横间肆体沉中谋的R陆N剧A再换经楼过R帮N急A酶H水易解侄，买而逮以档剩夏下院的器负疮链D负N免A复另制能成仅双段链D质N锄A。腾①已过浴程屯是钞由R切N屑A合自成D妇N凶A的缸过栏程截，杯需救要藏逆挽转遵录顷酶近进筋行征催晴化检。文②央过樱程唯是碎以套单黄链D肯N欣A复托制享获励得奥双千链D把N牵A的冒过脂程壤需昆要D妹N杂A聚零合显酶哀催缘瑞化袜。⑤数属网于神双路链D标N远A复敲制煎的风过厘程锦，申需紫要D亚N足A聚堆合偷酶后催倚化得。漠⑤投过烘程痛在7斩0～7锦5℃环爆境惜下撕进匀行烈，镜所氏需米要密的移酶牌能登够呼耐屿高筹温姥。【答炮案】(承1套)反桶转摔录刮酶(或茫逆吉转棉录喂酶)分直解R订N禁A(怠2宏)稳路定(御3辉)语D竟N糖A聚币合驳酶嚼催奏化⑤过步程理的绿酶液耐采高锈温(舱4晶)构6绒0互算动安探悠究(龄1廉)上改述拜过尝程脊中为需代要亮限着制岸酶战和D典N送A连斯接露酶合吗欠？(茅2哄)由m辉R拼N毙A逆斗转挤录倘形潜成佛的D角N赢A具似有侮启猫动卖子猛吗?【提否示】(扰1蹲)不怎需忌要喘。(惧2悲)无漏。【探箭规户寻劈燕律】(水1辉)猛P今C灿R技片术唱不蜓需偷要色解阻旋询酶绑，泉但耳需姨利汁用9概0～9丽5℃高青温洋使D间N高A分沃子躁解蛛旋魂。(秘2坟)判P材C伍R技比术巧的念前派提拌是砖要晕有臭一葬段旋已还知花目由的脂基办因挠的唤核氏苷窑酸记序从列,以袋便带根雁据征这纯一秃序卖列智合培成俱引扬物印。(杠3球)择P演C很R技厌术摸需聋要颤耐总高壶温皂的D渣N华A聚取合盛酶要悔点薄二紧基言因锐表怨达饰载架体么的献构萍建1德.构步建柔基胳因盐表担达愤载忘体栋的吴目坏的冒：子使多目同的典基湖因羡在摩受担体杜细棵胞哭中柴稳同定狠存忘在屈，脱并窃且脱可视以蓝遗爹传钞给略下滤一锹代顽，货使筝目禾的水基膝因野能裁够匹表勇达社和铁发群挥牛作洋用曾。2沉.基胀因图表迹达背载屠体告的市构特建(膀1友)启炭动科子饿：浇一己段黄有杏特粪殊链结筒构乐的D霞N脉A片构段议，谨位吩于耍基揪因双的何首搁端参。阴它捆是R扣N佣A聚姑合薪酶栏识内别跨和患结胸合涉的遥部零位挽，舒可缩慧驱踏动躁基沿因挽转旺录犁。(陈2宅)目差的居基什因块：突编倚码自相见关昂蛋满白禾质效，辆形视成滔基泳因邮工少程件产额品概或瓣产翅生贺新骂的赖生腊物等性论状着。(筝3闲)终级止撕子彻：忆一什段瘦有批特帅殊画结庙构啦的D合N腥A短怖片着段,位可于叉基右因详的洪尾咽端培，抹作畜用号是稻使凶转江录封在添所静需满要砖的图地转方六停泻止臂。(宵4历)标培记息基册因假：贼一出般污为勒抗戏生珠素否抗题性武基绩因笔或甜荧插光荷基围因熟等瓶，证其扑作目用丘是危鉴贿别投受楼体疗细寄胞赌中森是巨否语含拨有役目户的串基犬因(目超的困基肃因税是阁否愁导诞入磨成意功)。3姿.基话因婶表牢达衔载方体捎应朱具塑备巡寿的辱条屿件(夏1旋)对凭受敞体洒细生胞遭无槽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