注射用辅料标准制定和安全性

注射用辅料标准制定和安全性第1页，课件共49页，创作于2023年2月01030204背景介绍.目录注射级药用辅料标准.注射级药用辅料对注射剂安全性的影响致谢.第2页，课件共49页，创作于2023年2月2005年2006年2008年2011年2012年2013年2014年2015年“齐二药事件”

65例病例，9人死亡。“鱼腥草事件”，中药注射剂引起过敏反应等“刺五加注射液事件”，已知死4人“塑化剂”事件“地沟油代替大豆油制作抗生素中间体”“铬超标胶囊事件”台湾省违法添加工业级顺丁烯二酸酐用以化制淀粉美国新英格兰配制中心（NECC）事件，64名患者死亡一、背景介绍近年来发生的药害事件说明了药用辅料特别是注射用药用辅料对药品安全与质量的重要性。第3页，课件共49页，创作于2023年2月一、新英格兰配制中心（NECC）事件01020304未按照生产指令使用无菌的药用辅料和原料无菌车间污染最终导致甲泼尼龙醋酸酯（MPA）被真菌污染灭菌柜污染事件回顾：2012年9月，美国爆发了严重的脑膜炎疫情，疫情导致9个州的64名患者死亡，疫情原因为新英格兰配制中心生产甲泼尼龙醋酸酯（MPA）被真菌污染。2015年1月，美国司法部决定以二级谋杀罪起诉新英格兰配制中心的14名员工。美国FDA的调查污染的主要原因是：第4页，课件共49页，创作于2023年2月拟实行许可管理的药用辅料名单

（第一批）序号品种名称给药途径12,6二叔丁基对甲酚注射、眼用2丙二醇供注射用3玻璃酸钠注射、眼用4泊洛沙姆188注射5茶油（供注射用）注射6大豆磷脂（供注射用）注射7大豆油（供注射用）注射8胆固醇注射9蛋黄卵磷脂（供注射用）注射10甘油(供注射用)注射11精制玉米油注射12聚山梨酯80注射13聚乙二醇400注射14聚乙二醇600注射第5页，课件共49页，创作于2023年2月拟实行许可管理的药用辅料名单（第一批）15聚乙二醇200注射16聚乙二醇300注射17卵磷脂（供注射用）注射18麦芽糖注射19明胶

20明胶空心胶囊

21明胶肠溶空心胶囊

22羟丙基倍他环糊精（注射用）注射23乳糖注射、吸入24无水乳糖注射、吸入25无水乙醇（供注射用）注射26乙交酯丙交酯共聚物(25:75)

27油酸注射28油酸钠注射微球材料，合成工艺对其控释性能有很大影响第6页，课件共49页，创作于2023年2月二、注射用药用辅料对注射剂安全性的影响01040203注射用药用辅料中的有毒有害杂质注射用药用辅料特殊毒性注射用药用辅料被污染，而制剂又无终端灭菌工艺注射剂生产企业错用药用辅料第7页，课件共49页，创作于2023年2月ACB

1、注射用药用辅料中的有毒有害杂质注射用药用辅料中的过敏性杂质注射用药用辅料中的溶血性杂质注射用药用辅料中的刺激性第8页，课件共49页，创作于2023年2月注射用药用辅料中的过敏性杂质——乳糖（残留蛋白）

乳糖的生产工艺流程图：牛奶发酵后得到乳清（干物质、乳糖、脂肪、灰分）→脱脂→去除蛋白→蒸发浓缩→冷却晶体→分除母液→洗涤结晶→分除洗水→干燥→粗制乳糖→溶解→压滤→结晶→分除母液→洗涤→干燥→粉碎→筛选→包装原料乳清中的残留蛋白是注射用乳糖过敏源：

乳糖中残留蛋白的种类所占乳清蛋白的比例α-牛乳清蛋白(α-Lactalbumin)19.7%β-牛乳球蛋白(β-Lactoglbulin)

43.6%牛血清白蛋白（BSA)

4.7%免疫球蛋白（Ig）

3%其他蛋白

29%第9页，课件共49页，创作于2023年2月注射用药用辅料中的过敏性杂质——乳糖（残留蛋白）序号生产厂家检品编号批次氮含量（ppm）1AEC06012012065241062035219.12EC06012012089831060031516.73BEC060120120626364765343.64CEC0601201206515BU10001728.35EC06012012062431057810949.96EC06012012062651054937438.97EC06012012062721058794556.38DEC0601201206266L114218.99EC0601201206270L120159.410EC0601201207635L114520.411EC0601201207681L1134A400429.212EC0601201209464L114245.213EEC06012012065992011080238.014EC06012012066002011040552.415EC06012012076822012031841.116FEC0601201206521851110211417.817EC0601201206523851102271499.318EC0601201206526851110231450.919EC0601201208458851111161420.620GEC0601201207683120100222.721EC0601201207660120500612.222EC0601201207647120400211.723EC0601201208977120200425.624EC0601201207658120400514.125HEC06012012076452012030311.526EC06012012076742011121914.827EC06012012089822012052612.328EC06012012089812012050630.429EC06012012089802012052246.330EC06012012089792012050838.531EC06012012089782012052134.332EC06012012089842012060520.533EC06012012094552012013114.334IEC060120120764412031414.735EC06012012094532012060525.436EC06012012094542012052029.637JEC06012012062252012030225.838EC06012012062282012030123.339EC06012012062322012010120.8Y=-44.906+0.8405(r=0.9994)10ppm-500ppm39批乳糖中残留蛋白氮含量在11.5ppm-99.3ppm之间，按照口服级标准，39批样品都合格，由于本次抽样39批乳糖样品大多来自注射剂生产厂家，这些批次的乳糖用在注射剂中，则会有一定的风险。

国内外尚无注射级乳糖的法定标准，国外肺部给药吸入级乳糖的残留蛋白氮含量规定为32ppm，国家食品药品监督管理局在《新药用辅料非临床安全性评价指导原则》中将注射用辅料与肺部给药辅料的安全性归为一类，故本次抽验注射级乳糖残留蛋白氮含量限量定为32ppm,按此标准，39批样品中有14批不合格，不合格率为36%，值得关注的是并不是所有国外产品的残留蛋白氮含量都合格，提示企业不能完全迷信国外产品的质量，如果乳糖是用于注射，买回原料后，企业应先提纯降低残留蛋白后再使用。第10页，课件共49页，创作于2023年2月部分容易引起过敏反应的药用辅料目录第11页，课件共49页，创作于2023年2月2、注射用药用辅料中的溶血性杂质——卵磷脂（溶血磷脂）

磷脂主要是从大豆和蛋黄中提取出来的，是一种混合物，其主要成分为磷脂酰胆碱，同时含有磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、鞘磷脂等磷脂成分，目前药用磷脂主要为大豆磷脂、蛋黄卵磷脂，磷脂一个重要的用途是制备注射用乳剂和脂质体等。PCPELPELPCSPM其他PI第12页，课件共49页，创作于2023年2月注射用药用辅料中的溶血性杂质——卵磷脂（溶血磷脂）磷脂酰胆碱Phosphatidylcholine(PC)磷脂酰乙醇胺Phosphatidylethanolamine(PE)溶血磷脂酰胆碱Lysophosphatidylcholine(LPC)溶血磷脂酰乙醇胺Lysophosphatidylethanolamine(LPE)失去一个脂肪酸链(R2)失去一个脂肪酸链(R2)第13页，课件共49页，创作于2023年2月注射用药用辅料中的溶血性杂质——卵磷脂（溶血磷脂）普通磷脂如磷脂酰胆碱（PC)溶血磷脂如溶血磷脂酰胆碱（LPC)棘皮红细胞显微镜图棘皮细胞与含有两个脂肪酸酸链的具有高度亲脂性的普通磷脂相比，溶血磷脂的亲脂性和亲水性是平衡的，这使得溶血磷脂加速了细胞膜与胞浆间交换的速度。低浓度时溶血磷脂就会让红细胞的形状发生改变，形成棘皮细胞。当其浓度为2×10-4M时溶血磷脂就能使细胞膜溶解。第14页，课件共49页，创作于2023年2月注射用药用辅料中的溶血性杂质——卵磷脂（溶血磷脂）KetanHippalgaonkaret.al.,AAPSPharmSciTech,(2010)磷脂生产过程中水解生成LPC/LPE；在乳剂灭菌过程中磷脂水解而生成LPC/LPE15第15页，课件共49页，创作于2023年2月注射用药用辅料中的溶血性杂质——卵磷脂（溶血磷脂）ChristophWabel(1998),Ph.D.thesis经检验，18批样品中共有4批卵磷脂不符合规定，溶血磷脂酰乙醇胺的不合格率为85%第16页，课件共49页，创作于2023年2月注射用药用辅料中的溶血性杂质——卵磷脂（溶血磷脂）ChristophWabel(1998),Ph.D.thesis经检验，18批样品中共有4批卵磷脂不符合规定，溶血磷脂酰乙醇胺的不合格率为85%第17页，课件共49页，创作于2023年2月

二甘醇丙二醇2006年中国发生“齐二药事件”齐齐哈尔第二制药有限公司购入实为二甘醇的“假冒丙二醇”，制备“亮菌甲素注射液”，导致十余人死亡。3、注射剂生产企业错用药用辅料第18页，课件共49页，创作于2023年2月色谱条件：极性弹性石英毛细管柱，固定液为聚乙二醇(PEG-20M)；初始温度为50℃，保持5分钟；以每分钟5℃的速度升至220℃。进样口温度为220℃，检测器温度为250℃。1.异丙醇；2.正丙醇；3.二甲基甲酰胺；4.乳酸乙酯；5.二甲基乙酰胺；6.二甲基亚砜；7.1,2-丙二醇；8.1,3-丁二醇；9.1,3-丙二醇；10.苯甲醇；11.二甘醇；12.肉豆寇酸异丙酯；13.三乙酸甘油酯；14.甘油；15.油酸乙酯；16.苯甲酸苄酯国家药典委员会发布了“注射剂中16种常用辅料及相关杂质测定方法”丙二醇二甘醇2、注射剂生产企业错用药用辅料第19页，课件共49页，创作于2023年2月4、注射用药用辅料特殊毒性苯甲醇：常用作注射剂的溶媒、防腐剂和止痛剂。毒副作用：易引起婴儿的脑室内出血，溶血、低血压、局部刺激和臀肌挛缩症等。1、含有苯甲醇的注射液,必须在说明书上明确标注“本品含苯甲醇,禁止用于儿童肌肉注射”;2、并要求凡使用苯甲醇作为溶媒的注射剂,其说明书必须明确标注“本品使用苯甲醇作为溶媒,禁止用于儿童肌肉注射”。苯甲醇第20页，课件共49页，创作于2023年2月3、注射用药用辅料特殊毒性（其它醇类药用辅料注射用后的毒副反应）第21页，课件共49页，创作于2023年2月中国药用辅料行业现状2011年行业领先的十家企业的市场占有率只有15.20%药用辅料生产企业管理制度无证生产010302鱼龙混杂；散、小、乱、差持有药品生产许可证和具有批准文号的药用辅料生产企业不多.我国药用辅料管理制度还不健全第22页，课件共49页，创作于2023年2月中国注射用药用辅料行业现状注射用药用辅料生产企业自主提高质量的主动性不强，必须通过注射用药用辅料标准引导企业提高产品质量。第23页，课件共49页，创作于2023年2月三、符合注射用要求的药用辅料药典标准较少11132015版2010版2005版2000版1995版1990版甘油（供注射用）甘油（供注射用）PLGA（注射级）PEG系列（注射级）大豆磷脂（注射级）蛋黄卵磷脂（注射级）活性炭（注射级）丙二醇（注射级）氯化钠（注射级）……第24页，课件共49页，创作于2023年2月辅料名称结构式分子式[CAS]号来源与制法性状鉴别检查含量类别储藏细菌内毒素（热原）、无菌降压物质或升压物质溶血或凝集刺激性物质检查过敏性物质异常毒性…………

注射级药用辅料标准中应关注的项目药用辅料检验项目三、注射用药用辅料药典标准第25页，课件共49页，创作于2023年2月吐温80（注射用标准） 2010版药典比2005版药典增加了过氧化值、砷盐、环氧乙烷、二氧六环检测项目，有10批次环氧乙烷超标，7批次样品的过氧化值不合格，2个批次的二氧六环不合格。21批中有11批不合格。具体结果见下表：应抽27批/实抽21批第26页，课件共49页，创作于2023年2月吐温80（注射用标准）吐温系列表面活性剂定义和结构式吐温名称R

吐温20月桂酸吐温40棕榈酸吐温60硬脂酸吐温80油酸药用辅料手册第四版（郑俊民译）第27页，课件共49页，创作于2023年2月吐温80（注射用标准）吐温-60（文献报道HLB值14.9）吐温-80文献报道HLB值15.0吐温-20（文献报道HLB值16.7）吐温-40（文献报道HLB值15.6）月桂酸棕榈酸油酸（双键）硬脂酸不同的脂肪酸链的长度对不同型号的吐温亲水亲油平衡值有影响，脂肪酸链长则亲酯性强,亲水亲油平衡值（HLB)值低。第28页，课件共49页，创作于2023年2月序号样品批号厂家

2010版药典与2005版不同的项目过氧化值≤10砷盐≤2ppm环氧乙烷≤1ppm二氧六环≤10ppm120091108LY符合规定符合规定符合规定符合规定220091207符合规定符合规定符合规定符合规定320100305符合规定符合规定符合规定符合规定420100305EL符合规定符合规定符合规定符合规定520100406符合规定符合规定符合规定符合规定620100504符合规定符合规定符合规定符合规定7100412MSN11符合规定符合规定符合规定8100413M符合规定符合规定符合规定符合规定9100414M符合规定符合规定1.3符合规定1020100402QM69(7倍)符合规定符合规定符合规定112010050115符合规定符合规定符合规定1220100403GH符合规定符合规定3.4(3倍)11.01320100404符合规定符合规定2.0(2倍)12.41420100405符合规定符合规定2.8(3倍)符合规定1520100402EK62(6倍)符合规定符合规定符合规定162010040359(6倍)符合规定符合规定符合规定172010040461(6倍)符合规定符合规定符合规定18FL100311010AK68(6倍)符合规定符合规定符合规定按照2010版药典标准检验结果

不合格率为62%，不合格项目包括：过氧化值（7批）、环氧乙烷（4批）、二氧六环（2批）、酸值（1批）、粘度（1批）共有11批样品不合格吐温80（注射用标准）第29页，课件共49页，创作于2023年2月Q1.残留溶剂第30页，课件共49页，创作于2023年2月Q2.紫外吸收结论：

国内吐温80老工艺产品在234nm波长处有较强的吸收，而进口、新工艺产品在234nm没有吸收峰。

而此处的吸收峰也并非原料油酸、山梨醇、双氧水、乙二醇、二甘醇或双氧水氧化原料而得，故认为此峰可能是老工艺的副产物峰或原料中的杂质。234nm日本NOF新工艺老工艺第31页，课件共49页，创作于2023年2月Q3.分子量分布第32页，课件共49页，创作于2023年2月Q4.脂肪酸组成第33页，课件共49页，创作于2023年2月Q4.脂肪酸组成——注射级产品数据批号厂家脂肪酸组成（2015版药典注射级聚山梨酯80公示稿标准）肉豆蔻酸酸≤0.5%棕榈酸≤0.5%棕榈油酸≤0.5%硬脂酸≤0.5%油酸≥98.0%亚油酸≤0.5%亚麻酸≤0.5%20140501南京威尔0.10.30.10.199.10.2未检出201406010.10.30.10.199.10.2未检出201406020.10.30.1099.20.2未检出309363日本NOF0.10.30.20.199.10.2未检出20141114

辽宁奥克未检出0.2未检出0.199.0未检出未检出国产注射级聚山梨酯80能够达到2015版药典公示稿的要求。根据药典委员会《关于聚山梨酯80（供注射用）质量标准起草情况说明的复函》（国药典综发[2014]351号，对三个厂家的5批注射级样品进行了检测

。第34页，课件共49页，创作于2023年2月与安全性密切相关的质量问题杂质质量纯度厂家非法添加过氧化氢吐温80本身成分复杂过氧化氢含量测定组分分离，并确证结构第35页，课件共49页，创作于2023年2月过氧化氢含量测定过氧化氢滴定方法硫酸铈法间接碘量法高锰酸钾法滴定终点颜色显示不明显碘淀粉第36页，课件共49页，创作于2023年2月过氧化氢含量测定A50mL水+样品37℃水浴5分钟加入3mol·L-1硫酸溶液30mL加入邻二氮菲指示液200uL硫酸铈滴定液（0.001mol·L-1）滴定测定聚山梨酯80中过氧化氢+其他还原性物质B50mL水+样品+0.1%过氧化氢酶1mL37℃水浴5分钟加入3mol·L-1硫酸溶液30mL加入邻二氮菲指示液200uL硫酸铈滴定液（0.001mol·L-1）滴定测定除去过氧化氢后聚山梨酯80中其他还原性物质第37页，课件共49页，创作于2023年2月过氧化氢含量测定结果第38页，课件共49页，创作于2023年2月组分分离及结构确证x+y+z+w=20图1-1聚山梨酯80理论结构式

组分复杂性：①母核差异（山梨醇酐、异山梨醇酐）②脂肪酸种类差异（油酸、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸等）③油酸酯化程度差异（单、二、三、四酯）④环氧乙烷聚合度差异第39页，课件共49页，创作于2023年2月组分分离及结构确证改进液相条件文献报道方法：进一步分析方法：吐温80色谱条件：色谱柱：AgilentSB-C8(250x4.6mm,5um)；

流动相A：2%甲酸水；流动相B：2%甲酸异丙醇ACBDEFG色谱柱：AiglentEclipseXDB-C18（4.6x150mm，5μm）；柱温：30℃；流速：1mL/min；进样体积：20μL；检测器：Alltech蒸发光散射检测器，Impactor“off”模式，漂移管温度：100℃，N2流速1.0L/min；流动相：A=甲醇B=四氢呋喃；梯度洗脱：0~4.9min:100%B过渡到90%B;5.0~18.9min:90%B过渡到20%B;19~19.1:20%B过渡到100%B。药用辅料手册：山梨醇与约20摩尔环氧乙烷共聚而成的混合物：①母核差异（山梨醇酐、异山梨醇酐）②油酸酯化程度差异（单、二、三、四酯）③环氧乙烷聚合度差异。第40页，课件共49页，创作于2023年2月组分分离及结构确证聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯PSM第41页，课件共49页，创作于2023年2月组分分离及结构确证色谱峰编号组分数峰归属A1聚氧乙烯山梨醇酐PS2聚氧乙烯异山梨醇酐PI3聚乙二醇PEGB4聚氧乙烯山梨醇酐一油酸酯PSMC5聚氧乙烯异山梨醇酐一油酸酯PIMD6聚氧乙烯山梨醇酐二油酸酯PSDE7聚氧乙烯异山梨醇酐二油酸酯PIDF8聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯PSTriG9聚氧乙烯山梨醇酐四油酸酯PSTetraACBDEFG杂质峰未酯化的极性成分不同母核和酯化程度的油酸酯第42页，课件共49页，创作于2023年2月组分分离及结构确证组分名称分子式环氧乙烷聚合度/n组分个数聚氧乙烯山梨醇酐（PS）C6H12O5(OC2H4)n19～3012聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯（PSM）C24H44O6(OC2H4)n15～3319聚氧乙烯山梨醇酐二油酸酯（PSD）C42H76O7(OC2H4)n11～3525聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯（PSTri）C60H108O8(OC2H4)n17～3519聚氧乙烯山梨醇酐四油酸酯（PSTetra）C78H140O9(OC2H4)n28～358聚氧乙烯异山梨醇酐（PI）C6H10O4(OC2H4)n11～2515聚氧乙烯异山梨醇酐单油酸酯（PIM）C24H42O5(OC2H4)n5～2723聚氧乙烯异山梨醇酐二油酸酯（PID）C42H74O6(OC2H4)n6～2520聚乙二醇（PEG）H(OCH2CH2)nOH5～18149类组分的155个物质第43页，课件共49页，创作于2023年2月组分分离及结构确证聚山梨酯80组分结构聚氧乙烯山梨醇酐一油酸酯，（PSM）聚氧乙烯山梨醇酐二油酸酯（PSD）聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯（PSTri）聚氧乙烯山梨醇酐四油酸酯（PSTetra）聚氧乙烯山梨醇酐（PS）聚氧乙烯异山梨醇酐（PI）聚氧乙烯异山梨醇酐一油酸酯（PIM）聚氧乙烯异山梨醇酐二油酸酯（PID）聚乙二醇（PEG）H(OCH2CH2)nOH聚山梨酯80的功能性（即有效性）——亲水亲油性X+Y+Z+W=20第44页，课件共49页，创作于2023年2月斑马鱼模型急性毒性考察编号厂家类型批号致死率/%1国产WE供注射用2012102326.72国产WE供注射用2013070110.03国外NOF注射级807367E30.04国外NOF注射级90636526.75国外SEPPIC普通L0801356.76国外SEPPIC普通L1031336.77国产EK普通2010040490.08国产QM普通2010050193.39国产SY普通100414M46.610国产WE普通2013010140.0第45页，课件共49页，创作于2023年2月Beagle犬急性毒性试验厂家批号采用工艺Beagle犬静脉注射吐温80后的过敏反应症状Beagle犬静脉注射30min后血液中组胺浓度升高值（nM）A20100404旧工艺高65.11±20.14B20100501旧工艺高39.87±31.