中考生物总复习重点精品课件微生物的实验室培养

到目前为止，几十项诺贝尔生理或医学奖，化学奖都与微生物学有关微生物的类群原生生物：原核生物:真菌:病毒如酵母菌单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等无细胞结构：真核细胞细菌、蓝藻原核细胞有细胞结构课题1微生物的实验室培养专题2微生物的培养与应用1.提供营养和条件2.防止污染一.培养基：微生物生存的环境和营养物质1.基本成分：思考：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水、无机盐⑴碳源无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物⑵氮源无机氮源：有机氮源：NH4＋、NO3-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的：碳源、氮源、能源。一.培养基：微生物生存的环境和营养物质2.特殊营养：维生素（如乳酸杆菌）、碱基等（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）3.pH、氧气的需求：霉菌（pH调至酸性）细菌（pH调至中性或微碱性）厌氧生物需提供无氧条件。一.培养基：微生物生存的环境和营养物质4.培养基种类固体培养基液体培养基有无凝固剂琼脂分离鉴定工业生产化学成分：物理性质：天然培养基合成培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O定容至1000mlNaCl5g蛋白胨10g牛肉膏5g琼脂20.0g5.配制原则⑴目的明确：⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当⑶适宜的pH值：有机碳源异养型：根据微生物的种类、培养目的选择原料自养型：不加碳源加入缓冲剂细菌偏碱，真菌偏酸（CO2碳源）生产科研耐高温需保持干燥的物品，160～170℃1～2小时接种环、接种针等金属用具70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒灭菌定义方法较为温和理化方法，杀死部分有害菌体（不包括芽孢、孢子）强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂紫外线灼烧灭菌干热灭菌酒精、氯气、石炭酸等高压蒸汽灭菌培养基，100KPa、121℃、15～30min二.无菌技术：防止外来杂菌的污染1.消毒与灭菌：请你帽判断眼以下芽材料外或用朝具是祸否需罩要消培毒或胳灭菌率。如水果需迟要，故请选雪择合捐适的别方法尼。（1）膛培养乏细菌额用的尊培养专基与遗培养竹皿（2）形玻棒货、试慈管、玩烧瓶泻和吸暗管（3）卵实验尾操作奋者的烘双手思考2.无菌葱范围由：实验割操作粒空间除消毒操作汽者的让手、益衣着生消毒实验匪用具基灭菌实验货操作服过程二.无菌技术：防止外来杂菌的污染1.消毒与灭菌：酒精祝灯旁渔操作超净工作台单个或少幸数菌火体2.特征气：大小口、形锦状、食光泽谈度、颜色碗、透蔑明度柿等。3.功能昂：1.定义额：三.菌落鉴定哭菌种的重杂要依截据固体培养能基上大量栽繁殖子细尾胞群袋体1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O定容至1000mlNaCl5g蛋白胨10g牛肉膏5g琼脂20.0g四.大肠博杆菌狡的纯赶化培搂养：㈠制备腔牛肉鉴膏蛋卧白胨恋固体安培养骡基1.计算难：培养尤基用换量依配贵方计颠算各犯成分砍的用安量2.称量梯：3.溶化辫：牛肉腊膏黏虚稠，咱用称嘴量纸担称取牛肉骡膏、装蛋白素胨易俯吸潮丛，要跌快、圈加盖牛肉肯膏、梨称量绕纸巨、少沈量水捎加热毙溶解→取兄纸→蛋折白胨群、Na赔Cl→琼象脂→补冲水定和容4.调pH、分装冬、封腾口：5.灭菌摇：6.倒平狠板：培养嗽基、团培养境皿分散课成单译个细泼胞,形成剖单个浸菌落倒平垄板约5游0℃防止么皿盖犯上的樱水珠杨落入下培养孤基，续造成测污染灼烧屠灭菌匀，防止过瓶口甘的微速生物沫污染贼培养嫂基二.大肠增杆菌邻的纯敌化培严养：㈠制备席牛肉璃膏蛋浸白胨仓固体中培养俗基㈡纯晃化大搁肠杆其菌：⑴平帮板划粪线法唯：菌种划3个平板1个不划雪线1.接种岛：接种彻环防止址划破脆培养福基（重精复实桥验）（空随白对肃照）问题搏讨论为什伟么在蕉操作森的第琴一步璃以及谜每次页划线凭之前离都要裁灼烧穿接种貌环？蕉在划院线操罩作结损束时歇，仍倡然需灯要灼椅烧接崭种环私吗？仓为什粮么？操作简的第揭一步讽灼烧袭接种详环是呈为了炕避免挎接种奴环上铲可能足存在荷的微平生物旗污染识培养掀物杀死绢上次中残留谢的菌疏种，理保证漠使下阵一次晋划线段时，肉菌种柿直接唇来源圣于上融次划列线的林末端班，从慎而通继过划盯线次仍数的弟增加减，使尾每次反划线盆时菌伞种的池数目钞逐渐演减少担，以拦便得国到菌笼落。及时须杀死态接种终环上诵残留歼的菌捏种，久避免绪细菌疾污染壁环境毛和感基染操墓作者房诚。6支试管，分别加入9ml无菌水1ml1011ml1021ml1031ml1041ml1051ml106⑵稀庸释涂割布平豪板法：a.梯度赴稀释追菌液：菌液微量移液器⑵稀顶释涂件布平填板法：a.梯度已稀释消菌液：b.涂布灾平板：不超贸过0.曲1m淘l各梯度浙分别厚涂布3个平惧板1个不涂叶布作芽空白庆对照滴灼试涂稀释103倍稀释104倍稀释105倍⑴平拼板划灭线法争：二.大肠杆菌的纯化培养：㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡纯化大肠杆菌：1.接种：⑵稀法释涂桃布平哥板法：2.培养苗：将接种姿后的培奥养基检和一腹个未接雨种的培阵养基放入37沟℃恒温睁箱中委培养12避h～24劈燕h后，观察恭并记课录三.菌种含的保排藏：1.临时宁保藏增：试管晋固体蒸斜面掌培养税基上4℃2.长期欠保存森：菌种铜易被须污染跟、