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文档简介
1.检验目的指导脑脊液CSF常规测定。2.方法原理2.1脑脊液是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。由于脉络丛上皮细胞对血浆中各种物质的选择性分泌和超滤作用,血浆中各种成分对血脑屏障的通透性各有不同。其中最易通过血脑屏障的是氯、钠、镁离子及乙;其次为清蛋白、葡萄糖、钙离子、乳酸、氨基酸、尿素和肌;纤维蛋白原、补体、抗体、某些药物、胆红素、胆固醇则极难或不能通过。中枢神经系统任何部位发生器质性病变时,如感染、炎症、肿瘤、外伤、水肿和阻塞等都可以引起脑脊液成分的改变。通过对脑脊液理学检查,显微镜检查、化学和免疫学检查及脑脊液病原学检查,可对疾病的诊断、治疗和预后判断提供依据。2.2脑脊液(CSF)常规测定容包括:颜色、性状、有核细胞计数、红细胞计数、氏试验、细菌等。2.3氏(pandys)试验:CSF中的球蛋白与苯酚结合,形成不溶性的蛋白盐而产生白色混浊或沉淀。3.方法性数如性出、量间确度准性密、敏特1 颜色COLOR)2 透明度(clearity)3 凝固性(coagulabilit)
6 中性粒细胞NE)7 淋巴细胞LY)8 单核细胞MO)4 脑脊液有核细胞计(CSF—NUCL) 9 氏试验(pandystes)5 脑脊液红细胞计数CSF—RBC)4.标本类型4.1标本类型:新鲜CS。4.2标本拒收条件:拒收延迟室温2h、冷藏6h未送达标本。4.3标本保存与稳定性:一般室温1h完成检验,久置可致细胞破坏,影响细胞计数及分类检查。5.要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统5.1标本容器BD无促凝成分红头管或洁净干燥带盖玻璃管。5.2试剂5.2.1试剂组分:生理盐水白细胞稀释液氏快速瑞氏染色液
0.9%Nacl溶液1冰乙酸1ml分析纯冰醋+蒸馏水至100ml)A液:曙红、甲醇B液:亚甲蓝氏试剂 10苯酚溶液(纯苯酚10ml蒸馏水至100m)5.2.2试剂存储和有效期:试剂名称生理盐水冰乙酸1%乙酸10%苯酚溶液氏快速瑞氏染色液
存储条件有效期室温 1年室温 2年冷藏 1年室温 1年室温 2年
开瓶有效期位置1年 存货柜/血常规室操作台1年 药品柜1年 试剂冰箱1年 药品柜6个月 药品柜/染色操作台5.3仪器:OLYMPUS光学显微镜,血细胞计数板。6.校准程序(计量学溯源性)不适用7.质量控制,控制品使用水平和频率,允许限的纠正措施不适用8.程序步骤8.1一般性状检查轻轻混匀CSF观察量颜色有凝和明(一般细胞数≥300μl个时或蛋白增加可产生混浊,并记录。8.2显微镜检查8.2.1细胞计数(无凝块标本)(1)清或微混标本:a)b)c)
混匀后直接冲入计数池,计数四角四大方格细胞总数(包括RC,NUC。用细稀液作1:1稀释,有细数红细胞数=细胞总数-有核细胞数(当白细胞数≥30个/μl时,在白细胞计数池中直接分类至少50个白细胞)(2)混浊及以上标本:观 释色/浊 0色/浊 0高/浊0
量 液/剂0μl 0μl0μl 0μl0μl 0μl;)解RBC:试,;冲池;计数d红细胞细胞总数-有核细胞数8.2.2有凝块或粘稠标本:(1)用吸管旋转并挤压凝块,挤出里面的液体及细胞。离,分上清液沉渣。(3)混匀沉,涂,用倍镜察NUL、RC。(4)报倍野细核数。8.3的CSF离心,吸出上清液于另一试管,并在试管上编号。8.2.4当NUCL>06/μl细分0个L示报。3验1入%约l管滴F。2。。阳性(+:灰白色云雾状。(2+:白色浑浊。(3+):白色浓絮状沉淀。(4+:白色凝块。9.计算结果原理9.1颜色9.1.1红色:常见于穿刺损伤或出血性病变。为区别蛛网膜下腔出血和穿刺损伤应注意:(1出过4沉。(2看。2性。3。4。5绿色可绿单、链、球起膜高红素和脑。9.2透度混细关中过3010/L现。9.3凝性:核性膜炎静置12-24小时后,标本表面有纤细的网膜形成。蛛网膜下腔梗阻时,可产生黄色胶冻状。9.4氏试验:有脑组织和脑脊髓膜疾患时常成阳性反应如化脓性脑脊髓膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰质炎、流行性脑炎等。脑出血时多呈阳性反应,如外伤性血液混入脑脊液中,亦呈阳性反应。9.5细胞分类:9.5.1中枢经统变的CSF,胞增其的及胞类变的性有。9.5.2中枢神经系统病毒感染、结核性或霉菌性脑脊髓膜炎时,细胞数可中度增加,常以淋巴细胞为主。9.5.3细菌感染(化脓脑脊髓炎,胞数显增加,中性粒胞为主。9.5.4寄生虫病,可见较的嗜酸性细胞。9.5.4脑室或蛛膜下腔出时,脑脊可见多数细胞。10.生物参考区间颜色COLOR) 无色 透 明 度透明(clearity)凝固(coagulabilit)无凝块 氏试验(pads阴性OR弱阳性tst)有细计数 成(0-8)×06/L中性粒(NE)成人(0-6%)(CF—NUC) 儿(0-15)×06/L新生儿0-%)新生(0-3106/L淋巴细胞LY) 成人40-80) 单核细胞MO)成人(15-45)新生儿5-35) 新生儿50-90)红细胞计数CS—RBC)010/L(常脊中细主淋细、核胞之为7:3,可细胞。11.警告值、危急值(适用时)12.检验结果可报告区间13.对超出可报告围的结果的处理13.1如检到细菌时应议培养认。13.2有不能分类细胞应示上级管另行描报告如脑膜白血病或肿瘤细胞。14.实验室解释15.安全防护措施15.1所有样品按具有潜在传染性的标本处理。15.2测定后液试于20mL有效浸泡4入入。3原存48小时上黄疗,签,
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