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文档简介
慢性乙肝实验室检测及临床意义刘怀祥重庆骑士医院肝病科血清酶检测⑴血清丙氨酸转氨酶(,):是目前临床上反映肝细胞功能的最常用指标。急性肝炎时明显升高,黄疸出现后开始下降;慢性肝炎和肝硬化时轻度或中度升高或反复异常;重型肝炎患者可出现快速下降,胆红素不断升高的酶、胆分离现象,提示肝细胞大量坏死。血清酶检测⑵天门冬氨酸转氨酶(,):特异性较低。此酶在心肌含量最高,依次为肝、骨骼肌、肾、胰。在肝病时血清升高,当病变持久且较严重时,线粒体中释放入血流,其值可明显升高。急性肝炎时如果持续在高水平,有转为慢性肝炎的可能。:急性肝炎时常小于,慢性肝炎和肝硬化时常大于。比值越高,则预后愈差,病程中比值降低,提示未损及肝细胞线粒体,预后较佳。⑶碱性磷酸酶:当肝内或肝外胆汁排泄受阻时,血清活性升高。⑷γ谷氨酰转肽酶:肝炎和肝癌患者可显著升高,在胆管阻塞的情况下更明显,γ活性变化与肝脏病理改变有良好的一致性。⑸乳酸脱氢酶:肝病时可显著升高。⑹胆碱酯酶:其活性降低提示肝细胞已有较明显损伤,其值愈低,提示病情愈重。血清蛋白:主要由白蛋白(),α,α,β及γ球蛋白组成。前种主要由肝细胞合成,γ球蛋白主要由浆细胞合成。在急性肝炎时,由于白蛋白半衰期较长,约天,以及肝脏的代偿功能,血清蛋白质和量可在正常范围内。慢性肝炎中度以上、肝硬化、重型肝炎时出现白蛋白下降,γ球蛋白升高,白球()比例下降甚至倒置。胆红素:急性或慢性黄疸型肝炎时血清胆红素升高,活动性肝硬化时亦可升高且消退缓慢,重型肝炎常超过μ。一般情况下,肝损程度与胆红素含量呈正相关。直接胆红素在总胆红素中的比例尚可反映淤胆的程度。凝血酶原活动度():高低与肝损程度成反比。<%是诊断重型肝炎的重要依据,亦是判断重型肝炎预后的敏感指标。
对照(对照×)×样本(对照×)血氨:肝衰竭时清除氨的能力减退或丧失,导致血氨升高,常见于重型肝炎,肝性脑病患者。血常规:急性肝炎时白细胞稍低或正常,淋巴细胞相对增多,偶可见异型淋巴细胞。重型肝炎时白细胞可升高,红细胞下降,血红蛋白下降。肝炎肝硬化伴脾功能亢进者可有血小板、红细胞、白细胞减少的“三少”现象。尿常规:尿胆红素和尿胆原的检测是早期发现肝炎的简易有效方法,同时有助于黄疸的鉴别诊断。肝细胞性黄疸时两者均阳性,溶血性黄疸时以尿胆原为主,梗阻性黄疸以尿胆红素为主。妊娠急性脂肪肝患者尿胆红素常阴性,有助于与妊娠急重型肝炎鉴别。电解质重型肝炎常见低、低,低,亦可有低、低、低等。肝肾综合征时可出现高。血糖超过%重型肝炎患者有血糖降低,临床上应注意低血糖昏迷与肝性脑病的鉴别。血浆胆固醇%的血浆胆固醇来自肝脏,肝细胞严重损伤时,胆固醇在肝内合成减少,故血浆胆固醇明显下降,胆固醇愈低,预后愈险恶。梗阻性黄疸时胆固醇升高。补体当肝细胞严重损害时,补体合成减少。临床检测和补体对预后有评估作用。甲胎蛋白()和感染与肝细胞癌()的发生有明显相关性,含量的检测是筛选和早期诊断的常规方法。肝炎活动和肝细胞修复时有不同程度的升高。应进行动态观察。急性重型肝炎升时,提示有肝细胞再生,为预后良好的标志。胆汁酸血清中胆汁酸含量很低,当肝炎活动时胆汁酸升高。由于肝脏对胆红素和胆汁酸的运转系统不同,检测胆汁酸有助于鉴别胆汁淤积和高胆红素血症。肝纤维化指标一些检测项目已在临床上应用,如Ⅲ型前胶原肽、Ⅳ型胶原,层连蛋白、透明质酸、脯氨酰羟化酶等,对肝纤维化的诊断有一定参考价值,但缺乏特异性。影像学检查型超声波有助于鉴别阻塞性黄疸、脂肪肝及肝内占位性病变。对肝硬化有较高的诊断价值,能够反映肝脏表面变化,门静脉、脑静脉直径,脾脏大小,胆囊异常变化,腹水等。彩色超声波尚未可观察到血流速度。在重性肝炎中可动态观察肝脏大小变化等,的应用价值基本同型超声波,但其有损伤性和价值昂贵,如应用增强剂,可加重病情。肝活检病理检查其意义包括对病毒性肝炎作出病理诊断,对不典型病例作出明确判断,有助于治疗效果评价及观察预后转归,还可从组织中检测病原标志以明确感染。病原学检查
基因及编码蛋白乙型肝炎与抗在感染两周后即可阳性。只要阳性就可诊断感染,阴性则不能排除感染。抗为保护性抗体,阳性表示对有免疫力。低滴度应注意假阳性。乙型肝炎与抗感染后可出现和抗同时阴性,即所谓窗口期,此时已消失,抗仍未产生,少部分病例始终不产生抗。和抗同时阳性可出现在感染恢复期,此时未消失,抗已产生;另一情形是基因区发生变异,野生株抗不能将其清除;或抗阳性者感染了免疫逃避株★常用法检测。★目前诊断试剂质量较高,灵敏度可达。从全国室间质控评价结果显示,阳性标本检出率达到或超过%。★滴度越高,、阳性的可能性越大。★血液与肝组织的含量并不完全相关阳性就可诊断现症感染吗?为什么血清阴性不能排除感染?★检测试剂不够敏感。试剂盒由亚型抗体和抗原制备,对亚型的灵敏度较低。★基因变异(抗原性发生改变)。★基因变异(转录受抑制)。★重叠感染(干扰合成)。抗原性共同决定簇“”确定亚型,赖氨酸精氨酸确定亚型,赖氨酸精氨酸能导致阴性的区变异★半胱氨酸酪氨酸★谷氨酸天冬氨酸★苏氨酸天冬氨酸★蛋氨酸苏氨酸★插入氨基酸★前部分缺失如何诊断血清阴性的感染?★提高检测敏感性★采用针对变异抗原的检测试剂★的检测★组织中标志物的检测提高检测敏感性方法基于电子旋转共振技术的方法,检测中稳定的氮氧基因。在例阴性样本中,检出例阳性。抗阳性就万无一失了吗?低滴度应注意假阳性单一抗阳性检出率:★先后感染了不同的亚型★基因变异★基因变异抗阳性阴性并不排除肝细胞内的存在与抗共存★可出现在感染的恢复期,此时未消失,抗已产生,大部分归功于检测敏感性的提高。★基因发生变异,野生株抗不能将其清除;★抗阳性者感染了不同亚型或免疫逃避株。基因变异导致与抗共存★苏氨酸丝、异亮氨酸★赖氨酸谷氨酸★甘氨酸精氨酸★前缺失乙型肝炎与抗的存在表示病毒复制活跃且有较强的传染性。消失而抗产生称为血清转换。抗阳转后,病毒复制多处于静止状态,传染性降低。长期抗阳性者并不代表病毒复制停止或无传染性,研究显示~仍可检测到,部分可能由于前区基因变异,导致不能形成。★是重要的免疫耐受因子,大部分情况下其存在表示患者处于高感染低应答期。★与有良好的相关性。★阳性标本检出率%左右。水平与的关系★>,±。★~,±。阴性抗阳性,阳性感染是否均由前区变异导致?阴性抗阳性,阳性★基因变异★低水平复制★重叠感染。基因变异导致阴性抗阳性,阳性感染
★前区位,形成终止密码,合成终止。★前区缺失或插入变异,改变的抗原性,常规试剂检测阴性。★区变异,导致的抗原性改变。★基因启动子点突变或起始密码点突变。★区变异使转录受抑制,导致合成减少,甚至难以检出。阴性抗阳性,阳性感染
★水平一般较低。★以上由于位突变引起。★多发生于型。与抗共存
★血清转换过程中。★检测敏感性提高。★野生株与变异株同时存在。乙型肝炎与抗阳性表示血清中存在颗粒,处于复制状态,有传染性。抗是感染后较早出现的抗体,绝大多数出现在发病第一周,多数在个月内消失。高滴度的抗对诊断急性乙型肝炎或慢性乙型肝炎急性发作有帮助。单一抗阳性者可以是过去感染,因其可长期存在;亦可以是低水平感染,特别是高滴度者。抗阴性的感染★免疫耐受。★检测试剂原因,目前试剂准确性约。★区突变。检测水平有无意义?★水平与及。★抗水平与是否注射疫苗。★水平与。与抗病毒治疗。★抗水平与现症感染。血液中水平是否与肝组织中水平成正比关系?乙型肝炎
病毒复制和传染性的直接标志。定量对于判断病毒复制程度,传染性大小,病毒药物疗效等有重要意义。检测方面,还有前区变异、区变异和多聚酶基因变异等检测。拷贝数=乙肝病毒载量
为什么建议每个病人都要进行检测?检测的临床意义⒈诊断方面:⑴是存在最直接的依据⑵是复制的标志⑶是患者具有传染性的标志检测的临床意义⑷对起补充作用:①(﹣)抗(﹢)乙型肝炎(前区变异)②(﹣)乙型肝炎(区变异)③低水平感染单项抗(﹢)乙型肝炎检测的临床意义⒉疗效判断:是目前判断乙肝抗病毒药物疗效最敏感的指标⒊预后判断水平与病情有一定的关系检测的临床意义调查表明并不是所有“大三阳”的病人都处于复制期,具有传染性;也不是所有“小三阳”的病人都无复制。因此,要准确知道是否处于复制状态,最准确的方法还是通过检测来决定。检测方法⒈斑点杂交(基本淘汰)
⒉定性(基本淘汰)
⒊定量(主流)⒋基因芯片(将来)检测方法的比较斑点杂交定量敏感性特异性高稍低高重复性好稍差好定量范围简便较繁琐简便简便安全性好好好设备便宜稍贵昂贵技术要求低高高检测价格低中高
基因芯片与定量检测结果比较基因芯片阳性阴性
阳性定量阴性符合率为(),芯片检出率为(),假阳性率为().
基因芯片与定量检测结果比较基因芯片阳性阴性
阳性定量阴性符合率为(),芯片检出率为(),假阳性率为()。
基因芯片与错配检测变异株结果比较基因芯片阴性混合
错阴性配
混合
份芯片检测的标本与序列测定结果一致为什么建议每个病人都要进行检测?
从与的关系中可得到解答
我科例与结果分析
例数()例数()()()()()()()()()()()()()()合计
与关系
本科四川湖南解放军南方医院
“大三阳”﹡“小三阳”“小二阳”抗抗三抗体阳全阴调查总例数*阳性率和均阳性而阴性可能有以下原因:()干扰素或拉米夫定等治疗后病毒复制受抑制。()所用引物相应的序列发生突变,此引物与突变不能配对结合。()病毒整合于宿主肝细胞染色体而血中游离很少或缺乏。乙型肝炎组织中标志物的检测可用免疫组织化学方法检测肝组织中、的存在及分布;原位杂交或原位方法检测组织中的存在及分布。除可判定病毒是否处于复制状态外,对血清中标志物阴性病人的诊断有一定意义。有关变异株的检测
变异酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸。如发生变异,则其中的蛋氨酸()突变为异亮氨酸(,)或缬氨酸(,)形成变异株或变异株。位于多聚酶的关键功能区。有关变异株的检测拉米夫定治疗后复阳是否均由变异引起?如果是,不用检测,只需检测即可。有关变异株的检测我科例出现耐药性的患者中,例发现有变异。提示耐药性的发生主要是由于变异所造成,但可能存在变异以外的其他因素。有关变异株的检测报道例拉米夫定治疗后耐药病例,所有均存在变异。报道例拉米夫定治疗后耐药病例,所有均存在变异。有关变异株的检测自然条件下存在变异株。我科发现一例。报道例正常无症状感染者中,例拉米夫定治疗前为变异株。有关变异株的检测既然自然条件下存在变异株,拉米夫定治疗前是否应进行变异株的检测?有关变异株的检测可能是突变为的中间产物,是否意味着检测时应区分变异株还是变异株?甲型肝炎⑴抗:在发病后数天即可阳性,~月转阴。是早期诊断甲型肝炎最简便而可靠的血清学标志。⑵抗:出现稍晚,于~个月达到高峰,持续多年或终身。抗阳性表示受过感染。属于保护性抗体,具有免疫力的标志。丙型肝炎抗和抗:抗体不是保护性抗体,是存在感染的标志。抗在发病后即可检测到,一般持续
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