提取分离色谱法

提取分离色谱法第1页，课件共27页，创作于2023年2月4、用结晶法纯化固体物质时，所选择的溶剂应该是对欲纯化成分热时溶解度___,冷时溶解度___,而对杂质的溶解度冷热都___或都____。5、分馏法是利用混合物中各成分的____差异进行分离的，适用于分离_____混合物。6、在浓缩的水提液中加入一定量乙醇，不能除去的成分是（）A．淀粉B．树胶C．黏液质D．蛋白质E．树脂7、结晶法的原理是（）A．相似相溶B．溶解度差异C．分配系数差异D．温度差异E．极性差异第2页，课件共27页，创作于2023年2月第一章总论第三节色谱法第3页，课件共27页，创作于2023年2月1、简述色谱法的作用，试说出其分类形式。2、记忆色谱法中常用的术语

(相、固定相、流动相、支持剂)。3、熟悉薄层吸附色谱的原理和色谱条件。4、讨论、分析、记忆吸附强度与被分离成分的极性之间的相互关系。5、熟记常见官能团的极性大小顺序

【课堂目标】：第4页，课件共27页，创作于2023年2月1.色谱法常用术语：相，固定相，流动相，支持剂

2．色谱法的分类

3．吸附色谱法的原理及色谱条件的选择4．常见官能团极性大小顺序【教学重点】：【教学难点】：1.色谱法常用术语：相，固定相，流动相，支持剂

2．吸附色谱法的原理及色谱条件的选择

第5页，课件共27页，创作于2023年2月碳酸钙（固定相）

色素混合液

石油醚

(流动相）1906年，Tsweet

发现色谱分离现象

色谱柱色带色谱的起源第6页，课件共27页，创作于2023年2月植物色素分离图示

第7页，课件共27页，创作于2023年2月色谱法的发展1、历史30年代茨维特分离绿叶色素，产生固液吸附色谱40年代液—液分配色谱法、TLC、纸色谱50年代GC出现使色谱具备分离和在线分析功能60年代推出了色谱－质谱联用技术（GC-MS）

70年代HPLC出现使色谱分析范围进一步扩大80年代出现了超临界流体色谱法、毛细管电泳法90年代崛起的电色谱法，兼有毛细管电泳法与微微填充柱色谱法的优点21世纪色谱科学将在生命科学等的前沿发挥他不可替代的重要作用

第8页，课件共27页，创作于2023年2月（一）色谱法的定义定义：色谱法(chromatography)，是一种物理或物理化学的分离分析方法。原理：利用物质在固定相和流动相中的亲和力不同，使混合物中的各组分分离。对比：以前学过的分离方法有：

1.

沉淀法是利用物质溶解度的不同而进行分离。

2.蒸馏法是利用有机物沸点的差异进行分离。

3.萃取法

是利用组分在水相和有机相（互不相溶）中的分配素数不同进行而分离。

7.色谱法（层析法、色离法）第9页，课件共27页，创作于2023年2月色谱法基本术语1、相：一种均匀的体系气相水相油相油水2、固定相：固定在支持物（剂）上的体系3、流动相：一种与固定相互不相溶的气体或液体。4、支持剂（担体）：用于固定固体相，而其自身不参与色谱行为的化学物质。氧化铝第10页，课件共27页，创作于2023年2月（二）色谱分离技术的应用1、分离混合物：适用于分离结构相近、性质相似的复杂化合物2、定量分离：可用于检测混合物中各成分的含量3、鉴定化合物：适于纯物质的鉴定第11页，课件共27页，创作于2023年2月（三）色谱法的用途

用途：色谱法已广泛用于各个领域，是多组分混合物首选的分离分析方法。以《中国药典》2005版为例，一部收载中药1146个品种，用薄层色谱进行鉴别或含量测定的有1523项，用高效液相色谱进行定量分析的有479种518项，用气相色谱进行检测的有47种。二部收载的有1967，采用高效液相色谱法的品种有848，现在色谱法已形成一门专门的科学。第12页，课件共27页，创作于2023年2月（四）色谱法的分类

1．按两相分子的聚集状态分类流动相固定相类型液相色谱液体固体液-固色谱

液体液体液-液色谱

气体固体气-固色谱

气体液体气-液色谱

气相色谱超临界流体色谱法——流动相为超临界流体第13页，课件共27页，创作于2023年2月2．按固定相的固定方式分类3．按分离机制分类平面色谱

纸色谱薄层色谱高分子薄膜色谱柱色谱

填充柱色谱毛细管柱色谱

分配色谱吸附色谱离子交换色谱空间排阻色谱毛细管电咏法

毛细管电色谱法

毛细管电泳第14页，课件共27页，创作于2023年2月一、吸附色谱法吸附力类型：主要物体表面作用力、氢键、络合、静电引力、范德华力等（一）基本原理：水以各种固体吸附剂为固定相，利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及流动相对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。纸屑、瓜子壳砖头、石块第15页，课件共27页，创作于2023年2月吸附强度决定于吸附剂的吸附能力，还受被吸附成分的性质影响，更与流动相的性质有关结论：吸附色谱的色谱条件固定相：吸附剂流动相：展开剂被分离组分：第16页，课件共27页，创作于2023年2月1、吸附剂种类：活度：分五级（Ⅰ～Ⅴ）强～弱一般：Ⅱ或Ⅲ选择原则：颗粒要细；有适宜的吸附力；不与成分反应活性级别

硅胶含水量%

氧化铝含水量

I

0

0

II

5

3

III

15

6

IV

25

10

V

38

15

①有机类淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纤维素等

②无机类氧化铝、硅胶、活性炭、碳酸钙、硅藻土等

第17页，课件共27页，创作于2023年2月概念：活化：一定条件下，加热吸附剂除去其中的水分，使其吸附力增强的过程。脱活化：常用吸附剂硅胶：适用于中性和酸性成分分离氧化铝：商品氧化铝分三种规格活性炭：非极性吸附剂聚酰胺：高分子聚合物极性吸附剂第18页，课件共27页，创作于2023年2月硅胶（SiO2·H2O）结构：内部——硅氧交联结构→多孔结构表面——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心

特性：

1）与极性物质或不饱和化合物形成氢键物质极性↑，吸附能力↑→强极性吸附中心，不易洗脱吸附活性次序：活泼型>束缚型>游离型

2）吸水→失活→105～110OC烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大→500OC烘干(不可逆失水)→活性丧失，无吸附力适用：适合酸性或中性物质

第19页，课件共27页，创作于2023年2月氧化铝类型

制法

PH

适用化合物

分离实例

碱性氧化铝

氢氧化铝脱水

9-10

碱性成分

中性成分

生物碱

甾醇

中性氧化铝

碱性氧化铝水洗至中性

7.5

中性成分

酸碱不稳定成分

醛、酮、萜

生物碱、皂苷

酸性氧化铝

工业氧化铝用酸、水洗涤

4-4.5

酸性成分

中性耐酸成分

有机酸

酸性氨基酸

商品氧化铝吸附剂分类及性能第20页，课件共27页，创作于2023年2月活性炭典型的非极性吸附剂，对非极性物质具有较强的亲和能力，在水溶液中的吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。溶剂的极性越小，活性炭的吸附力就小，成分越容易被洗脱活性炭吸附能力强弱芳香族化合物>脂肪族化合物大分子化合物>小分子化合物第21页，课件共27页，创作于2023年2月聚酰胺A:聚酰胺材料简介：聚酰胺是由酰胺聚合而成的一类高分子物质，聚酰胺又称锦纶、尼龙、种类繁多。色谱常用的为锦纶－6和锦纶－66。其单体物质是已内酰胺、已二胺和已二酸。分子中的酰胺键是其结构的重要部分。酰胺键也是与其它极性键基团产生氢键的物质基础。B:分离原理：氢键吸附原理

C:与聚酰胺可以形成氢键的基团：酚羟基、羰基、羧基第22页，课件共27页，创作于2023年2月聚酰胺吸附原理示意图第23页，课件共27页，创作于2023年2月（低沸点有机溶剂或混合溶剂系统）★注意：流动相的极性必须与分离组分的极性一致(1)常用溶剂：氯仿、乙醚、石油醚或B.A.W溶剂系统（BuOH:HAC:Water)(4:1:5)(2)流动相的选择用硅胶或氧化铝作色谱分离时，如被测成分极性较大，用活性较低的吸附剂，极性较大的冲洗剂；被测成分极性较小，选用活性较强的吸附剂，极性较小的冲洗剂

2.流动相：第24页，课件共27页，创作于2023年2月（3）常用溶剂的极性

石油醚<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯<甲苯<二氯甲烷<乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水

第25页，课件共27页，创作于2023年2月3、被分离组分的性质（主要因素）影响化合物极性的因素：

化合物分子母核大小（碳数多少）：

分子大、碳数多，极性小；分子小、碳数少，极性大。(2)取代基极性大小：在化合物母核相同或相近情况下，化合物极性大小主要取决于取代基极性大小。酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷。分离组分的极性越大，吸附力越强第26页，课件共27页，创作于2023年2月常见官能团的吸附能力