三年制医学检验技术专科-临床检验免疫学-教学大纲

临床免疫学检验教学大纲(ClinicalLaboratoryImmunology)(供三年制医学检验技术专科专业使用)前言《临床检验免疫学》是医学检验专业的重要专业课之一。它主要讲述临床免疫学的基本技术、基本理论及常用的免疫学诊断方法，以及常见免疫相关性疾病的免疫学特征及免疫学诊断的意义。针对检验专科的授课不同与本科层次，它主要强调的是学生实验动手能力的培养，因此学生应熟练掌握临床检验科开展的常用免疫学检验技术，掌握临床免疫相关疾病的免疫学特征，并能针对不同的临床病例开展相关免疫学项目的诊断，并能对诊断结果进行合理的临床解释和分析。目前质量控制是检验工作的重要组成部分，要求学生能熟悉关于免疫检验的相关质量控制。本门课程的教学目的和基本技能训练要求是：通过对临床免疫检验工作较广泛的认识，使学生对临床免疫检验工作形成较深刻的理解，掌握各种免检理论和操作技能，养成良好的实验室工作作风，为毕业后能从事临床免疫检验工作奠定良好的理论和实验室基础。临床免疫检验工作涉及面广，内容多，授课必须重点突出，主次分明，详略得当，难点讲透，以确保学有所获。本大纲是参考中国医药科技出版社出版、吕世静主编、第二版«临床免疫学检验»教材制定的,并确定高等医学院校临床医学类三年制医学检验专业的临床免疫学检验教学的目的要求。在每章的“目的要求”项目中，指出掌握、熟悉与了解三级要求。掌握内容是本章节的教学重点，亦是理论和实验的重点考试范围；熟悉内容为选择性讲授和学生自修内容；了解内容为供学生自学和教师选择性教授。在“教学内容”项目中，划有横线条的部分是要求掌握的具体内容。通过讲授、实验、电教片学习、多媒体课件学习、病例讨论及自学等方式进行教学。本课程总学时为100课时，其中理论讲授58学时，实验42学时。本课程为校考课，课程考核成绩由平时考核和课终考核组成，其中课终考核采用笔答考试方式，其成绩占课程最终成绩的60％，平时考核由平时表现和实验报告两部分组成，各占20%和20%。各章参考学时分配表 内容 理论学时数实验学时数概论1抗原抗体反应 一2免疫原和抗血清制备 一3单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术 一3凝集反应 一2 沉淀反应 4补体系统检测及应用 一2放射免疫技术 一3荧光免疫技术3酶免疫技术 一3化学发光免疫技术2其他标记技术 一3免疫细胞分离及功能检测 一6免疫检验的质量控制 一3 超敏反应性疾病及其免疫检测 5 自身免疫性疾病及其免疫检测 4 免疫增殖性疾病及其免疫检测 3 免疫缺陷性疾病及其免疫检测 3移植免疫及其免疫检测 一3实验一胶乳凝集试验（抗"0”及RF检测）3实验二免疫电泳试验 一4实验三荧光抗体显微技术试验 4实验四酶联免疫吸附试验1 4实验五酶联免疫吸附试验23实验六斑点免疫印迹试验 4实验七自动化学发光免疫分析仪见习 一3实验八补体检测试验 一4实验九外周血单个核细胞分离 4实验十免疫印迹法检测抗ENA 3实验十一PEG沉淀法检测循环免疫复合物一3实验十二AlDS病实验室检测见习 3 合计 5842概论目的要求掌握基础免疫学的概念及主要内容。熟悉临床检验免疫学的研究对象及其任务。教学内容.免疫学概念；功能：免疫防御、免疫自稳及免疫监视。.免疫系统的组成免疫器官：中枢免疫器官（骨髓及胸腺），外周免疫器官（淋巴结、脾脏等）；免疫细胞：淋巴细胞（T细胞、B细胞和NK细胞）,单核一吞噬细胞，参与免疫应答的细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细胞等）；免疫分子:免疫球蛋白、补体系统、细胞因子、粘附因子、CD抗原等..临床检验免疫学的研究对象及任务免疫学技术:沉淀反应、凝集反应、酶标免疫技术、荧光标记免疫技术等；临床免疫学：免疫学期基础理论、临床疾病及免疫学技术的结合.抗原抗体反应目的要求掌握抗原抗体的反应原理；抗原抗体反应的特点。熟悉抗原抗体反应的影响因素。了解抗原抗体反应的类型。教学内容1∙抗原抗体反应的原理抗原决定簇与抗体超变区分子；抗原抗体结合力；亲和力与亲合力；亲水胶体转化为疏水胶体。.抗原抗体反应特点特异性；比例性；可逆性；阶段性。.抗原抗体反应的影响因素反应物自身因素；环境因素：电解质、酸碱度及温度。.抗原抗体反应的类型凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、标记免疫反应等。免疫原和抗血清的制备目的要求掌握多克隆抗体的概念；免疫血清（即多克隆抗体）的制备流程；免疫佐剂的概念、种类和作用机制。熟悉颗粒性抗原、可溶性抗原的制备。了解半抗原性免疫原的制备。教学内容.多克隆抗体概念多种抗原表位；多个B细胞克隆；混合抗体。.免疫血清的制备流程免疫原的制备；佐剂的制备；免疫动物的选择；免疫程序:免疫原的剂量、免疫途径及免疫间隔时间；试血；采血；抗血清的鉴定和保存：抗血清的纯化。.免疫佐剂概念；种类：氢氧化铝、明矾、弗氏佐剂等；作用机制。.半抗原性免疫原载体；半抗原与载体的连接方法；半抗原的鉴定。单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术目的要求掌握单克隆抗体的概念及特性；淋巴杂交瘤技术的基本原理；基因工程抗体的概念。熟悉单克隆抗体的制备流程。了解基因工程抗体的种类。教学内容.单克F⅜抗体的概念单一表位；单个B细胞克隆；均一抗体..单克隆抗体的特性高度特异性；高度均一性；弱凝集反应和不呈现沉淀反应；对环境敏感性..杂交瘤技术制备单克隆抗体的原理亲本细胞的选择；细胞的融合；选择性培养基的筛选;克隆化培养..单克隆抗体的制备流程抗原提纯和动物免疫；制备脾细胞；骨髓瘤细胞制备；细胞融合；饲养细胞制备；杂交瘤细胞筛选；阳性细胞克隆化；克隆扩大再生产；收集抗体；单抗的纯化及鉴定；细胞的冻存及复苏。.基因工程抗体概念;常见类型：人源化抗体、小分子抗体、抗体融合蛋白、双特异性抗体及噬菌体抗体库技术。凝集反应目的要求掌握凝集反应的原理、特点；常见的直接凝集反应；间接凝集反应的分类及常见试验。熟悉抗球蛋白试验类型、原理及应用。了解冷凝集试验。教学内容.凝集反应原理；特点。.凝集反应的分类直接凝集反应：玻片凝集试验（原理及应用），试管凝集试验（原理及应用）；间接凝集反应：正向间接凝集试验、反向间接凝集试验、间接凝集抑制试验及反向间接凝集抵制。.凝集反应的分类胶乳凝集试验：原理及应用：血凝试验。.抗球蛋白试验分类；原理；应用。沉淀反应目的要求掌握沉淀反应的概念、分类及特点；免疫浊度原理、评价及应用；免疫电泳技术的原理、评价及应用。熟悉凝胶内沉淀反应的原理、评价及应用。教学内容.沉淀反应概念；分类：液体内沉淀试验（絮状沉淀试验、免疫浊度测定），凝胶内沉淀试验（单向扩散试验、双向扩散试验），免疫电泳技术（对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳及免疫固定电泳）；特点。.免疫浊度测定原理；分类：透射免疫比浊法、散射免疫比浊法、免疫胶乳比浊法;影响因素；临床应用。.免疫电泳技术对流免疫电泳：原理，操作要点及应用；火箭免疫电泳：原理，操作要点及应用；免疫电泳：原理，操作要点及应用：免疫固定电泳:原理，操作要点及应用..凝胶内沉淀试验单向扩散试验：原理，操作要点及应用；双向扩散试验：原理，操作要点及应用。补体检测及应用目的要求掌握补体结合试验；血清总补体溶血活性测定试验。熟悉单个补体成分的测定；补体旁路途径溶血活性测定试验。了解补体系统概述。教学内容.概述补体成分的含量与理化特性：补体成分的含量，补体的理化特性；补体的活化途径。.补体总活性测定（CH50）原理；方法；评价；应用。.补体旁路途径溶血活性测定原理；方法；评价；应用。.补体结合试验实验原理；实试验方法：试剂准备，正式试验；方法评价。.单个补体成分的测定免疫溶血法：原理，方法，评价；免疫化学法：常用指标，常用检测方法。放射免疫技术目的要求掌握放射免疫技术的基本类型；放射免疫分析；免疫放射分析；IRMA与RIA的比较。熟悉常用的放射性核素；免疫复合物与游离抗原的分离。了解放射免疫分析技术的应用；放射性核素标记物的制备、纯化及鉴定。教学内容1．概述常用的放射性核素；放射性核素标记物的制备：类型及特点；放射性核素标记物的纯化及鉴定；免疫复合物与游离抗原的分离：活性碳吸附法，PEG沉淀法，双抗体法，PR试剂法.放射免疫分析基本原理；技术要点：抗原抗体反应，B和F的分离，放射性测量;数据处理：方法评价。.免疫放射分析基本原理：单位点出乂A，双位点IRMA；技术要点；方法评价。.IRMA与RIA的比较标记对象；反应速率；反应方式；特异性等。.放射免疫分析技术的应用。荧光免疫技术目的要求掌握荧光物质的类型及特点；荧光抗体技术。熟悉荧光的基本知识；时间分辨荧光免疫测定技术。了解荧光标记物的制备、鉴定及保存。教学内容.概述荧光的基本知识：荧光，荧光效率，荧光寿命，荧光淬灭；荧光物质：FITC,RB200,TRITC,PE等；荧光标记物的制备：标记方法，标记物的纯化、鉴定及保存。.荧光抗体技术标本的制作；荧光抗体染色：直接法，间接法，双标记法；荧光显微镜检查：荧光显微镜的结构（光源，滤光片，光路，聚光器，镜头等）；结果判断;临床应用。.时间分辨荧光免疫测定基本原理；技术类型；方法评价；临床应用。酶免疫技术目的要求掌握酶免疫技术的原理及特点；酶联免疫吸附试验的基本原理、类型及原理、操作要点。熟悉酶免疫技术的分类；ELISA的常用试剂。了解酶标记物的制备及鉴定。教学内容.酶免疫技术概述原理；特点；技术类型。.ELISA的常用试剂酶和酶作用底物：酶的要求，常用的酶，常用的底物；酶标记抗体或抗原（结合物）：制备、纯化及鉴定；固相载体：固相载体的要求,固相载体的种类和选择，包被与封闭。3．酶免疫技术的分类酶免疫测定技术与酶免疫组织化学技术；均相酶免疫测定与异相酶免疫测定。4.酶联免疫吸附试验基本原理；方法类型及反应原理：夹心法(两步法，双位点一步法)，间接法，竞争法，捕获法等；技术要点：加样，温育，洗板，显色，终止，结果判断。化学发光免疫分析技术目的要求掌握化学发光剂、化学发光免疫分析的类型及原理；熟悉化学发光免疫分析的临床应用；了解发光剂的标记技术。教学内容.概述化学发光；化学发光效率。.化学发光剂和标记技术化学发光剂：直接化学发光剂，酶促反应发光剂；发光剂的标记技术：常用标记方法，影响标记的因素。.化学发光免疫分析的类型直接化学发光免疫分析；化学发光酶免疫分析：辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析，碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析；电化学发光免疫分析；临床应用。其他标记技术目的要求掌握生物素-亲和素系统的特点、类型及原理；免疫印迹试验；斑点酶免疫吸附试验；酶联免疫斑点试验。熟悉生物素-亲和素系统的应用；膜载体免疫测定的种类；常用的固相膜。了解生物素的理化性质与标记；亲和素、链霉亲和素的理化性质与标记；固相膜免疫测定技术的评价。教学内容.生物素及活化生物素理化性质；标记。.亲和素、链霉亲和素理化性质；标记。.生物素-亲和素系统的特点灵敏度，特异性，稳定性，适应性，其他。.生物素-亲和素系统的类型及原理BAB法，ABC法，BA法.生物素-亲和素系统在各检测技术中的应用在ELISA中的应用；在均相酶免疫测定中的应用；在荧光免疫技术中的应用；在放射免疫测定中的应用；在分子生物学中的应用。.概述常用的固相膜；固相膜测定技术的评价。.膜载体免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验；免疫印迹试验；酶联免疫斑点试验。.斑点酶免疫吸附试验原理；技术要点；应用;评价。.免疫印迹试验原理；技术要点；临床应用;评价；注意事项。.酶联免疫斑点试验(ELISPOT)原理；技术要点；评价；应用。免疫细胞分离及检测目的要求.掌握免疫细胞的分离技术；掌握T细胞数量检测及临床意义；掌握T细胞功能检测;掌握B细胞数量检测及临床意义；掌握B细胞功能检测及临床意义..熟悉淋巴细胞表面主要标志；NK细胞数量及功能检测..了解中性粒细胞数量及功能检测；吞噬细胞数量及功能检测．教学内容免疫细胞的分离外周血单个核细胞分离：原理，操作，影响因素；淋巴细胞的分离；T/B细胞的分离；T细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪（FACS）分离法.T细胞数量及临床意义数量检测：间接免疫荧光法，免疫细胞化学法，£花环形成试验功能检测；临床意义.T细胞功能检测淋巴细胞转化试验；淋巴细胞的细胞毒性检测；相关细胞因子的检测；"型超敏反应皮试.B细胞数量及临床意义数量检测：花环技术，免疫荧光法检测sm⅛:临床意义.B细胞功能检测B细胞增殖能力的试验；溶血空斑试验；ELISPOT:体内试验.NK细胞检测数量检测；功能检测：趋化功能，吞噬功能，灭菌功能.中性粒细胞检测数量检测；功能检测：趋化功能，吞噬功能，灭菌功能：NBT还原试验.吞噬细胞检测数量检测；功能检测：趋化功能，吞噬功能，灭菌功能.免疫检验的质量控制目的要求掌握实验方法诊断效率评价；免疫检测的室内质量控制。熟悉质控的相关基本概念；免疫检测的室间质量评价。教学内容．质控的相关基本概念质量控制；准确度；回收试验；精密度；重复性试验；正态分布。.实验方法诊断效率评价敏感性;特异性;假阳性;假阴性率;预测值。.免疫检验的室内质量控制测定前的质量控制：室验室的环境设施及设备，理想的试剂和方法，人员培训；测定中的质量控制：质控品，标本的收集及处理，标准化操作;统计学质量控制:基线测定，LeveyJennings质控图法，“即该法”质控法;失控处理及分析。.免疫检验的室间质量控制室内质量评价的意义；室间质量评价的程序设计和运作;室间质量评价的方式；参评实验室标准操作程序；评分方式。超敏反应性疾病及其免疫检测目的要求.掌握I型超敏反应的实验室检测；11型超敏反应的实验室检测；111型超敏反应的实验室检测；"型超敏反应的实验室检测..熟悉I型超敏反应的发病机制及常见疾病；II型超敏反应的发病机制及常见疾病；山型超敏反应的发病机制及常见疾病；"型超敏反应的发病机制及常见疾病测.教学内容1.I型超敏反应：发生机理；常见疾病；实验室检测:I型超敏反应皮肤试验、血清IgE检测、相关细胞检测.2∙∏型超敏反应：发生机理：常见疾病；实验室检测：抗血细胞抗体检测3.111型超敏反应：发生机理；常见疾病；实验室检测：循环免疫复合物的检测（聚乙二醇法、补体相关测定法、抗球蛋白测定法、细胞技术测定法）4.W型超敏反应：发生机理：常见疾病：实验室检测："型超敏反应皮肤试验.自身免疫性疾病及其免疫检测目的要求掌握常见自身抗体检测及临床意义；自身抗体检测的应用原则；常见的自身免疫性疾病的免疫检测。熟悉自身免疫性疾病的分类、共同特征及常见自身免疫性疾病；自身免疫性疾病的相关实验检测。3．了解自身免疫性疾病的发病机制和免疫损伤机制。教学内容1．自身免疫性疾病概述分类；共同特征；常见的自身免疫性疾病。2．自身免疫病的发病机制和免疫损伤机制抗原因素；免疫调节因素；遗传因素；凋亡因素；超敏反应。.常见自身抗体类风湿因子及相关抗体：检测及临床意义;抗核抗体：检测方法、临床意义；抗角蛋白抗体：检测及临床意义;抗dsDNA抗体：检测方法、临床意义；抗ENA抗体：检测方法、临床意义；其他自身抗体。.自身抗体检测的应用原则筛选实验；确诊实验。.自身免疫性疾病的相关实验检测球蛋白检测；补体检测；淋巴细胞检测；细胞因子检测；循环免疫复合物检测等。.常见自身免疫性疾病系统性红斑狼疮：发病机制，免疫检测；类风湿性关节炎:发病机制，免疫检测。免疫增殖性疾病及其免疫检测目的要求掌握多发性骨髓瘤；单克隆免疫球蛋白常用的检测方法及检测原则。熟悉免疫增殖性疾病的概念；其他常见免疫球蛋白增殖病。了解免疫增殖性疾病的分类；免疫增殖性疾病的免疫损伤机制。教学内容免疫球蛋白异常增殖性疾病概念；分类；免疫损伤机制：浆细胞异常增殖；正常体液免疫抑制；免疫球蛋白异常增殖所造成的病理损伤，溶骨性病变。免疫球蛋白异常增殖性疾病的免疫损伤机制。.常见免疫球蛋白增殖病多发性骨髓瘤;巨球蛋白血症；重链病；轻链病；良性单克隆丙种球蛋白血症。.单克隆免疫球蛋白的检测血清区带电泳；免疫电泳；免疫固定电泳；血清免疫球蛋白定量。.单克隆免疫球蛋白的检测原则免疫缺陷性疾病及其免疫检测目的要求掌握免疫缺陷病的特征；原发性免疫缺陷病的免疫学检测；获得性免疫缺陷病的检测。熟悉免疫缺陷病的分类；获得性免疫缺陷综合征概述。了解免疫缺陷病的发病因素。教学内容.概述免疫缺陷病的分类：原发性免疫缺陷病、继发性免疫缺陷病；免疫缺陷病的拄征：易感染、易伴发恶性肿瘤、易伴发自身免疫病。.原发性免疫缺陷病原发性B细胞缺陷：X性连锁无丙种球蛋白血症，X性联高IgM综合征等；原发性T细胞缺陷：先天性胸腺发育不全综合症等；重症联合免疫缺陷：性联重症联合免疫缺陷等；原发性吞噬细胞缺陷：慢性肉芽肿病等；原发性补体系统缺陷：遗传性血管神经性水肿等。．获得性免疫缺陷综合征概述病原学；致病机制；临床特点；免疫学特征。.原发性免疫缺陷病的免疫学检测B细胞缺陷病的检测：血清Ig测定，同种血型凝集素的测定，特异性抗体产生能力测定，B细胞表面膜免疫球蛋白（SmIg）的检测，CD抗原检测；T细胞缺陷病的检测:T细胞功能检测，T细胞数量及其亚群检测；吞噬细胞免疫缺陷病的检测：白细胞计数，趋化功能检测，吞噬和杀伤试验，NBT还原试验，黏附分子检测;补体系统缺陷病的检测：总补体活性，单个组分的测定；.获得性免疫缺陷病的检测HIV抗原检测；HIV抗体检测：初筛试验、确认试验；CD4+T细胞计数；其他检测。移植免疫及其免疫检测目的要求.掌握组织配型。.熟悉排斥反应的种类及发生机制。.了解排斥反应的免疫监测；排斥反应的预防与治疗。教学内容排斥反应的种类及发生机制超急性排斥反应；急性排斥反应；慢性排斥反应；移植物抗宿主反应。HLA分型血清学分型法；细胞学分型法：单向MLC,双向MLC；分子生物学分型法:RFLP与PCR-RFLP分型法，PCR-SSO分型法，PCR-SSP分型法，PCR-SSCP分型法，SBT分型法。排斥反应的预防与治疗组织配型：HLA配型，HLA交叉配型与预存抗体的检测，群体反应性抗体的检测；移植物与受体的预处理；免疫抑制措施：免疫抑制剂的应用，对移植抗原特异性免疫耐受诱导。排斥反应的免疫监测体液免疫与细胞免疫水平检测的临床意义；尿微量蛋白检测的临床意义；急性时相反应物质检测的临床意义；免疫抑制剂体内药物浓度检测的临床意义。实验一间接胶乳凝集试验（抗“0”及RF检测）目的要求.掌握胶乳凝集试验试验（抗“O”及RF）的原理、操作过程及结果判断。.熟悉抗“O”及RF的临床意义。.了解影响抗“O”及RF检测的因素。教学内容.试剂及仪器：抗“O”检测试剂盒、RF的检测试剂盒、阳性血清、待测血清。.操作方法：加血清→加诊断试剂一混匀反应→结果判断。.半定量分析的探讨。4．临床意义。.注意事项。实验二免疫电泳试验目的要求.掌握免疫电泳的原理、操作过程及结果判断。.熟悉免疫电泳的临床应用。.了解免疫电泳的操作注意事项。教学内容.试剂及仪器：0.05mol∕LpH8.6巴比妥缓冲液；琼脂粉；兔抗人全血清；正常人血清和白蛋白溶液；电泳仪；电泳槽；37℃温箱等。.操作方法:制备琼脂板→加样→电泳一双扩散。.结果判断：沉淀线的数量、位置和形状的观察。.注意事项。.应用与评价。实验三荧光抗体显微技术实验目的要求.掌握间接免疫荧光法检测ANA原理及操作过程。.熟悉间接免疫荧光法检测ANA的结果判断。.了解免疫荧光技术的常见影响因素。教学内容.抗原片的制备：剖取小鼠肝一剪块一印片一晾干。.操作方法:血清滴加在肝印片上，37℃、30min-冲洗一滴加荧光抗体，37℃、30min一冲洗一甘油封片一荧光显微镜镜检.结果判断荧光强度及核型的观察。.注意事项。实验四酶联免疫吸附实验1目的要求.掌握酶标仪的软件操作和洗板机的使用。.熟悉乙肝两对半（ELISA方法）测定的软件设置；洗板程序的设置。.了解洗板机的维护方法。教学内容.酶标仪的软件操作:启动软件一配置孔位一填写信息一启动仪器一计算一保存一打印报告一退出。.洗板机常用技术指标：残留量，加液量，清洗头等。.洗板机的使用:开机一冲洗管路一程序设置一启动。.乙肝两对半（ELISA方法）测定的软件设置。实验五酶联免疫吸附实验2目的要求1．掌握乙肝两对半的检测原理、操作过程及结果评判。2．熟悉影响乙肝两对半检测的因素。3．了解乙肝两对半的临床意义。教学内容1．试剂和仪器：乙肝两对半检测试剂盒；酶标仪；洗板机。.操作过程：分别按各项检测说明书对待检血清检测。.结果评判：计算COV值，判定阴阳性：综合5项检测结果，对测定样本患者作出实验诊断。4．操作中的注意事项。5．实验诊断的临床意义：阴性、小三阳、大三阳、疫苗接种者等。实验六斑点免疫印迹试验目的要求1．掌握斑点免疫印迹的原理及操作过程。2．熟悉斑点免疫印迹的常见影响因素。3．了解斑点免疫印迹的临床应用。教学内容.主要试剂：抗原、酶标抗体、DBA显色液、封闭液、洗涤液等。.实验操作:NC膜预处理→抗原包被→封闭→加样→孵育→洗涤→加酶标二抗→孵育→洗涤→加底物→孵育→显色→结果观察。3．结果判断：阴性:无色；阳性:明显棕色斑点。实验七自动化学发光免疫分析仪见习目的要求．掌握自动化学发光免疫分析仪检测原理。．熟悉自动化学发光免疫分析仪的操作过程及结果分析。．了解自动化学发光免疫分析仪日常维护及常见故障排除。教学内容.自动化学发光免疫分析仪原理介绍。.自动化学发光免疫分析仪的操作过程及结果分析。.自动化学发光免疫分析仪的临床应用。.自动化学发光免疫分析仪的日常维护及常见故障排除。实验八补体检测试验目的要求.掌握掌握补体检测原理及操作过程。.熟悉补体检测的常见影响因素。.了解补体检测的临床应用。教学内容.试剂和仪器：试剂1：Tris缓冲液、PEG6000；试剂2：羊抗人C3抗血清.援韭过程：分别按各项检测说明书对待检血清检测。3．操作中的注意事项。4．补体检测的临床应用。实验九外周血单个核细胞分离目的要求1．掌握外周单个核细胞分离的原理和方法。2．熟悉该实验的操作过程及影响因素。教学内容1．淋巴细胞分离液准备。.操作步骤:稀释抗凝血→加入淋巴细胞分离液面→离心一吸取白膜层细胞悬液→洗涤细胞→细胞计数及台盼蓝染色观察。.结果判断：细胞获得量，细胞存活率。.影响因素实验十免疫印迹法检测抗ENA目的要求.掌握免疫印迹实验检测ENA的原理及操作过程。.熟悉免疫印迹实验检测ENA的结果分析。.了解免疫印迹实验检测ENA常见影响因素及临床意义。教学内容.试剂及仪器：ENA多肽抗体谱检测试剂盒；37。C孵箱。.操作步骤:血清加入印迹膜条，37℃、30min→洗涤→加入酶标抗体，37℃、30min一加入底物，显色，终止。.结果判断:同标准图谱比较，确定阳性自身抗体。.临床意义分析。.注意事项。实验十^一PEG沉淀法检测循环免疫复合物目的要求.掌握PEG法检测循环免疫复合物(CIC)的原理、操作过程、结果判断及计算方法。.熟悉影响该方法的因素。教学内容.血样本处理：制作3次冻融血、脂血和溶血标本。.操作步骤：加入聚乙二醇及样品→4。C放置1小时→分光光度计测吸收光。.结果分析：冻融血、脂血和溶血对CIC测定的影响。实验十二AIDS病实验室检测见习目的要求.掌握AIDS筛选实验及确认实验原理。.熟悉AIDS筛选实验及确认实验操作过程、结果分析。.了解实验的影响因素。教学内容LAIDS筛选实验及确认实验介绍。2.AIDS筛选实验及确认实验操作过程讲解及演示。3．实验影响因素常用专业英文词汇表免疫学immunology免疫防御immunologicaldefence免疫自稳Immunologicalhomeostasis免疫监视Immunologicalsurveillance免疫学检验laboratoryimmunology临床免疫学Clinicalimmunology免疫应答Immunologicalresponse识别阶段Recognitionphase活化阶段Activationphase效应阶段EffectphaseT辅助细胞Thelpcell抗体AntibodyT杀伤细胞Tkillcell免疫系统Immunesystem骨髓Bonemarrow胸腺thymus巨噬细胞macrophage再循环Recirculation归巢受体Homingreceptor抗原递呈细胞Antigenpresentingcells,APC淋巴细胞lymphocyteT细胞受体Tcellreceptor,TCR簇分化抗原Clusterofdifferentiation,CD自然杀伤细胞Naturalkillercells,NK免疫球蛋白Immunogolbin,Ig补体Complement,C细胞因子Cytokine细胞粘附因子Celladhesionmolecules,CAM免疫病理学immunopathlogy移植免疫学Transplantationimmunology自体移植autograft同种同基因移植Syngrft同种异基因移植allograft异种移植xenograft排斥反应rejection肿瘤免疫学Tumorimmnonology感染免疫学Infectionimmunology免疫学检验Laboratoryimmunology抗原抗体反应Antigen-antibodyreaction疏水结合力Hydrophobicinteractions亲和力affinity亲合力avidity特异性specificity交叉反应Crossreaction可逆性reversibility比例性proportionality疏水作用力hydrophobicinteractions等价带equivalencezone带现象Zonephenomenon前带przone后带postxone标记免疫技术Immunolabellingtechnique免疫原immunogen免疫佐剂immunoadjuvant抗血清antiserum多克隆抗体Polyclonalantibody,pcAb载体carrier聚乙二醇Polyethyleneglycol,PEG单克隆抗体Monoclonalantibody,McAb有限稀释法Limitingdilution人源化抗体humanizedantibody,HAb基因工程抗体Geneticengineeringantibody可变区片段Fragmentofvariable,Fv凝集反应Agglutinationteaction直接凝集反应Directagglutinationteaction间接凝集反应indirectagglutinationteaction血凝试验Hemaagglutintiontest胶乳凝集试验Latexagglutinationtest抗球蛋白试验Antiglobulintest沉淀反应Precipitationreaction单向扩散试验singlediffusiontest对流免疫电泳counterimmunoelectroporesis,CIEP火箭免疫电rocketimmunoelectrophoresis,交叉免疫电crossedimmunoelectrophoresis,泳RIE泳CIEP免疫浊度测定immunoturbidimetry免疫电泳技术Immunoelectrophoresistechnique免疫电泳Immunoelectrophoresis,IEP免疫固定电泳ImmunofixationalelectrophoresisIFE免疫胶乳比浊法Immunolatexturbidimetry速率散射比浊法Ratenephelometry外周血单个核细胞Peripheralbloodmononuclearcells,PBMC淋巴母细胞转化Lymphobasttransformation刺激指数Stimulatingindex酶联免疫斑点试验Enzyme-linkedimmunospottest,ELISPOT细胞因子cytokine细胞粘附因子Celladhesionmolecule放射免疫分析radioimmunoassay,RIA免疫放射分析immunoradiometricassay,IRMA放射配体结合分析radioligandbindingassay，RBA放射受体分析radioreceptorassay,RRA高剂量钩状效应highdosehookeffect异硫氰酸荧光素fluoresceinisothiocyanate,FITC荧光fluorescence荧光抗体技术fluorescenceantibodytechnique,FAT荧光免疫测定fluorescenceimmunoassay荧光免疫组fluorescence织化学技术immunohistochemistrytechnique钩状效应hookeffect固相酶免疫测定solidphaseenzymeimmunoassay,SPEIA碱性磷酸酶alkalinephosphatase,Ap克隆酶供体免疫分析clonedenzymedonorimmunoassay,CEDIA辣根过氧horseradishperoxidase,HPR酶放大免疫enzyme-multiplied化物酶测定技术immunoassaytechcique,EMIT酶免疫吸附试验enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA酶免疫技术enzymeimmunoassay,EIA质量保证Qualityassurance,QA室内质量控制Internalqualitycontrol,IQC室间质量评价Externalqualityassessment,EQA重复性条件Repeatabilitycomdition均值run标准差Standarddeviation,SD变异系数Coefficientofvariation,CV最佳条件下的变异Optimalconditionsvariance,OCV常规条件下的变异Routineconditionvariation,RCV国际标准品Internationalstandard,IS速发性超敏反应Immediatehypersensitivity放射变应原吸附试验Radioallergosorbenttest,RAST迟发型超敏Delayedtypehypersensitivity,自身免疫耐Autoimmune-tolerance反应DTH受自身免疫autoimmunity自身抗体autoantibody自身免疫性Autoimmunedisease,AID系统性红斑Systemiclupuserythematosus,疾病狼疮SLE类风湿性关节炎Rheumatoidarthritis,RA抗核抗体Antinuclearantibody,ANA间接免疫荧Indirectimmunofluorescence,可提取核抗Extractablenuclearantigens光法IIF原类风湿因子Rheumatoidfactor,RF抗角蛋白抗体Antikeratinantibody,AKA免疫复合物Immunecomplex,IC循环免疫复合物Circulatingimmunecomplex,CIC电化学发光免疫分析electrochemiluminescenceimmunoassay,ECLIA化学发光chemiluminescence化学发光酶chemiluminescenceenzyme化学发光免chemiluminescence免疫分析immunoassay,CLEIA疫分析immunoassay,CLIA鲁米诺luminol生物发光bioluminescence床边检验pointofcaretest，POCT斑点金免疫渗滤试验dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA斑点酶免dotenzymelinked放射免疫沉radioimmunoprecipitation疫吸附试验immunosorbentassay,Dot-ELISA淀试验assay,RIPA固相膜免solidphasemembrane-based金免疫层析goldimmunochromatography疫测定immunoassay试验assay,GICA金免疫渗滤试验goldimmuno