检验科甘油三脂标准操作规程（TG）

PAGE6-生物技术有限公司技术部标准操作程序StandardOperatingProcedures版本：V1：A0执行日期：2007-05-02共6页标准操作程序项目：甘油三酯方法：酶法文件编号XX-SH-SOP-07-008编写者日期审核者日期批准者日期颁发部门或个人接收部门或个人院长办公司保管者院档案室保管者医务科保管者检验科主任临床化学检验室发布日期：2007年4月2日实施日期：2007年4月3日前言为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISO15189《医学实验室——关于质量和能力的特殊要求》及WS/T227-2002《

临床检验操作规程编写要求》的有关规定并结合产品实际情况制订，作为本产品的标准操作程序。生物技术有限公司技术部2007年4月2日目

录1检验申请…………………32标本采集与处理…………………………33试剂及成份…………………………44方法原理……….…………45仪器……….……………….…………46校准液及校准模式………………………47质控品与室内质控规则…………………48标本检测步骤………….…………………59结果计算…………………510操作性能………………511试剂使用的注意事项……………...……512参考范围及医学决定水平………………………..……513检验结果的报告及范围………………………..………514临床意义……….….……615结果审核分析以及相关项目的联系..……………………..……..……616威胁生命的“紧急值”及报告规定.…………………..…617有关引用程序与文件………………..….618参考文献附录AXXX型生化分析仪参数甘油三酯测定标准操作规程1.检验申请单独检验项目申请：血清甘油三酯（Triglyceride；,缩写TG）测定；组合项目申请：血脂测定。临床医生根据需要提出检验申请。2.标本采集与处理2.1受检者的准备：采血前2周保持平时的饮食习惯，3d内避免高脂饮食，24h内不饮酒，空腹12h后采集标本。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2标本采集2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。2.2.2检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。2.2.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.2.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.2.5下列标本为不合格标本2.2.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.2.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、黄疸和浑浊的标本。2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。2.2.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.3标本处理2.3.1接收标本在30min内将标本离心分离出血清。吸出血清或血浆,标本应立即测量。处理样品时要将其当成生物污染品。2.3.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1d，普通冰箱中（2～8℃）稳定7d。-20℃可保存数月；-70℃至少保存半年；避免反复冻溶。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.3.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。2.4标本的注意事项2.4.1不建议采集抗凝标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。2.4.2妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。2.4.3采血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。2.4.4血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。3.试剂及成份3.1试剂本科使用的甘油三酯检测试剂盒，由浙江XX生物技术有限公司生产,产品货号为:XXX,试剂为液体试剂，其组份如下：主要组成份浓度Good´s缓冲液100mmol/L4-APP0.1mmol/LATP1.9mmol/L甘油激酶600U/L脂白脂酶600U/L甘油磷酸氧化酶500U/L过氧化物酶3200U/L叠氮钠适量3.2试剂盒保存及效期未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定28d。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。新打开试剂不宜与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。3.3试剂盒准备液态试剂型，即开即用，无特殊准备。4.方法原理4.1测定方法：终点比色法。4.2原理：脂蛋白脂酶（LPL）将血清中的甘油三酯（TG）水解成甘油（FG），甘油激酶（GK）将FG转变成磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶（GPO）的作用，磷酸甘油氧化并产生过氧化氢（H2O2），最后在过氧化物酶（POD）的作用下H2O2与4-氨基安替比林（4-AAP）和酚（三者合称PAP）缩合，生成红色醌亚胺色素（Trinder反应）。醌亚胺在500～550nm波长处有吸收峰，吸光度与标本中TG呈正比。脂肪酶甘油三酯+H2O甘油+酯肪酸甘油激酶甘油+ATP甘油-3-磷酸+ADP甘油磷酸氧化酶甘油-3-磷酸+O2磷酸二羟丙酮+H2O2过氧化物酶H2O2+4-氨基安替比林+对氯苯酚醌染料+H2O5.仪器XXXX型号仪器。6.校准品与校准模式6.1校准品：使用复合校准血清或使用试剂盒提供的水标准液。6.2标准类型和校准点数目：线性模式，n个校准点。6.3校准周期：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标。7.质控品与室内质控规则7.1质控品采用采用XXX公司提供的PrecinormU（正常范围质控）和PrecipathU（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。产品号为XXXXXX和XXXXXXX。7.2质控液重建方法：用蒸馏水溶解质控品，轻轻混匀，20min后即可使用。7.3质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控血清各一次。7.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。8.标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9.结果计算A测定A测定A标准血清中甘油三酯浓度（mmol/L）＝ΧCA标准式中：A测定——标本管吸光度；A标准——标准管吸光度；C——校准中液甘油三酯浓度（mmol/L）；10.操作性能10.1精密度：批内CV≤4％，批间相对极差CV≤8％。10.2准确度：测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。10.3线性范围：10mmol/L/L（血清与试剂用量之比为1:100时）10.4方法的有限性及干扰因素：10.4.1血清中游离甘油也可参与测定反应，一般人血清中游离甘油约占甘油三酯的5％，在常规测定时应考虑其影响。10.4.2血红蛋白＞6g/L时会引起正干扰；胆红素＞86μmol/L时有明显负干扰。抗坏血酸＞0.5g/L时会引起负干扰.11.试剂使用的注意事项11.1本试剂仅应用于体外诊断。11.2扔弃废物应符合当地的法规要求。12.参考范围及医学决定水平参考范围：参考范围：≤1.7mmol/L。13.检验结果的报告及范围13.1结果的报告13.1.1结果经审核确认准确无误后发出报告。13.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。13.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。13.2报告范围：血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为10mmol/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。14.临床意义14.1原发性高TG血症多有遗传因素，包括家族性高TG血症与家族性混合型高脂（蛋白）血症等。继发性高TG血症见于糖尿病、糖原累积病、甲状腺机能不足、肾病综合征、妊娠、口服避孕药、酗酒等。14.2一般认为单独高TG不是冠心病的独立危险因素，同时伴以高TC、高LDL-C、低HDL-C等情况时才有病理意义。目前将血清TG水平作为冠心病的预防和治疗时的第二目标。14.3通常将高脂蛋白血症分为Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ六型，除Ⅱa型外都有高TG，有的TG可高达1000mg/dl以上。14.4影响TG水平的因素有：①年龄与性别，TG水平往往随年龄上升；②长期高饱和脂肪酸和高热量饮食；③遗传因素；④其他，如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TG升高。14.5不应凭一次血脂检测结果作出血脂水平异常的诊断，有怀疑时应在两月内进行再次或多次测定，且两次测定至少要相隔一周；在判断是否存在高脂血症或决定防治措施之前，至少应有两次血脂检验的记录。15.结果审核分析以及相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者