盐胁迫白三叶产生的蛋白质

盐胁迫白三叶产生的蛋白质第一页，共十七页，编辑于2023年，星期三目录1.实验目的及意义2.实验方法3.实验结果4.结论5.致谢第二页，共十七页，编辑于2023年，星期三1.实验目的及意义

用不同浓度的NaCl（50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、250mmol/L）对白三叶进行盐胁迫，诱导其产生盐胁迫蛋白，因为盐胁迫蛋白多为水溶蛋白，本实验通过分析盐浓度与水溶蛋白的关系，探究白三叶对盐胁迫的蛋白响应。白三叶是优良的草坪草。另外，白三叶具有固氮能力，可提高农作物产量。但是近年来由于土地盐渍化严重，极大的影响白三叶的生长和种植。因此，研究白三叶盐胁迫蛋白与NaCl浓度间的关系对城市美化，发展农牧业方面都有重要的作用。返回第三页，共十七页，编辑于2023年，星期三2.实验方法蛋白量的差异分析蛋白大小差异分析白三叶的培养1、种子培养：催芽，移栽。2、盐胁迫：用NaCl溶液每24h递增50mmol/L，至终浓度。3、蛋白样品制备：将白三叶组织研磨倒入提取液，浸提，离心。首先制作标准曲线标准方程然后分别对白三叶叶片，根，茎的水溶蛋白和总蛋白做紫外分光光度测量。使用SDS分析叶片总蛋白。1，配置试剂；2，电泳；3，染色和脱色。返回第四页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析1.1白三叶叶片蛋白量分析

对照50mmol/L100mmol/L150mmol/L200mmol/L250mmol/L总蛋白浓度(ug/mg)25.10±0.02225.01±0.01631.04±0.01432.07±0.02331.11±0.01930.05±0.011水溶蛋白浓度(ug/ml)1.12±0.0151.21±0.1121.91±0.1213.01±0.0192.66±0.0102.18±0.03叶片水溶蛋白在峰值(150mmol/L)时的蛋白浓度与对照组相比增加了168%，相比而言总蛋白增加了27.8%，两者之差140.2%。第五页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析叶片中水溶蛋白的比例图：叶片中水溶蛋白占总蛋白的比例峰值在150mmol/L出现，为9.04%。峰值(150mmol/L)的水溶蛋白相对量与对照组相比增加4.58%。第六页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析1.2白三叶根部蛋白量分析

对照50mmol/L100mmol/L150mmol/L200mmol/L250mmol/L总蛋白浓度(ug/ml)25.20±0.10125.23±0.02425.69±0.02126.56±0.05429.92±0.12128.01±0.109水溶蛋白浓度(ug/ml)1.20±0.1621.21±0.0341.29±0.1421.44±0.1051.89±0.1301.60±0.071根部中水溶蛋白质在峰值(200mmol/L)时的蛋白浓度与对照组相比增加了57.5%，相比而言总蛋白增加了18.7%两者之差38.8%。第七页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析根部水溶蛋白的比例图：根部水溶蛋白占总蛋白的比例峰值(200mmol/L)为6.33%，对照组为4.76%，峰值和对照组相比增加了1.57%。第八页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析1.3白三叶茎部蛋白量分析茎中水溶蛋白质在峰值(150mmol/L)时的蛋白浓度与对照组相比增加了51.30%，相比而言总蛋白增加了20.98%，两者之差30.32%。对照50mmol/L100mmol/L150mmol/L200mmol/L250mmol/L总蛋白浓度(ug/mg)20.21±0.10120.37±0.12422.15±0.02124.45±0.05422.92±0.12122.73±0.109水溶蛋白浓度(ug/ml)0.84±0.1620.94±0.0341.06±0.1421.27±0.1051.24±0.1301.13±0.171第九页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析茎部水溶蛋白的比例图：茎部水溶蛋白占总蛋白的比例的峰值在150mmol/L出现5.52%，对照组为4.16%。峰值和对照组相比增加了1.36%。第十页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析1.4综合上述结果(1)白三叶叶片中水溶蛋白的合成量高于根和茎，说明白三叶的叶片对盐胁迫的蛋白响应最明显。(2)虽然白三叶叶片中有大量蛋白质合成受阻，但这些蛋白质的减少并没有影响到白三叶的正常生长，可能是新合成的水溶性蛋白代替了这些合成受阻的蛋白的生理功能。第十一页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析2.1SDS结果第十二页，共十七页，编辑于2023年，星期三3.结果及分析2.1.1由图可知(1)在150mmol/L时产生31KD盐胁迫蛋白；(2)Protein3，Protein5，Protein8的消失；(3)Protein7在100mmol/L时骤变。返回第十三页，共十七页，编辑于2023年，星期三4.结论（1）不同浓度NaCl处理过的白三叶根、茎、叶的水溶蛋白的表达量不一样，其中叶片的表达量最多，叶片中水溶蛋白对盐胁迫的响应最敏感。另外，随着NaCl浓度的升高，叶片的总蛋白增加了，但是相对总蛋白的增加量来说水溶蛋白增加的更多。第十四页，共十七页，编辑于2023年，星期三4.结论（2）白三叶的盐胁迫浓度阀值为100mmol/L，此浓度下时出现了一个24KD水溶性蛋白，该蛋白质可能是白三叶在受到高浓度盐胁迫时产生的应激性蛋白。(3)当盐浓度为150mmol/L时，白三叶总蛋白中出现了一个新的31KD蛋白，可能是盐胁迫蛋白。第十五页，共十七页，编辑于2023年，星期三5.致谢

首先要感谢我的指导老师，闫秋洁老师，她在完成繁重的科研任务的同时，从论文的选题、构思、试验设计与结果观察到撰写的整个过程中，悉心指导，倾力相授，老师对科研一丝不苟、严肃认真的态度将使我受用终生。同时还要感谢罗院长，姜立春、边春象等老师的热忱帮助，在此还