免疫组化流程

石蜡切片脱蜡至水，微波炉抗原热修复3%H2O2，温室10min内灭活内源性酶正常山羊血清封闭兔抗人Myf5多克隆抗体（1:600），兔抗人TGF-61多克隆抗体（1:400）,4°C孵育过夜生物素标记羊抗兔IgG链酶卵白素工作液DAB显色，室温，镜下控制显色时间，复染内直肌•10%内直肌•10%甲醛液固定4C下固定24h免疫组化备用■蜡块包埋■常规脱水II— 一_」石蜡切片脱蜡至水，微波炉抗原热修复3%此6,温室10min内灭活内源性酶正常山羊血清封闭兔抗人Myf5多克隆抗体（1:600）,兔抗人TGF-R1多克隆抗体（1:400）,4*t!祚育过夜生物素标记羊抗兔igG说酶卵白素工作液DAB显色，室温，镜下控制显色时间，复染脱水，透明，封片

制作外斜视猫模型，经外源性IGF-I干预后，采用免疫组织化学法观察组别nMyf5平均光密度值为2P实验A1组333.3400+17.1565无菌水对照B1组321.3039+7.43894.6460.098空白对照C1组318.9468+6.5863|实验A2组339.2375+15.2508无菌水对照B2组319.4306+4.753121.8640.000空白对照C2组317.9965+7.2897实验A3组347.7017+19.3943无菌水对照B3组34.8209+2.664531.8140.000空白对照C3组35.8640+2.6160组别nTGF-81平均光密度值%2P实验A1组30.7955+0.1182无菌水对照B1组31.9080+0.234130.8010.000空白对照C1组32.0067+0.3132|实验A2组30.5291+0.0902无菌水对照B2组32.2959+1.026840.2780.000空白对照C2组32.6205+1.1112实验A3组30.4164+0.0841无菌水对照B3组31.8198+0.716535.1770.000空白对照C3组31.8262+0.6700

组别nTGF-B1平均光密度值他（F）P实验A1组30.7955±0.1182实验A2组30.5291±0.090272.863a0.000实验A3组30.4164±0.0841无菌水对照B1组31.9080±0.2341无菌水对照B2组32.2959±1.02682.209b0.331无菌水对照B3组31.8198±0.7165空白对照C1组32.0067±0.3132空白对照C2组32.6205±1.11124.202b0.122空白对照C3组31.8262±0.6700a表示X2,b表示F组别nMyf5平均光密度值X2(F)P实验A1组333.3400+17.1565实验A2组339.2375+15.25083.114a0.049实验A3组347.7017±19.3943无菌水对照B1组321.3039±7.4389无菌水对照B2组319.4306±4.753131.814b0.000无菌水对照B3组34.8209±2.6645空白对照C1组318.9468±6.5863空白对照C2组317.9965+7.289717.964b0.000空白对照C3组35.8640+2.6160a表示Z2,b表示F组别nMyf5平均光密度值%2(F)P实验A1组333.3400±17.1565实验A2组339.2375±15.25083.114a0.049实验A3组347.7017±19.3943无菌水对照B1组321.3039±7.4389无菌水对照B2组319.4306±4.753131.814b0.000无菌水对照B3组34.8209±2.6645空白对照C1组318.9468±6.5863空白对照C2组317.9965±7.289717.964b0.000空白对照C3组35.8640±2.6160a表示x2,b表示F组别nTGF-61平均光密度值%2P实验A1组30.7955±0.1182无菌水对照B1组31.9080±0.234130.8010.000空白对照C1组32.0067±0.3132实验A2组30.5291±0.0902无菌水对照B2组32.2959±1.026840.2780.000空白对照C2组32.6205±1.1112实验A3组30.4164±0.0841无菌水对照B3组31.8198±0.716535.1770.000空白对照C3组31.8262±0.6700Al组（4周组）宣2组（8周组）健康幼猫27只B2组宣2组（8周组）健康幼猫27只B2组（8周组）B3组（12周组）C1组（4周组）C2组（8周组）C3组（12周组）心组（12周组）Bl组（4周组）Fl空白对赐组（9只）体重400克左右常规检查排除外眼、屈光r组织脱水机（TC-120S）湖北孝感市泰维电子设备有限公司冷台（冷台（JLTA型）石蜡切片机（RM2125）摊片烤片机（CS-V1）微波炉（HR7752T）电热恒温培养箱（WMK-08）冰箱（-20-C和4C）天津市久圣医疗电子仪器有限公司中国上海仪器厂孝感市宏业医用仪器有限公司青岛微波制品有限公司中国山东潍坊医疗器械厂青岛海尔公司高清度彩色病理图文分析系统日本Olimpus公司lePCI图像分析软件lePCI图像分析软件美国C-imaging〔分析系统〔分析系统组织脱水机（TC-120S型）冷台（JLT-A型）石蜡切片机（RM2125）摊片烤片机（CS-VI型）微波炉（HR7752T）电热恒温培养箱㈣MK48型）冰箱（-20X^141：!）高清度彩色痼SHPIAS