介绍几种新的感染性标志物1218太工讲课件

介绍几种新的感染性标志物1218太工讲本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！本课件PPT仅供大家学习使用学习完请自行删除，谢谢！介绍几种新的感染标志物无锡二院胡锡池当前抗感染领域现状随着各类侵入性诊断操作的应用，多重耐药细菌的蔓延，严重烧创伤、器官移植病人和放化疗病人的增加，医院性感染、脓毒血症和多器官功能衰竭综合征〔MODS〕的发生率不断升高。尽管现代医疗已取得很大进步，但上述感染并发症仍是危重病人晚期死亡的主要原因。因此对这些感染并发症进展早期治疗显得尤为重要。然而感染并发症的传统诊断指标存在耗时、敏感性和特异性不高的缺陷。因此，寻找新的，敏感而特异的感染性标志物在当下就显得尤为重要。几种新的感染标志物1、降钙素原〔ProcalcitominPCT〕2、内毒素3、(1→3)--D-葡聚糖〔G试验〕4、半乳甘露聚糖〔GM试验〕5、呼吸道病毒7项检测〔直接免疫荧光法〕降钙素原〔ProcalcitominPCT〕降钙素原概述降钙素原是正常人血清中存在，含116个氨基酸组成的糖蛋白，最初由甲状腺C细胞产生;在非感染或病毒性感染疾病时保持非常低的血清水平，在细菌性感染时含量升高，并与感染程度和预后呈正相关;目前国外认为PCT为一种新的具有创新意义、可用于诊断和监控严重细菌感染及脓毒血症、败血症等疾病的理想指标，具有高度的敏感性和特异性;PCT含量的变化稳定，并出现在疾病的早期〔3-4h〕。半衰期(24h);正常血清水平:100-150pg/ml。哪些情况下降钙素原会升高全身性细菌感染；严重休克、SIRS和MODS。真菌、寄生虫、立克次体、结核感染；病毒感染、肿瘤、过敏、自身免疫性疾病及局部感染患者中，PCT水平可轻度升高；PCT的临床意义早期诊断在感染发生2-3h血浆PCT浓度就会升高.病情监测在脓毒性休克时PCT含量最高，可达1000ng/ml，是正常人的2000倍。随着感染的恢复PCT也随着下降。PCT升高幅度依次为Sirs〔全身性炎症反响综合症〕+/—，Sepsis〔败血症〕2+、SevereSepsis〔严重败血症〕3+、SepsisShock〔败血症休克〕4+预后判断动物实验证明，PCT是一个潜在的致死因子，本身不会启动脓毒性反响，但可放大并加重脓毒性的病理反响，当PCT含量升高时死亡率也升高。鉴别诊断细菌感染和非细菌性炎症反响〔自身免疫性疾病等〕的鉴别诊断细菌感染和病毒感染的鉴别诊断〔脑脊膜炎等〕器官移植术后鉴别诊断〔细菌感染、病毒感染、吸收热、排斥反响、真菌感染等〕脓毒性休克和非脓毒性休克的鉴别诊断PCT的实验室检测

免疫发光法(ILMA)–法国梅里埃公司、美国罗氏该方法敏感性高,特异性强，此法测定的低限值为0.1ng/ml,检测耗时约2h。SPCT-Q-半定量快速实验-德国评细替、武汉海特该方法操作简单、结果易观察的特点。其低限值为0.5ng/ml。检测耗时约0.5h。〔无锡雷赛公司〕放射免疫学分析法透射免疫浊度法不同人群中血浆PCT的值PCT与其它感染性指标的比较。PCTPSWBC:特异性高：全身性感染既可导致白细胞升高,也可以引起白细胞减少。PCTPSCRP：灵敏度好：PCT可在感染后2个小时后检测；CRP在炎症过程开场8～12h后，才能从血清中检测出。PCTPSIL-1、IL-6、TNF-α:稳定性好：PCT的半衰期较长(20～24h)；IL半衰期很短(数分钟至几小时)。E66851108

内毒素检测内毒素研究背景1.据统计，我国每年各种感染病人到达2亿人次，发热病人到达3亿人次，其中G-菌感染占很大比例。由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。内毒素的快速定量测定有助于对G-菌感染的早期诊断、治疗方法的选择及疗效的判断。2.3.4.定义细菌内毒素〔Endotoxin〕是G-菌细胞壁上的特有构造，内毒素为外源性致热原，它可激活中性粒细胞等，使之释放出一种内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为脂多糖〔LPS〕中的类脂A。Shwartzman现象5内毒素的生物学效应

发热反应1白细胞反应2内毒素血症（ETM）与内毒素休克（ETS）3弥漫性血管内凝血（DIC）4内毒素血症与临床疾病的相关性内毒素检测革兰阴性菌败血症的诊断呼吸道感染肝脏感染及肝硬化胆道疾病急性胰腺炎溃疡性结肠炎细菌性感染的辅助性诊断、治疗和预后判断原因不明的发热外源性输注的内毒素血症的诊断体液内毒素水平增高是严重细菌性感染〔尤其是革兰染色阴性菌〕的一个重要的特异性指标，而且，也是脓毒血症和全身炎症反响综合症的可靠指标。内毒素水平不仅可用于感染类别的鉴别诊断，也可用于感染控制和病情转归的参数。因此，建议在适当的时候可对内毒素的水平作一系列连续动态的监测。内毒素检测的临床意义(1→3)--D-葡聚糖(G试验)半乳甘露聚糖(GM试验)当前侵袭性真菌感染(IFI)检测的现状发病率呈逐年上升趋势，且漏诊率居高不下。据尸检研究发现，75%的IFI病例在生前漏诊，主要原因是IFI的临床表现不典型易被根底疾病所掩盖，导致诊断困难。目前常规微生物学检查〔直接涂片镜检和真菌培养〕耗时长，干扰因素多。而分子生物学检查〔真菌DNA的检测〕门槛过高，且不能提示现症感染。病理检查常因患者的病情所限难以实施。因此寻找有效的感染性标志物对于快速诊断侵袭性真菌感染、制定正确的治疗方案、争取最正确治疗时间，意义重大。真菌感染的诊断深部真菌感染的临床表现深部真菌感染影像学特征微生物学检查主要包括两方面:直接涂片镜检和真菌培养.分子生物学检测--真菌DNA的检测真菌细胞壁组分检测(1,3)-β-D-葡聚糖(G试验)真菌抗原检测半乳甘露聚糖(GM试验)，分布于大多数曲霉属真菌胞壁中1-3-ß-Ð葡聚糖的检测(G试验)真菌在自然界中分布很广,其细胞壁主要成分为(1-3)-ß-D-Glucan(葡聚糖).当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理，1-3-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液及其它体液〔如尿、脑脊液，腹水，胸水等〕中1-3--β-D葡聚糖含量增高。浅部真菌感染中，1-3--β-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高。快速检测血液等体液中酵母菌、丝状真菌等细胞壁成分，不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属。另据文献报道，检测葡聚糖含量不能用于隐球菌感染的诊断，可能因为隐球菌在免疫缺陷患者体内生长缓慢，并形成厚荚膜。有体外实验说明，新生隐球菌产生的1-3--β-D葡聚糖量比念珠菌和曲霉菌少。是早期真菌感染的敏感生物标志可鉴别致病菌和定植菌1-3-ß-Ð葡聚糖的临床意义1-3-ß-Ð葡聚糖〔G试验〕-北京金山川酵母菌、丝状真菌细胞壁成分；不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属；不能检测：隐球菌和接合菌；美国FDA已批准，欧洲局部国家已注册；敏感性、特异性：90％左右半乳甘露聚糖(GM试验)半乳甘露聚糖〔galactomannan，GM〕是曲霉菌细胞壁的组成成分，当曲霉在组织生长时可释放进入血循环。检测的是半乳甘露聚糖，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。当菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。连续检测GM可作为治疗疗效的监测。GM检测的临床意义GM检测有助于IPA的早期诊断，而且还有助于抗曲霉治疗的疗效以及疾病转归的判断血清中GM的量伴随IPA的进展会增加，也会随着药物的有效治疗而下降。如果在IPA的治疗期间，其GM抗原血症持续保持较高水平者，其预后那么较差，此时试着更改治疗方案。相反，GM抗原血症去除早且明显者，其预后那么较理想，应正确判定病情后及时撤药。跟踪研究发现，肾功能严重受损也会影响GM抗原血症的去除。半乳甘露聚糖〔GM试验〕-美国伯乐曲霉菌细胞壁上一种多聚糖抗原可以从血清、脑脊业、胸水、BALF检测到方法：ELISA〔BioRad〕：敏感性高1ng/mlLatexagglutination：15ng/mlG试验与GM试验比较G试验在以下情况可出现假阳性使用纤维素膜进展血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；使用多糖类抗癌药物。服用多粘菌素B,厄他培能,头孢噻肟,吡肟,优力欣,磺胺等药物链球菌血症；操作者处理标本时存在污染、标本溶血；放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等

G试验在以下情况可出现假阴性之前使用过抗真菌药物、标本放置时间过长，导致分解代谢。试验操作过程中离心时间过长。GM试验在以下情况可出现假阳性饮用牛奶或高蛋白食物；血液透析；自身免疫性肝炎等；食用污染的大米等。GM试验在以下情况可出现假阴性释放入血循环中的曲霉GM〔包括甘露聚糖〕并不持续存在而是会很快去除；以前使用了抗真菌药物；粒细胞缺乏的患者。G试验、GM试验结果与临床诊断不符合时的原因分析患者是不是粒缺的状态患者饮食或药物的干扰操作是否标准(分析前,分析中,分析后等)试剂和仪器是否状态良好仪器检测原理：G试验、内毒素

北京金山川-MB-80检测仪〔动态比浊法〕

动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原〔脂多糖〕，真菌可溶性抗原〔1-3〕-β-D葡聚糖，通过连续检测浊度变化建立时间〔T〕与微生物含量〔C〕关系的标准曲线，再经过光电转换原理，由软件系统分析得出样品中含真菌可溶性抗原或内毒素含量。

PCT，G试验，GM试验，内毒素检测早期诊断快速诊断指导用药评价效果动态观察呼吸道病毒7项检测〔直接免疫荧光〕呼吸道病毒感染概述呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为入侵门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。据统计，90%以上的急性上呼吸道感染由该类病毒引起。

KarinMetal.Cell.2006Feb24;124(4):823-35.呼吸道病毒感染病毒分类呼吸道病毒包括：正粘病毒科：

流感病毒副粘病毒科：

副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒其他病毒科：

腺病毒、风疹病毒、鼻病毒、冠状病毒、呼肠病毒呼吸道病毒感染病毒分类症状常见相关病毒不常见相关病毒流感流感病毒副流感病毒，腺病毒假膜性喉炎副流感病毒流感病毒，RSV，腺病毒细支气管炎呼吸道合胞病毒流感病毒，腺病毒，副流感病毒支气管肺炎流感病毒，RSV，腺病毒副流感病毒，麻疹，CMV，VZV卡他性鼻炎鼻病毒、冠状病毒流感，副流感，肠道和腺病毒呼吸道病毒感染流行病学流感病毒感染发生顶峰期在北半球一般是从11月到4月腺病毒出现在深冬到夏初RSV通常是在冬天到早春，持续5个月流行副流感病毒爆发会持续一年。呼吸道病毒检测临床意义Byington,C.L.,H.Castillo,etal.(2002).“Theeffectofrapidrespiratoryviraldiagnostictestingonantibioticuseinachildren’shospital.〞ArchPediatrAdolescMed156(12):1230-4.为临床合理用药指导依据，防止抗生素的滥用。减少耐药菌的产生，节省病人开支。呼吸道病毒检测方法别离培养—需要专业技能，时间长，本钱高。PCR—本钱高，实验室条件要求高EIA—低敏感性，假阴性高，IgM&IgGIF—快速，稳定，敏感，特异性强检测解决方案D3UltraTM1983年成立，OhioUniversity，230名员工。年销售额超过4亿美元。呼吸疾病，疱疹&衣原体感染，甲状腺疾病等Athens,Ohio&Cleveland,Ohio全球最大细胞株和病毒株供给商江苏省代理：无锡赛拓基因生物科技检测解决方案检测原理