《基因工程》第二章工具酶

第二章:基因工程工具酶主讲教师:杨应斌答疑QQ号:715656164基因工程一、DNA限制性内切酶二、甲基化酶三、分子克隆过程中所需要的另一些酶Lurva和Human（1952）以及Bertani和Weigle（1953）发现了噬菌体λ的限制作用各劫种点细退菌遭都订能贸合刮成觉一修种巴或窝几忽种覆顺迅序卡专促一乎的螺核兽酸放内销切凭酶劲。陶这海些凭酶作切沟割D由N亡A的抗双距链独，贝因恢为位它勤们怖的桂功档能茶就潜是挤切拆割D赵N螺A，限菌制链外愉源湿性D够N教A存躬在茶于蜂自固身各细宜胞骑内，娃所负以拉称扭这秋种症核颈酸纱内千切卫酶点为圾限展制留酶忠。合仰成尾限克制股酶您的性细讯胞谎自句身遵的D元N睬A可阴以锯不份受栽这输种茎酶丈的使作氧用，丢因陆为票细恨胞丝式还请合辞成诊了万一租种若修泛饰张酶冷，撤它踪蝶改肯变犁了心限蒜制蹈酶依识亦别蔑的D渴N尘A顺辱序耗的裂结旨构棋，袄使狂限排制棕酶勇不痛能到起页作包用继。目页前食，罢从板各没种锻生烫物扭中甩分阀离候出雀的仅限包制吨性竞内袋切李酶翁已所接腾近2百0韵0种兴，健其护中8吴0多南种衫是业切侍割D瞧N店A双烟链型。（阿一溜）煎命膜名糟原汪则限疏制秆性堆内迅切群酶加主总要旁是塔从效原清核联生饼物专中茂提倍取个的前。滩现隐在引通浅用滤的使命野名衔原爬则脏是雨：属补名种冷名株私名如妖果市同侵一谣菌露株仅中清有牙几镇种走不引同哄的擦内鼻切丸酶挑时子，林则挑分炮别赶用钻罗斯马促数朴字Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ者…巾…来橡代字表念。Ha岸e特m责o超p觉h筛i盘l口u际si帜nf嫂l共u梦e如u倍z划a残ed酶范名H涌i觉nd岭I牢I扎IEs推c彼h概e榨r吗i卷c衣h仅i茄ac毒ol蚕iRY访1暴3E统c由oR利Ⅰ（村二壶）冶分侍类牺和插特墨性第恒二白类扔限拌制辅性楚内艇切栋酶辜的克识壮别社顺绿序蒙是治一查个回针文荷顺胞序,如E武c街o虫R唐I的麻识壳别祸顺星序寺为肚：5’……G*A-A-T-T-C……3’3’……C-T-T-A-A*G……5’讨亦论:下爬面算的捎序截列般中潮可采能屠含训有棚多御少市个缺潜想在昼的桌酶宪切洞位技点?G拌A酿A创T欲T隶C师G骨A遣G色C酿T制C葱G挥G失T致A斜C辈C形C俯G畅G迁G淹G比A帖T劳C台C只T森C鹅T偿A针G舱A132654一椅、D危N奥A限羡制梢性辟内隙切借酶二约、愤甲您基败化致酶三询、皂分础子咏克属隆拣过兰程虑中袍所口需浸要志的借另烧一凉些霸酶二劳、粘甲偿基汇化时酶限谷制-修殃饰徐系作统遗中患的宝修山饰国作科用糖是良由易甲畏基敢化膏酶构（m崖e美t臭h嫁y阴l狱a泛s植e）河来宴完枪成猛的鲜。意甲堪基书化葛酶贼同楼限倒制迫性咱内忆切埋酶奴具减有厅完咽全讨相苦同桨的接识选别暴顺粉序沈。娃甲辣基秘化箭酶柳使翅识努别楚顺泛序齐中坐的某挥个沫碱乎基队发叶生抱甲克基湾化，惩保监护D蔽N加A不面被趟限昌制烧性耀内冰切分酶榜切创开桌。D元N决A甲窝基斩化择酶负普晌遍罪存巷在侵于银原挎核阳和题真柴核姨生寻物茄中玻，留能楚将S窑-腺符苷侦甲尺硫追氨鬼酸焦上烈的贼甲剥基途转辞移械到络腺梳嘌隔呤记或红者戏是愤胞悟嘧算啶激上姐。在芹原厨核赴生袋物廊中撒，D剂N胳A甲强基毒化淹酶祥作妥为乐限震制顶修抱饰桂系抓统恐的蚕一删个掉组摘成悟部佩分肯广蚁泛刷存盾在逮，乳它英们桨的亩作我用长是酸保屡护斜宿夏主洋菌主不截被烈相载应秀的促限乖制化性密内敲切艇酶勒切善割固。京大气多烤数盏实牧验递室联使态用捧的罗大杰肠皱杆堡菌雪包闷括炎三鹿种秒位霞点互特负异揭性拆的D浓N敞A甲逆基超化四酶爱。由d舰a灾m基饱因值（D先a涨m甲勤基惹化额酶秩）把编蚁码帽的纠甲誉基广化倡酶贸能蜡将毅甲贪基困转横移品到G喜A再T岔C序薪列演中喉的者腺层嘌舰呤N富6位泳点找上钥。由d乖c倦m基拖因差编惠码扫的D昼c罚m甲掏基紧化沫酶黑，耍能衫在C葡C拘A末G燃G和C安C偿T捎G饮G序翁列间内霸部版的资胞景嘧笨啶C闲5位挑置锻上文甲捷基越化勇。E没c眨o锡K还I甲女基虚化碎酶颗，昌可雁将A骆A依C（N示6狼A）G素T梨G傍C和G沉C朋A隐C（N煎6跃A）G躺T根T上迷的车腺栏嘌洋呤或进它行司甲猛基株化晨修捷饰雕。(觉1耐)原策核茄生螺物厕Ｄ姨Ｎ艰Ａ边甲烈基始化如揉果甜限父制盯性宅内义切惰酶成的饰识因别饿位该点燥是截从拜表叔达D安a蜘m或D挠c磨m甲目基顶化佳酶削的炉菌内株厅中擦分盛离墓而愧得辣，炸并溪且滔其赏甲忧基邮化傅识团别炉位筝点装与香内载切阻酶俯识面别净位娃点冒有取重父叠勒，追那岔么姨该易限缝制夕性赚内素切诞酶粪的珍部衫分撇或归全巨部策酶使切静位图点亏有尊可位能科不跟被滥切立割宝。例逆如扰，搬从d勺a清m糟+泄E身.赖c质o疗l鼓i中公分软离蜘的匠质庸粒D核N对A完筹全禽不膜能敢被鞋识芹别肯序俘列籍为G硬A更T瓜C的M似b浪o础I所穿切米割笼。E笋.宫c桶o哥l垃i菌澡株疾中煤的D冬N善A甲匀基局化携程盏度微并贡不慈完怕全貌相鸡同提。p吓B绘R垫3装2闪2脏D支N逃A能宜被扑完脏全冈修迟饰希（已因坊此罗完冷全吗不悲能丸被M掀b辅o证I切者割很）汗，鸦而λ旨D淹N悠A只斥有袋大区约5傅0脚%的D句a照m位货点滤被蔑甲潮基航化没，悬这云是计因刮为听在λ燃D圾N腔A被亚包芹装孔到残噬锻菌参体纱头脾部汉之铃前庸，惭甲寻基萄化田酶受还渔没彻来雕得挖及贩将D拉N刻A完情全枝甲泰基梯化帅。恨因迁此丝式，笔被D炸a虑m或D缸c视m甲算基药化秧完厅全鲜阻炒断图的罢酶皇却映能摆对牛这主些λ堆D梯N允A进偿行摔部裹分碧切昏割季。被D棚a负m或D宫c径m甲裤基啦化肾的叉限今制德性崭位窄点香可悄以挎通再过婶克捎隆D李N便A至d锅a搏m亩-亏/逗d雕c岩m针-菌业株【如d佩a仓m萌-辨/盘d汇c济m显-掩E动.诉c物o迟l美i感卸受拥态牧细股胞垦（N扇E驳B珠#堡C挤2静9盼2谜5）】进比行胖去园甲扬基略化打。(斤1丽)真墓核项生亲物惯Ｄ熔Ｎ妹Ａ徐甲闯基翼化在至高秤等选真句核躬生荐物赌（滋如D滚n蝇m诊t男1）斧中尘发挪现范的C湖p慢G甲探基异转絮移布酶河（C锈p扫G疲M软T山a毫s亏e嚷s）咬，魄将抬甲读基姐基斩团伤转笔移伴至煎胞像嘧旦啶另残黄基男上峡的C掉5位顶点佛。C款p认G甲逝基期化禾形仙式谁受眼遗购传火因各素秩的葱影动响粥，策具安有障组暗织榨特欲异彩性罪，锤并混与塘基任因畜表拉达极相铸关充。妈因震此临，置我锈们弦推诱测C准p鸽G甲蛙基母化变在坦基陆因捎分糟化进和王表镰达甜中斩起睬了橡一两定贞的托作租用助。在慎消誉化述真维核援基隙因忙组D郑N处A时且尤免其矩要产关息注C肿p佛G甲娱基朝化修的糖影懂响骑。身需霞要律注建意朴的仍是滩，茂一缎旦D窝N佩A被础克笼隆响到膏宿凤主秆菌迈中酿，悬将搬不盗存经在C寺p抚G甲费基根化病形标式汁。一抗、D序N倾A限购制肾性龙内召切挤酶二扫、恩甲梦基占化姑酶三粘、敲分届子管克馅隆越过蜻程复中打所协需耕要斗的样另僻一畅些跳酶（慎一菠）D告N迹A聚滚合雾酶（允二挡）R老N役A聚躲合器酶（抹三厨）钥反网转申录坑酶（惠四故）检核寄酸层外堤切瘦酶（亡五额）污核笛酸追酶S赖1（左六喘）D技N蚊A酶（湖七斤）R波N挑A酶（白八娱）姐连咬接脏酶（蛾九循）摆末谦端希转拨移惧酶（象十崇）凭碱每性善磷股酸戒酶（籍一接）D李N饥A聚蚕合不酶（D盈N踢a埋p奔o昏l单y狼m秒e捡r药a由s纲e）士的踢作练用饼是法将1个兵脱总氧萍三叫磷附酸桑核游苷痛酸留加括到减引殃物段（p漏r掩i苗m区e哑r）径的3挪’茎-哄O搏H上椒，后释羊放半出更一鸡个桥焦滑磷范酸雕分赞子击（p嫁p殖i轨)聚俩合裂酶栗主这要晌有涨以冲下他两内种亩种万：1．扛大畜肠以杆痛菌D便N氏A聚行合浸酶Ⅰ2．乒噬蚁菌播体D品N炕A聚掠合堆酶1．大杆肠障杆仔菌D句N织A聚登合职酶（E撑.仇C顿o减l蛙i孔D咬N拘A竿p迟o新l挨y恰m香e而r碌a萝s射e）逆主尽要踩有3种额作雅用证：①5交’钞→既3轮’的储聚原合扰作伐用奶。但豆不才是币复买制眯染踏色京体恐而差是以修副补D脾N滋A，姜填感补D捏N袍A上齐的讲空杨隙音或冻是雀切盒除R咸N伸A引快物碰后妻留撇下折的氧空释隙轿。②3扩’蓄→道5绞’的拢外栏切数酶清活则性对。消方除康在斥聚忘合钢作箱用绳中鹊掺破入恳的物错步误耽核沫苷驳酸毙。③5结’指→马3笛’外肥切坚酶涨活际性斑。切狗除蓄受鬼损细伤帐的D尊N饰A。大世肠盏杆钳菌D冶N兴A聚脂合绕酶Ⅰ的K锄l童e醋n遇o颈w片国段脉是符完殃整滤的D奔N捐A聚敌合士酶Ⅰ的杠一谅个摊片膀段贸，辛只喂有裳在5源’号→怪3聚败合渔酶晓活或性鹅和3丝式’井→熔5哑’外垫切此酶榴活问性焰，岸失扁去嗓了5悠’部→甘3外昼切携酶气活岁性搜。2．丢噬字菌第体D梅N守A聚过合烂酶这存里嚼以T酒4需D戴N处A聚番合怪酶拒为搜例徒。腾它勤也延具旗有5鼓’切→合3聚壮合除酶勺活旦性夏，览但辛它竹的笨外订切辩酶贱活乐性践比罚大辩肠盈杆拉菌枕的丧要掠高2自0渗0倍牺。消因杰此夸，恢它浮也礼可拼用损来喘补槐齐忠单挂链廉末饶端诉或凉标疯记外同蜻位咸素养。催筛化转危录的R慕N票A聚泳合怨酶谈是爪一云种灵由垄多嚼个偷蛋治白亚熔基组肯成沿的续复胳合申酶领。（良二欲）R灿N叨A聚贴合锣酶真盏核阻生婆物曾的R纽奉N誉A聚扣合汤酶真苏核湾生相物锤的R歪N若A聚对合父酶伪分灯三骆类致：R糕N鞭A聚障合盼酶Ⅰ存悲在集于席核全仁蔽中拖，游转赌录r福R仔N把A顺碑序成。