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三十八动物细胞工程(30分钟100分)一、选择题:本题共8小题,每小题5分,共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。1.(2020·天津等级考)在克隆哺乳动物过程中,通常作为核移植受体细胞的是去核的(
)A.卵原细胞 B.初级卵母细胞C.次级卵母细胞 D.卵细胞【解析】选C。本题主要考查胚胎工程。在哺乳动物的受精过程中,获能的精子与处于减数第二次分裂中期的卵母细胞结合,形成受精卵。在克隆哺乳动物过程中,作为核移植受体的细胞是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞,应为次级卵母细胞。2.下列属于动物细胞培养与植物组织培养区别的是(
)A.动物细胞培养基与植物细胞培养基的成分有所不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞培养可发生遗传物质改变,而植物组织培养不能D.植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性【解析】选A。动物细胞培养所用的培养基与植物组织培养所用的培养基的成分不同,如培养动物细胞的培养基需加入血清,而植物组织培养所用的培养基则不需加入血清,A正确;动物细胞培养与植物组织培养都需要在无菌、人工控制的条件下进行,B错误;动物细胞培养与植物组织培养过程中都可发生遗传物质的改变,C错误;植物组织培养最终能够形成完整的植物体,能体现植物细胞的全能性,动物细胞培养最终不能被培养成新的个体,不能体现动物细胞的全能性,D错误。3.(2021·哈尔滨模拟)如图为动物细胞培养的基本过程示意图,相关叙述错误的是(
)
A.容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,需要用胰蛋白酶将组织分散单个细胞B.在D瓶中极少数细胞存活,是因为存活的细胞获得不死性,其遗传物质不发生改变C.为保证培养条件无菌,除进行灭菌外,所有操作都需在无菌条件下完成D.细胞培养时,需通入5%CO2,其主要作用是维持培养液的pH【解析】选B。容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,需要用胰蛋白酶处理分散成单个细胞,A正确;在D瓶中正常培养一段时间后,发现有许多细胞衰老死亡,只有极少数细胞存活,这是因为存活的细胞发生了突变,遗传物质发生改变,可无限增殖,B错误;为保证培养条件无菌,所有操作都需在无菌条件下完成,C正确;细胞培养时,需通入95%的空气和5%CO2,其中5%CO2主要作用是维持培养液的pH,D正确。4.(2021·北京模拟)下列关于细胞工程操作流程的表述,不正确的是(
)A.动物组织细胞悬液→原代培养传代培养B.高产奶牛体细胞去核的牛卵母细胞重组细胞淋巴细胞和瘤细胞融合细胞单克隆抗体D.胡萝卜根切断切成1cm2小块愈伤组织植株【解析】选D。胰蛋白酶能将组织细胞分散开来,进行原代培养,由于存在接触抑制,再用胰蛋白酶能将组织细胞分散开来,进行传代培养,A正确;高产奶牛体细胞的整个细胞或细胞核移植到去核的牛卵母细胞,电刺激形成重组细胞,B正确;用灭活的病毒将B淋巴细胞和瘤细胞融合,经过两次筛选,第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次用抗体抗原杂交,筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,再经过培养获得单克隆抗体,C正确;将胡萝卜根削皮切段,用自来水洗净,在无菌操作台上将胡萝卜段用酒精消毒30s后,立即用无菌水清洗2~3次,再用次氯酸钠溶液处理30min,立即用无菌水清洗2~3次,接种到培养基中形成愈伤组织和完整植株,D错误。5.科学家培育克隆羊时,使用了三种供体细胞的细胞核,分别将这些细胞核移入去核卵母细胞中,形成重组细胞,发育成重组胚胎,这些重组胚胎的发育情况如下。下列相关分析不正确的是(
)A.早期胚胎细胞作为供体细胞时,妊娠成功率最高B.克隆羊的遗传信息与供体细胞完全相同C.体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植D.重组细胞的发育与去核卵母细胞的细胞质有关【解析】选B。分析表格数据可知,早期胚胎细胞作为供体细胞时,妊娠成功率最高,A正确;克隆羊的绝大部分DNA来自供体细胞核,但去核卵母细胞的细胞质中也有少量DNA,故克隆羊的遗传信息并非与供体细胞完全相同,B错误;对比表格中的数据可知,体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植,C正确;重组细胞的发育与去核卵母细胞的细胞质有关,D正确。【知识总结】克隆动物的遗传特点
克隆动物的亲本有三个,即体细胞核供体、卵母细胞细胞质供体和代孕母体。
(1)克隆动物细胞核基因来自体细胞核供体,因此,克隆动物的性状与体细胞核供体基本相同。
(2)克隆动物的细胞质基因来自卵母细胞,因此,克隆动物的性状与卵母细胞供体部分相同。
(3)代孕母体没有为克隆动物提供遗传物质,因此,克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系。【加固训练】
如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程。下列有关叙述正确的是(
)A.实验小鼠注射的甲能与抗胃癌单克隆抗体特异结合
B.与骨髓瘤细胞相比,B淋巴细胞中代谢更旺盛
C.利用灭活的病毒、农杆菌等可诱导细胞融合以获得乙
D.两次筛选应用的主要原理相同,但丙中含有不能分泌抗体的细胞【解析】选A。实验小鼠注射的甲为抗原,能与抗胃癌单克隆抗体特异结合,A正确;骨髓瘤细胞具有无限增殖的特性,B淋巴细胞没有增殖能力,因此与骨髓瘤细胞相比,B淋巴细胞中代谢较弱,B错误;利用灭活的病毒等可诱导动物细胞融合,进而获得乙,但农杆菌不能用于动物细胞融合,C错误;两次筛选应用的主要原理不同,首次筛选是用特定的选择培养基,将融合的杂交瘤细胞筛选出来,二次筛选是通过克隆化培养和抗体检测,将分泌所需抗体的杂交瘤细胞筛选出来,丙中的细胞都能分泌抗体,D错误。6.动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是(
)A.有无血清对正常细胞培养的影响不同B.培养基中补充血清有助于正常细胞的培养C.正常细胞与癌细胞的增殖速率相同D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大【解析】选C。据图可知,在相同的时间,无血清情况下的正常细胞数目比有血清的正常细胞数目少,说明了有无血清对正常细胞培养有不同的影响,A正确;在相同的时间内,有血清情况下的正常细胞数目多于无血清的情况,所以培养基中补充血清有助于正常细胞的培养,B正确;据图可知,在有血清的情况,培养后期,癌细胞的数目明显多于正常细胞数目;无血清的情况下,将癌细胞和正常细胞培养相同的时间,癌细胞的数目明显多于正常细胞数目,说明正常细胞的增殖速率小于癌细胞的增殖速率,C错误;据图可知,培养癌细胞相同的时间,有血清和无血清的情况下,癌细胞的数目无明显的区别,说明血清对癌细胞的培养影响不大,D正确。7.无论是植物细胞,还是动物细胞,都可以利用一定的方法诱导融合,可用模型图表示细胞融合技术的部分过程,有关叙述错误的是(
)
A.若该过程表示植物原生质体的融合,则甲、乙细胞可用酶解法处理B.若该过程表示动物细胞融合,可用灭活的病毒诱导C.若该过程表示制备单克隆抗体,则丙细胞是杂交瘤细胞D.该过程体现了细胞的全能性【解析】选D。植物细胞需要用酶解法除去细胞壁,制备原生质体,再诱导细胞融合,A正确;诱导动物细胞融合可以用灭活的病毒,B正确;制备单克隆抗体过程中,丙是由已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交形成的杂交瘤细胞,其既能无限增殖,又能产生特异性抗体,C正确;该过程结果形成丙细胞,没有形成新个体,不能体现细胞的全能性,D错误。8.(2021·南通模拟)为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗,科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图实验,相关叙述错误的是(
)A.过程①中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复B.过程②重组细胞培养依次经历了卵裂、桑葚胚、原肠胚和囊胚等过程C.过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达D.过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能【解析】选B。卵母细胞中含激发细胞核全能性的物质,核移植过程中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复,A正确;过程②重组细胞培养经历了卵裂、桑葚胚、囊胚和原肠胚等过程,B错误;过程③是诱导分化过程,其关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达,C正确;过程④移植的神经元细胞是取自该小鼠自身细胞诱导分化而来,不会发生免疫排斥反应,D正确。二、选择题:本题共3小题,每小题6分,共18分。每小题有一个或多个选项符合题目要求。9.小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时,细胞周期基本相同,但上皮细胞在培养时,呈现扁平不规则多角形,且贴附在培养瓶内壁上,而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述错误的是(
)A.使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分B.培养液需要定期更换C.培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象D.相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同【解析】选A、B、D。使用合成培养基培养动物细胞通常添加天然成分血清,A错误;定期更换培养液,以便清除代谢物,阻止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害,B错误;上皮细胞在培养时,呈现扁平不规则多角形,且贴附在培养瓶内壁上,如存在接触抑制,则细胞在瓶壁上只有一层,C正确;上皮细胞在培养时贴附在培养瓶内壁上,淋巴细胞则常常悬浮在培养液中,则相同次数分瓶培养所获得的淋巴细胞数目多,D错误。10.(2021·临沂模拟)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG的单克隆抗体可用于早孕诊断。人工制备抗HCG单克隆抗体的大致流程如图,下列叙述错误的是(
)A.①过程中促融剂常用灭活的病毒,不可用聚乙二醇B.②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体C.③过程专一抗体检测利用抗原与抗体特异性结合的原理D.④过程的培养液中需要添加动物血清等物质【解析】选A、B。①过程促融剂常用灭活的病毒,也可用聚乙二醇,A错误;②过程中筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗HCG抗体,还需通过抗体检测,B错误;③过程中利用了抗原和抗体特异性结合的原理,C正确;过程④为动物细胞培养培养液中需要添加动物血清等物质,D正确。【拓展延伸】灭活的病毒诱导细胞融合原理:
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。这一过程既能反映出糖蛋白在细胞识别中的重要作用,又能反映出细胞膜结构具有一定流动性的特点。11.(创新性·白藜芦醇对人内皮细胞衰老凋亡的影响)SIRT1基因被称为长寿基因,SIRT1蛋白对于延缓内皮细胞衰老,改善因衰老而引起的内皮细胞功能障碍方面具有重要作用。科学家研究了白藜芦醇对人内皮细胞衰老凋亡、SIRT1基因表达的影响,部分实验结果如图。其中P1~P35是指体外培养的人内皮细胞的传代次数。下列说法正确的是(
)A.人内皮细胞传代培养时,需使用胰蛋白酶处理贴壁生长的内皮细胞B.随传代次数增加,人内皮细胞内自由基减少,SIRT1表达水平降低C.对照组应使用等量清水处理人内皮细胞,温度等与实验组保持一致D.适当浓度的白藜芦醇可以降低体外培养的人内皮细胞的凋亡率【解析】选A、D。传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的内皮细胞,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖,A正确;据图示可知,随传代次数增加,细胞的凋亡率逐渐增大,说明人内皮细胞内自由基增多,SIRT1基因相对表达水平先增大(P1~P5)后减小(P5~P35),B错误;对照组应使用等量的溶解白藜芦醇的溶剂处理人内皮细胞,温度等条件与实验组保持一致,C错误;由图3可知,适当浓度的白藜芦醇可促进SIRT1基因表达,从而降低体外培养的人内皮细胞的凋亡率,D正确。三、非选择题:本题共2小题,共42分。12.(20分)(2018·全国卷Ⅲ)2018年《细胞》期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题:(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,核移植是指__________。通过核移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目________(填“减半”“加倍”或“不变”)。
(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度________(填“大于”或“小于”)体细胞核移植,其原因是______________________________。
(3)在哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常,所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目________(填“相同”或“不相同”),性染色体组合________(填“相同”或“不相同”)。
【解析】(1)核移植是指将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个胚胎最后发育为动物个体;通过核移植方法获得的克隆猴的细胞核来自供体,因此克隆猴体细胞的染色体数目和核供体一致。(2)胚胎细胞核移植的难度小于体细胞核移植,原因是动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易。(3)哺乳动物雌性个体和雄性个体的体细胞染色体中的常染色体相同,性染色体前者是XX,后者是XY,因此分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目相同,性染色体组合不相同。答案:(1)将动物的一个细胞核,移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变(2)小于胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易(3)相同不相同13.(22分)到目前为止,单克隆抗体技术是动物细胞融合技术中最具应用价值的研究方向之一。制备单克隆抗体过程中,需要从众多融合和未融合的细胞中筛选出杂交瘤细胞,到底怎样筛选呢?请分析资料,回答下列问题:资料1细胞内DNA合成一般有两条途径,即起始合成途径和中间合成途径,其中起始合成途径需要叶酸作为一种必需的辅酶参与。资料2氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂,可以阻断叶酸的形成。融合实验中使用的骨髓瘤细胞是中间合成途径缺失株,只有起始合成途径。浆细胞虽不增殖,但有两条DNA合成途径。(1)根据上述资料分析,需要向经过促融处理后的各种细胞混合培养物中加入________,可使______________________不能分裂,从而筛选出唯一能增殖的____。
(2)上述筛选到的细胞要置于多孔细胞培养板的每一个孔中进行随后的培养。转移前,通常要将培养细胞稀释到7~10个/mL,每孔中加入0.1mL,这样做的目的是______________________。必要时可重复上述过程,目的是
______________________。
(3)
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