母种培养基的制作

母种培养基的制作德化鹏祥中学本文档共15页；当前第1页；编辑于星期二\2点30分食用菌栽培本文档共15页；当前第2页；编辑于星期二\2点30分食用菌栽培食用菌在分类上属于真菌。食用菌靠不断生长着的菌丝体，从它们着生的基质中吸收营养，当积累了足够的养分，达到生理成熟后形成形形色色的子实体（也称菇体）。食用菌的可食用部分绝大多数是子实体。本文档共15页；当前第3页；编辑于星期二\2点30分食用菌栽培食用菌不仅味美，而且营养丰富，富含蛋白质、多种维生素和大量糖类。本文档共15页；当前第4页；编辑于星期二\2点30分食用菌栽培菌种，即食用菌生产中的“种子”。优良菌种的制备是食用菌栽培中极其重要的环节。本文档共15页；当前第5页；编辑于星期二\2点30分食用菌栽培食用菌菌种的制备一般需要经过母种、原种和栽培种三个培养步骤。菌种母种原种栽培种又称一级种、试管种、斜面种二级种、瓶装种三级种、袋装种、生产种培养容器试管菌种瓶塑料袋、菌种瓶培养基固体（斜面）固体（或液体）固体本文档共15页；当前第6页；编辑于星期二\2点30分第一单元：母种培养基的制作母种，即由组织分离（由食用菌实体的组织直接分离菌种的方法）或孢子分离（将食用菌的孢子接种在培养基上，让其萌发成菌丝而获得菌种的方法）等方法获得的菌丝体，又称一级菌种，由于菌丝生长在试管的斜面培养基上，因此又称试管种或斜面种。生产上的母种实际上是再生母种。母种既可繁殖原种，又适用于菌种保藏。本文档共15页；当前第7页；编辑于星期二\2点30分第一单元：母种培养基的制作培养基是用人工方法配置的、供食用菌生长繁殖所需营养的基质。母种培养基，是专门用来培养母种的营养基质，一般用试管作容器，故又称试管斜面培养基，常用于菌种分离、提纯及转管、保存菌种。母种试管斜面培养基本文档共15页；当前第8页；编辑于星期二\2点30分母种斜面培养基的制作按200mL水的比例称取各种材料，配制16支试管培养基，以备制种用。一、母种培养基（常用的马铃薯葡萄糖培养基）配方：马铃薯200g、琼脂18~22g、葡萄糖或白糖20g、水1000mL。琼脂是由麒麟菜、石花菜或江篱（属红藻）经加热至溶化后，加以冷却凝固而成的海藻精华。琼脂含有丰富的膳食纤维（含量为80.9%），蛋白质含量高，热量低，具有排毒养颜、泻火、润肠、降血压、降血糖和防癌作用。本文档共15页；当前第9页；编辑于星期二\2点30分母种斜面培养基的制作二、实验用具：天平1台、小刀1把、搪瓷量杯2个、铝锅1个、电炉1个、玻璃分液漏斗1个、试管16支、试管架1个、高压灭菌锅1个（共用）、棉花塞16粒、漏斗架1个、纱布1块。本文档共15页；当前第10页；编辑于星期二\2点30分母种斜面培养基的制作三、实验材料：马铃薯40g、琼脂4g、葡萄糖或白糖4g、水200mL。琼脂本文档共15页；当前第11页；编辑于星期二\2点30分母种斜面培养基的制作四、方法步骤：1、称取材料：将马铃薯洗干净，去皮，称取40g，切成薄片；称取琼脂4g和葡萄糖（或白糖）4g；量取水200mL。2、将40g马铃薯薄片放入铝锅，加入200mL水，加热煮沸30分钟，趁热用6层纱布过滤。3、马铃薯的滤液用开水补足到200mL，倒回铝锅，加入4g琼脂和4g葡萄糖（或白糖），用小火继续加热并不断搅拌至全部熔化为止，最后补水至200mL。本文档共15页；当前第12页；编辑于星期二\2点30分母种斜面培养基的制作4、趁热分装入试管内，每支试管装至其长度的五分之一（试管口的内外3cm内粘附的培养基，必须擦拭干净），塞入棉塞（棉塞总长4cm，要求松紧适宜，塞入长度为棉塞长度的2/3）。然后以每7~10支为一捆，棉塞外再包上牛皮纸，并用绳扎好。5、将高压锅盖拧开，加入适量的水，把包扎好的试管直立放入高压锅的内桶（不能装太紧，防止阻碍蒸气流通），盖上锅盖（依此、对称旋紧螺丝），进行灭菌。6、待高压锅内压力达0.5千克/平方厘米时，打开放气阀门放气，待压力表指示为“0”时，关放气阀门。在压力达1.5千克/平方厘米时，用小火维持温度126℃（灭菌期间应专人看守），30分钟后停止加热，当压力下降到接近“0”时，移入无菌室，先打开放气阀，再打开高压锅盖。本文档共15页；当前第13页；编辑于星期二\2点30分母种斜面培养基的制作7、培养基冷却到60℃左右，从高压锅中取出，趁热摆成斜面，并使斜面长度约