浮游植物的采集计数与定量方法

浮游植物的采集计数与定量方法第一页，共十一页，编辑于2023年，星期一浮游植物（Phytoplankon）又称浮游藻类，是水中悬浮生活的若干种藻类的总称。浮游植物及其生产力是水生态系统的重要成员与重要功能之一，是鱼类天然饵料的重要组成部分。由于浮游植物对环境的变化十分敏感，故在环境监测中，也有重要作用。我国淡水养殖的主要对象是鲢、鳙鱼类，它们的天然饵料常以浮游植物为主。我们知道，不同类型的水体或同一水体的不同季节，藻类的组成是不相同的，各种藻类的相对量在不断地变化。这种变化是有一定的趋势的，这以后要专题介绍。就鲢鳙而言，藻类又有易消化种类和不易消化种类之分，一般说来，硅藻门、金藻门、甲藻门中种类易于消化，而蓝藻门、绿藻门、裸藻门中的多数种类难于消化。因此，在鱼类生长季节，研究水中藻类组成和现存量（Standingcrop），可为养殖鱼类的合理投放提供重要的科学依据。同时为水生态研究及利用提供了有用的资料。浮游植物的现存量，指的是某一瞬间单位水体中所存在的浮游植物的量。这个量有两种表示方法，用数目单位表示成为密度，一般用万个／升为单位，五、六十年代用之；用重量单位（mg/L）表示的现存量称为生物量（Biomass）。70年代以来被广泛使用。第二页，共十一页，编辑于2023年，星期一在以往的调查中，人们往往只注重浮游植物的种类或数量，对其生物量则重视不够。其原因在于：1、浮游植物生物量测算繁琐；2、对生物量与数量之间的本质差别认识不足。由于不同水体，不同种类的藻类在个体上有很大差异，仅仅用数量就很难评价不同水体饵料生物的丰欠。这就要求，浮游植物的定量工作，必须以测算生物量为目标。

不同的调查方法，有时会得出不同的结果。关于浮游生物的采集、计数与定量方法采用下列方法。

第三页，共十一页，编辑于2023年，星期一一、采样：1．

采水器：各种采水器均可，一般浅水（<10m）湖泊可用玻璃瓶采水器，深水湖泊或水库必须用颠倒采水器、北原式采水器或有机玻璃采水器。2．采样点的选择及采样层次的确定选择采样点的原则是，采样点在平面上的分布要有代表性。一般要求湖心、库心、江心必须采样，有条件时采样点可适当多设一些，如大的湖湾、库湾、河流的上、中、下游水体的沿岸带、浅水区等也要设点采集。凡水深不超过2米者，可于采样点水下0.5m处采水，水深2～10米以内，应距底0.5米处另采一个样，水深超过10米时。应于中层增采一个水样。一般来说池塘、水库、湖泊、河流的样点及采水层次可总结如下：

第四页，共十一页，编辑于2023年，星期一⑴池塘：样点可设在距岸边1m处。水深小于2m时采一中层水样。若水深大于2m时，最好采上、中、下层水样。亚表层：水下20cm左右。中层：水体中间部分。下层：离底20cm左右。⑵水库及河流：样点可设在上、中、下游。上游：设十个点（亚表层或中层）中游：水在2－3米深时设一个点，采2个样（上中层和中下层）下游：设2－3个样点。中心点3个样（上、中、下层），两测点各一个样（中层）⑶湖泊：中心区设一点。进水口和出水口也应设点。

第五页，共十一页，编辑于2023年，星期一3．采样量及采样次数每一个采样点应采水1000ml。若系一般性调查，可将各层采的水等量混合，取1000ml混合水样固定；或者分层采水，分别计数后取平均值。分层采水可以了解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类。采得水样后立即加入10－15ml鲁哥氏液（Lugol’ssolution）固定，鲁哥氏液即将6克碘化钾溶于20ml水中，待其完全溶解后，加入4克碘充分摇动，待碘全部溶解后定容到100ml即配成鲁哥氏液。泥沙多时沉淀后再取水样。采样次数可多可少。有条件时还可逐月采样一次，一般情况可下每季采样一次，最低限度应在春季、夏季末、秋初各采样一次。

第六页，共十一页，编辑于2023年，星期一二、沉淀浓缩：上述水样，摇匀后倒入1000ml圆柱形沉淀器中沉淀24小时，沉淀器可用1000ml的瓶子代替。用虹吸管小心抽出上面不含藻类的“清液”。剩下30－50ml沉淀物转入50ml的定量瓶中；再用上述虹吸出来的“清液”少许冲洗三次沉淀器，冲洗液转入定量瓶中。凡以碘液固定的水样固定的水样，瓶塞要拧紧。还要加入2－4％的甲醛固定液（福尔马林），即每100ml样品需另加4ml福尔马林，以利于长期保存。浓缩时切不可搅动底部，万一动了应重新静止沉淀，为不是漂浮水面的某些微小生物等进入虹吸管内，管口应始终低于水面，虹吸时流速流量不可过大，吸至澄清液1／3时，应控制流速，使其成滴缓慢留下为宜。采水时，每瓶样品必须贴上标签，标签上药剂在采集的时间、地点、采水体积等，其他详细内容应另行做好记录，以备查对，避免错误。浓缩的体积视浮游植物的多少而定。也可根据水的肥瘦确定浓缩体积。如下面的浓缩体积与水透明度（体现水的肥瘦）之间关系大致如下，仅供参考。 瘦中肥 透明度>1m >50cm >30cm

老水特老水 <30cm<20cm浓缩的标准是以每个视野里有十几个藻类为宜。

1000ml30ml50ml100ml 不浓缩 稀释第七页，共十一页，编辑于2023年，星期一三、计数方法将浓缩沉淀后水样充分摇匀后，立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品，注入0.1ml计数框内（计数框的表面积最好是20×20㎜2），小心盖上盖玻片（22×22㎜2），在盖盖玻片时，要求计数框内没有气泡，样品不溢出计数框。然后在14×40或16×40倍显微镜下计数。即在400－600倍显微镜下计数。每瓶标本计数两片取其平均值，每片大约计算50～100个视野，但视野数可按浮游植物的多少而酌情增减，如平均每个视野不超过1～2个时，要数200个视野以上，如果平均每个视野有5～6个时要数100个视野，如果平均每个视野有十几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算结果和平均数之差如不大于其均数的±15％，其均数视为有效结果，否则还必须测第三篇，直至三片平均数与相近两数之差不超过均数的15％为止，这两个相近值的平均数，即可视为计算结果。在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中，另一部分在视野外，这时可规定出在视野上半圈者计数，出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞表示，对不宜用细胞数表示的群体或丝状体，可求出其平均细胞数。计算时优势种类尽可能鉴别到属，注意不要把浮游植物当作杂质而漏计。计数时可按下列格式记录，然后再进行整理计算。视野数种类第一片第二片正小球藻正正正正正衣藻正正正正小环藻正正第八页，共十一页，编辑于2023年，星期一四、数量与生物量的计算：1．一升水中的浮游植物的数量（N）可用下列公式计算：式中：Cs—计数框面积（㎜2），一般为400㎜2。Fs—每个视野的面积（㎜2），лR2，视野半径r可用台微尺测出（一定倍数下）。Fn—

计数过的视野数。V—

一升水样经沉淀浓缩后的体积（ml）U—

计数框的体积（ml）为0.1ml。Pn—

计数出的浮游植物个数。如果计数框、显微镜固定不变，Fn、V、U也固定不变，公式中的（）可视为常数，此常数用K表示，则上述公式可简化为：N=K×Pn。Pn代表某种藻类的个数，计算结果N只表示一升水中这种藻类的数量；Pn若代表各种藻类的总数，计算结果N则表示一升水中浮游植物的总数。前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可。

第九页，共十一页，编辑于2023年，星期一2．生物量一般按体积来换算。这是因为浮游植物个体极小，直接称重较困难，且其细胞比重多接近于1。可用形态相近似的几何体积公式计算细胞体积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数。这样体积值（μm-3）可直接换算为重量值（109μm-3）可直接换算为重量值（109μm-3≈1毫克鲜藻重）。下列体积公式，可供计算生物量时参考：圆锥体：V=1/3лR2h圆柱体：V=лR2h球体：V=4/3лR3椭圆体：V＝4/3ab2л（a为长轴半径，b为短轴半径）圆台体：V＝1/3лH（+）长方体与正方体ab×h或a3硅藻细胞的计算通式：V＝壳面面积×带面平均高度不规则性藻类可分可为几个部分计算。

第十页，共十一页，编辑于2023年，星期一每种藻类至少随机测量20个以上，求出这种藻类个体重的平均值，一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升税种该种藻类的数量，即得到一升水中这种藻类的生物量（mg/L）。由于同一种类的细胞大