猪冷冻精液技术规程

猪冷冻精液1范围本文件规定了猪冷冻精液的术语与定义、产品质量要求，抽样，检验规则和方法，标志、标签及随性文件，包装、贮存和运输。本文件适用于猪冷冻精液产品。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本规程必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本规程。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB23238-2021《种猪常温精液》GBT25172-2020《猪常温精液生产与保存技术规范》GB/T5458液氮生物容器GB/T

14174-2012大口径液氮容器GB

4789.2-2016

食品微生物学检验:菌落总数测定GB/T8170-2019数值修约规则与极限数值的表示和判定3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1原精液采集后未经稀释的精液。3.2冷冻精液经特殊方法处理，经超低温冷冻后可在液氮中（-196℃）长期保存种猪精液。3.3GB23238界定的术语和定义适用于本文件4质量要求4.1种猪体型外貌和生产性能等符合种用要求，三代系谱资料齐全，体质健康的公猪。4.2原精液色泽为灰白色或乳白色，精子活力≥85%，精子密度≥2亿个/mL，精子畸形率≤8%。4.3冷冻精液冷冻精液细管无裂痕，两端封口严密，所印字迹清晰易认、信息齐全；解冻后的质量应符合表1的规定。表1冻精解冻后质量要求项目标准剂型/ml0.51.05.0剂量/ml≥0.4≥0.8≥4.0精子活力/%≥60前向运动精子数/（108个/剂）≥0.6≥1.2≥6.0精子畸形率/%≤20精子顶体完整率/%≥60细菌数/cfu≤500≤1000≤5000病原非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒、高致病性猪蓝耳病毒、猪细小病毒和猪布X氏杆菌病原学检测呈阴性5抽样5.1抽样条件抽样场所应洁净、干燥和避光，抽样用具和样品容器应清洁，样品容器应具有保温和贮存性能。5.1.2抽样过程中，样品不得因抽样受到污染，应防止样品原有品质的变化。5.1.3当从外观可明显看出原始样品与同批样品品质不一致或冷冻精液棉塞端异常时，应立即停止抽样。抽样应由对抽样、液氮生物容器使用以及液氮特性等熟悉的人员执行。抽样的每头公猪样品应为同一生产批次的产品，抽样数量不得少于16支（含复检备样）。5.2抽样方法5.2.1抽样器具抽样时需具备下列器具：适用的抽样器（长镊子等）；b）液氮生物容器；c）广口保温容器；d）样品袋（其容量足够容纳所需抽的原始样品）。5.2.2操作步骤按随机抽样方法，对确定抽样的种猪，从其冷冻精液贮藏容器中随机抽取一个包装袋，迅速浸泡入盛有液氮的广口保温容器中。用抽样器在液氮中打开包装袋，从中抽出样品并装入贮精管中后再转移入样品袋中，然后把样品袋口扎紧。每个包装袋应栓系标签，详细注明抽样地点和日期、生产或销售单位名称、猪号、样品数、抽样人姓名以及其他需要说明的重要事项。5.2.2.4从广口保温容器中转移入液氮生物容器中，期间暴露在空气中的时间不应超过5S，样品应保存于液氮生物容器的液氮中，标签栓系在液氮生物容器的把手上，盖上盖子后密封液氮生物容器。6检验方法6.1冷冻精液试样制备6.1.1样品贮存存放冷冻精液的低温容器质量应符合GB/T5458规定，使用前经过清洗后加入新鲜液氮，样品浸泡在液氮中。抽放样品时在空中暴露时间不得超过5S。由专人保管样品，样品不允许脱离液氮，抽样登记单与样品随行。样品包装、标记应保持原样。6.1.2样品解冻检测4支细管分别直接置于50℃恒温水浴中解冻15S，解冻4支与稀释液混合后，抽精液约10μL置于载玻片上加盖玻片，立即放在载物台上，温度保持38℃，用精子质量分析系统（CASA）检测分析，也可用200X～400X显微镜观察活力，每样片观察3个视野，并应观察不同液层内的精子运动状态，进行全面评定。检验有效时限为解冻后2min～20min。6.2测定6.2.1外观测定采用目测法进行。6.2.2剂量、精子活力、直线前进运动精子数、精子畸形率的测定按GB23238-2021附录A中规定的方法进行。6.2.3细菌数测定按GB

4789.2-2016中规定的方法进行。6.2.3病原检测参见非洲猪瘟、口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪圆环病毒病、猪细小病毒病、布X氏杆菌病相关国家/行业标准。7检验规则7.1常规检验对种猪冷冻精液外观和精子活力的检验，通常是在生产批入库前和销售前的检验。7.2型式检验对种猪冷冻精液全部指标检验，在正常生产情况下，每季度至少进行1次型式检验。有下列情况之一时，亦应进行型式检验：a）产品定型投产时；b）生产工艺、配方或主要原料来源有较大改变，可能影响产品质量时；c）停产3个月以上，重新恢复生产时；d）常规检验结果与上次型式检验结果有较大差异时；e）行政管理部门提出检验要求时。7.3判定7.3.1所验项目全部合格，判定为该批次产品合格。7.3.2检验结果中有任何指标不符合本标准规定时，可自同批产品中重新加倍取样进行复检。若复检结果仍不符合本标准规定，则判定该批产品不合格。7.3.3各项目指标的极限数值判定按GB/T8170中修约值比较法执行。8标志、标签和随行文件8.1标志冷冻精液细管外壁应清楚标明生产站名、种猪品种代码、个体号、生产日期或批次。8.1.2种猪品种代码以畜禽遗传资源鉴定及审定部门公布的为准。8.2标签在硬纸板或无纺布上标注种猪品种代码、个体号、细管数量、包装日期、产品标准编号、生产许可证号、生产者名称和地址及、贮存方式和条件、使用说明等。标签信息可包括生产单位商标或徽标，以及可追溯的其他信息，有条件的单位宜使用二维码信息，但二维码信息中至少应包括8.2.1中的信息。8.3随行文件8.3.1随行文件应符合现行法律、法规。8.3.2随行文件应包括种猪系谱、检疫证明、冷冻精液检验合格证明、生产经营许可证等。9包装、运输和贮存9.1包装包装应在液氮或-140℃以下的环境中进行。将冷冻细管分批次装入贮精管，包装后的细管冷冻精液其棉塞端应朝向贮精管的底部，不得倒置。用灭菌纱布袋将装有冷冻精液的贮精管包装起来，一个灭菌纱布袋一个个体，每一包装量不得超过100剂。9.2运输应在贮存容器的明显位置呈现“向上”“小心轻放”等符号图示标志。运输过程中贮存容器不得碰撞或剧烈震动。9.3贮存种猪冷冻精液应贮存