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文档简介
细胞周期调控贾梦应,孙存欢,吴波,段作翠1细胞周期时相组成①间期(interphase):G1phase,Sphase,G2phase②有丝分裂期(Mitosis):Mphase,又称胞质分裂期(Cytokinesis)细胞沿着G1→S→G2→M→G1周期性运转,在间期细胞体积增大(生长),在M期细胞,先是核分裂,接着胞质分裂,完成一个细胞周期.该过程是不可逆的。2细胞周期是一种非常复杂和精细的调节过程,有大量调节蛋白参与其中。此过程的核心是细胞周期依赖性蛋白激酶(CDKs)。CDKs的激活又依赖于另一类呈细胞周期特异性或时相性表达的细胞周期(cyclins),而CDKs调节的关键步骤是细胞周期检查点。PLKs是多种细胞周期检查点的主要调节因子,Aurora蛋白激酶主要在细胞有丝分裂期起作用。34自体静脉旁路移植术是临床上治疗动脉阻塞性疾病的重要手段常用于冠心病和动脉硬化闭塞症的重建。但由于内膜增生(HR)及后期的移植段血管中远期狭窄和闭塞影响了治疗效果。现有资料证明。IH的发生为多种因素综合作用的结果,其中血管平滑肌细胞(SMC)像内膜并过度增殖是其病变演变的重要环节。而SMC的增殖,则有赖于细胞周期的进入和进行。567RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。8实验材料CDK2,CDK4多克隆抗体,CDK2,CDK4,内参照物β-Actin
9101112131415β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是WesternBlot很好的内参指数。内参即是内部参照(InternalControl),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。常用的蛋白质内参有细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin和GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase)等。因此β-Actin抗体、β-Tubulin抗体以及GAPD
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