部分发酵产品生产工艺及培养基配方

部分发酵产品生产工艺及培养基配方96年9因为党的“九’发酵罐工业化生我国195年96年9因为党的“九’发酵罐工业化生产试验2．1试验材料与方法2 1菌种：一2．1．2试验地点：湖南生物制药厂．2．1．3培养基①种子培养基（实罐消毒12℃②发酵培养基发酵罐投料

子培养液．/ :葡萄糖1糊精1花生粉1 -消泡剂.自来水配制，自然值种子罐中投料330分钟，冷却至28℃待接种。/ ）玉米淀粉7糊糖2 5豆饼粉.花生粉O 2O消沫剂.5—淀粉酶 。值自然，实罐消毒 ，分钟，冷却至8后接入种21发酵设备；种子罐 ，二档搅拌.发酵罐体积 。，三档搅拌.流加罐用另一种子罐代替．2．1．5发酵条件TOC\o"1-5"\h\z种子罐：培养温度8士℃,通风量： /,罐压.一. / .发酵罐：培养温度士℃,通风量：. /,罐压.一. /赤霉素发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，通风量1分，培养温度大多采用。。〜℃。培养基的起始值控制在左右，而将发酵过程的值维持在〜之间为宜。种子培养基:葡萄糖，蒸馏水。豆饼粉，淀粉，葡萄糖， 4 .，，自来水。发酵培养基：豆饼粉 ％.淀粉%,葡萄糖％, %,%,淀粉酶%， 〜发酵周期 小时阿维菌素：TOC\o"1-5"\h\z种子培养基 ：淀粉，豆饼粉，酵母粉 ， -． ．。发酵培养基/ ：淀粉，玉米粉，酵母粉，豆饼粉， 3．， 。妥布霉素发酵培养基：黄豆饼粉；葡萄糖；玉米粉；玉米淀粉；S鱼粉； ；油； ； 温度℃发酵时间 左右。发酵菌种采用黑暗链霉菌。洛伐他汀培养基：淀粉，黄豆饼粉，葡萄糖，玉米浆，发酵菌种采用红曲菌株，。发酵周期天。发酵菌种采用红曲菌株，。发酵周期天。甾体激素氢化可的松菌种蓝色犁头霉 3培养基葡萄糖.酵母膏,玉米浆，硫酸铵.值〜；，8培养 ，投入的 （发酵底物醋酯化合物： 一羟基孕甾一一烯一3 一二酮一一醋酸酯，）A然后转化〜 2综上所述，在利用整肠生菌 等杆菌发酵生产杆菌肽中，因为前期微生物生长繁殖迅速，碳源消耗量较大。在发酵中后期的碳源主要用于杆菌肽次级代谢产物的合成，故碳耗较平稳。所以碳源不宜过多，％一%为宜。同时杆菌肽生产与其它抗菌素生长碳源不同，实验表明，加入3％柠檬酸作为碳源最佳，以保证菌体迅速生长。如果中后期碳浓度过高，会引起菌体生长太快，而减少杆菌肽合成。所以，对碳源种类的选择和控制至关重要，在选择适合种类碳源的条件下，碳源量的控制方法可采用碳比消耗速率、菌体比生长速率和控制流加碳源速度。同时，因为过量磷酸盐对杆菌肽前体氨基酸形成有抑制作用，从而干扰杆菌肽的合成。所以，无机磷酸浓度应控制在.〜. /L以便既能满足菌体生长需要又不影响杆菌肽的合成。此外用整肠生菌发酵生产杆菌肽，发酵为.，发酵时间为 为宜。杆菌肽是利用整肠生菌发酵为75发酵时间为杆菌肽发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，通风量1分，罐压0.公7斤，pH左7右.，5培养基主要成分为液化淀粉,豆粕，柠檬酸，各种无机盐适量，发酵菌种采用整肠生菌,发酵周期40小时。井岗霉素属氨基环醇类抗生素，是一种抗水稻纹枯病的农用抗生素，具有药效高，无毒副作用，持效时间长的特点，是一种重要的农用抗生素。井岗霉素产生菌是在我国井岗山地区土壤中分离出的吸水链霉菌的一个变种，定名为吸水链霉菌井岗变种 ，属好氧放线菌。井岗霉素的工业生产过程如下：筛选后的菌种经固体增殖培养后，接入种子罐，在下，通气培养 后，移入发酵罐，在 0通气量.〜.条件下，发酵 放罐，将发酵液过滤后，浓缩至所需浓度，成品包装。井岗霉素 年通过鉴定并开始工业生产，但因为种种原因对其发酵过程并未进行系统地研究。同时，发酵工艺也维持在传统的间歇发酵方法，因而井岗霉素发酵的水平俗称效价一直徘徊在一万单位 左右，仅为实验室发酵水平的70。%宁南霉素水稻自叶帖病是水稻生产上的三大病害之一．化学农药虽然有控制该病的作用，但造成环境和农产品污染，直接影响人、畜健康，宁南霉素为首次发现的胞嘧啶核苷肽型新抗生素．它是一种高效，低毒，低残留的广谱性农用抗生索。它对水稻白叶枯病平均相对防治效果为70左%右．高的可达90，%一般增产效果为一，高的可达.另外它对小麦.蔬菜，花卉等白粉病的防病，增产效果都很显著，对水稻小球菌棱病和油橄榄孔雀斑瘸、疮痂病也有良好的防治效果。宁南霉：玉米粉淀粉.花生饼粉,酵母粉，无机盐按原用量不变0。1菌种：诺尔斯链霉菌西昌变种。1．1．2培养基：孢子斜面培养基(％)：可溶性淀粉2蔗糖1，硝酸钾1，磷酸氢二钾0．5，硫酸镁.5氯化钠.5碳酸钙.5硫酸亚铁.1琼脂，灭菌前〜7．4。种子培养基(％)：玉米粉2，黄豆饼粉3，酵母粉0．01，磷酸氢二钾0．01，硫酸镁. 2氯化钠.2碳酸钙.3灭菌前.。发酵培养基(％)：玉米粉2，花生饼粉3．5，酵母粉0．05，磷酸氢二钾0．0，硫酸镁.5氯化钠.3碳酸钙.5灭菌前.。1．1．3发酵流程：续发酵 达到发酵高峰。阿维菌素：多抗霉素参考发酵培养基％)玉米粉：，豆饼粉：，饴糖：， ：， : ， : ， 6 %接种量，℃, 。一系列发酵罐间歇发酵结果表明：该茵生长的最适在.一.2弱碱性条件有利于芽泡及晶体的形成；增加培养基中糖含量显著提高茵体的生长量，但对芽泡及晶体的形成均有一定影响；高通气量有利于菌的生长，并可缩短发酵周期，但后期通气量过大影响芽泡及晶体形成。该菌制刑发酵罐间歇发酵的最佳工艺条件为：控制发酵温度在O,发酵前期包括延迟期、加速期、对数期控制在.，采用达1. /. 的大通气量，达12 / - ,为菌的生长提供良好的环境，尽可能提高菌数高于.的次方/；发酵后期减速期、恒定期不控制，并适当减小通气旦到：. ：./ /n更有利于茵体向芽孢及伴孢晶体转化％以上。液体培养基％ 号培养基：牛肉膏.5蛋白胨i5 05 72号培养基：牛肉膏.5蛋白胨i5 . 5葡萄糖.，衣康酸发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，通风量1分，罐压公斤，在左右，培养基主要成分为葡萄糖米糠，各种无机盐适量，发酵菌种采用土曲霉,发酵周期90小时。曲酸发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，通风量1分，罐压公斤，在左右，培养基主要成分为液化淀粉各种无机盐适量，发酵菌种采用黄曲霉糠发酵周期13小0时。实验以豆腐渣、黄浆水为主要原料利用米曲霉发酵生产曲酸，对发酵生成曲酸所需添加的各种营养因素和发酵条件进行了研究。得出该菌利用豆渣的最佳发酵培养基为：豆渣％、麸皮4、酵母膏1%、 - . %,为自然；接种量为％，每 三角瓶装量为 ，在℃发酵培养，〜菌体生长量和曲酸产量最大。米曲霉利用黄浆水生产曲酸的最佳发酵培养基为：葡萄糖％、酵母膏.%、 • . %、 . 5、黄浆水%，为.，接种量％。每三角瓶装量在O转速为/ 的摇床振荡发酵培养，〜菌体生长量和曲酸产量最大。对米曲霉沪酿

3曲酸发酵工艺条件进行了研究，分析了碳源、氮源、、装液量对曲酸产酸量的影响，获得了最优摇瓶培养条件：％蔗糖、％蛋白胨、=2装液量 三角瓶L发酵温度0、摇瓶转速 条件下达最高产酸量- -从土壤中分离出一株曲酸产量较高的米曲霉菌株，对该菌株的发酵条件进行了初步研究。结果表明，该菌株在淀粉%、酵母膏0 ％、 •O%、 %、 、的培养基中，8恒温摇床据荡培养，摇瓶发酵液曲酸含量为. /变株是以 米曲霉经次紫外诱变处理，采用快速筛选方法而获得的突变株，研究了 变株发酵工艺条件，经过正交试验得出该突变株最佳发酵培养基为：玉米淀粉10%，酵母膏0．2%，移种量为％，每三角瓶装量，时间天，发酵培养基最适温度为℃。柠檬酸发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速 转分，通风量1分，罐压0.公7斤，在左右，培养基主要成分为液化淀粉 各种无机盐适量，发酵菌种采用黑曲霉,发酵产酸温度为〜6,发酵周期小时。TOC\o"1-5"\h\z谷氨酸发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，通风量i分，罐压公斤，在左右，培养基主要成分为葡萄糖，硫酸镁 ，磷酸二氢钾0.0，8糖%蜜0.0，5氯%化钾0.1，%发酵菌种采用谷氨酸棒杆菌种发酵周期30小时。赖氨酸发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，通风量i分，罐压公斤，在左右，培养基主要成分为葡萄糖，硫酸镁 ，硫酸铵%硫酸氢二钾，尿素，豆饼粉5发酵菌种采用谷氨酸棒杆菌种发酵周期35小时。种子培养基：葡萄糖1．5，g种子培养基：葡萄糖1．5，g2 ,尿素. ，盐酸豆饼水解液 ，水发酵培养基：葡萄糖 ，玉米浆5乙酸铵9生物素,水，〜 。 ℃高压灭菌3乙酸铵 1P 0.〜7 4 ℃高压灭菌 。go 、• ,盐酸豆饼水解液赤藓糖醇在%葡萄糖，。%酵母膏， 、的发酵培养液中，于℃发酵摇瓶天，可产赤藓糖醇 。推荐产品： 。在分批培养中，葡萄糖的开始浓度 /，赤藓糖醇的容量生产率最高葡萄糖的浓度控制在 /，容量生产率最高，赤藓糖醇的生。迟缓时间缩短。补料分批培养的葡萄糖开始浓度是/.控制的葡萄糖浓度是/L，磷源是肌醇六磷酸植酸一在这样的补料分批培养中，/葡萄糖，小时的赤藓糖醇最后产量为 /相当于容量生产率 /，产率8醇酮类物质发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，罐压公斤，最高通风量1分，在左右，发酵培养基主要成分为液化淀粉，发酵菌种采用芽孢杆菌，发酵时间80小时左右。碱性蛋白酶发酵菌种为芽孢杆菌 ， ℃，培养，发酵培养基：可溶性淀粉%、蛋白胨％、 %、TOC\o"1-5"\h\z%3 %0中性、 ℃灭菌 r发酵培养基：玉米粉%、豆饼粉%、麸皮％、 ％、KH2P04%0、.Z0n3Cl2%0、.p1H8、.102℃1灭菌2、m。in发酵培养基 ：黄豆饼粉，玉米粉，麸皮， .，p4 ;自然，在6下通风培养，前期通风：.、后期通风：0 2搅拌左右。低温碱性蛋白酶：黄海黄杆菌发酵培养基TOC\o"1-5"\h\z豆饼粉水解液，加.a℃水解，冷却、过滤.、玉米浆酶解液.购自华北制药厂、 .、 ・ 、 ，.、O、 ：、泡敌约.％。视具体情况及时补加, 7 ℃灭菌。豆饼粉水解液.加. ， ℃水解，冷却、过滤、葡萄糖、 、、 、 、 、、泡敌约％、视具体情况及时补加, 。、灭菌分批发酵动力学试验使用瑞士 公司 型自动控制发酵罐进行分批发酵。发酵罐容积 .两层六平直叶搅拌，双挡板。采用..节培养基，装料系数.，接种量,培养温度8，以/ 液调节 左右，通气量：、搅拌速度 〜 / ，控制溶氧在 〜之间。补料分批发酵试验使用瑞士 公司 型自动控制发酵罐进行补料分批发酵。发酵罐容积、两层六平直叶搅拌，双挡板。采用..节培养基，装料系数.4接种量，培养温度℃，以/液调节 左右，通气量：、搅拌速度〜 /，控制溶氧在〜之间。当细胞进入对数生长期后以60葡、萄糖补料，控制底物浓度并及时取样测定糖浓度、细胞浓度及总酶活力。弹性蛋白酶发酵培养基酪蛋白胨、、，葡萄糖4、，玉米提取液2 7发酵菌种为芽孢杆菌，发酵培养8产8产0耐温酸性蛋白酶的发酵条件进行优化，由试验结（1麸）皮和豆饼粉分别是该菌发酵产生酸性蛋白酶的良好碳源和氮源．（2通）过正交试验优化培养基，确定其最适产酶培养基为/）麸皮.豆饼粉. 1 O 培养基起始为〜5接种量发酵液中义 次方个孢子，发酵温度℃，时间 ，酸性蛋白酶的产量达到最高，平均酶活达豆700．u/m1中性蛋白酶：菌种耐热芽孢杆菌9从新疆吐鲁番火焰山土壤里分离筛选而得.种子培养基组分/ :玉米粉2豆饼粉，磷酸氢二钠，硫酸镁，氯化钙0.0．2发酵培养基组分/ :玉米粉2豆饼粉，葡萄糖，磷酸氢二钠，碳酸钠0.0，养硫5酸镁0.0，2氯化钙0.0．2发酵罐发酵工艺参数为：将培养 的种子罐种子，以％接种量移种于 发酵罐，6、 /i/• 通气量下发酵培养左右，测定发酵酶活达 /以上，还原糖含量低于0％,镜检有大量芽孢产生时即可终止发酵，为保证后处理过程中酶活不会大量损失，需迅速降温．植酸酶发酵参考环境：〜 吨罐，搅拌转速 转分，罐压 公斤，最高TOC\o"1-5"\h\z通风量：分，在左右，发酵培养基主要成分为甘油和氨水，发酵菌种采用毕赤酵母，发酵时间14小0时左右。推荐产品： 。碱性淀粉酶发酵培养基（%：玉酵母膏0．5、玉米淀粉2.、0玉米浆1.、5豆饼粉. . . HH补料培养基：蛋白胨.玉米淀粉.、玉米浆 、 ， 、 、3 、地衣芽孢杆菌 耐高温淀粉酶的发酵培养基 玉米淀粉，豆粕，磷酸盐，氯化钙等，发酵周期6、小时。普通中温淀粉酶菌种一淀粉酶枯草芽孢杆菌 变异株具有较高的产活力，其最适为75最适碳氮比为.41淀粉酶发酵培养基：玉米粉，豆饼粉，磷酸氢二钠、，硫酸铵O，氯化钠、5灭菌前.一75灭菌后 .一7、士℃下培养〜小时。TOC\o"1-5"\h\z纤维素酶发酵培养基为： 、 .2 、 、酵母膏1．、、/M/S、4*、蛋白陈、 自然，纤维素酶种子培养基质量分数，％：麸皮，葡萄糖3 1 〜、 〜。0,培养；发酵培养基质量分数，％）稻草粉,豆饼粉，、 2 〜、〜℃，培养。发酵菌种采用黑曲霉 s糖化酶发酵培养基：玉米粉4豆饼粉，麸皮。发酵菌种采用黑曲霉4℃培养 淀粉先用耐热细菌淀粉酶液化。黄原胶发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，罐压公斤，最高通风量1分，在左右，发酵培养基主要成分葡萄糖，酵母粉。豆粕粉，无机盐适量，发酵菌种采用黄单孢菌，8发酵周期，发酵液最高粘度 左右。虫草多糖：发酵参考环境：〜 吨罐，搅拌转速 转分，通风量分，罐压0.公5斤。发酵培养基中葡萄糖4.0，%黄豆饼粉4.0，%酵母膏, ,培养〜小时。纤维素合成的发酵配方:的细菌发酵培养基：葡萄糖 蔗糖蛋白胨醋酸 磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 硫酸镁。最适添加量为 时纤维素产量达最大添加 烟酸、生物素和 乙醇时纤维素产量达木醋杆菌1.18发1酵2产细菌纤维素的适宜培养基和条件是:蔗糖5%蛋,白胨柠檬酸NaHPO•HOKHPOMgSO•HO乙醇pH值 温度℃培养周期d。细菌纤维素产量干重为gL。发酵完毕后过滤收集粗纤维再用NaOH溶液冲洗去离子水和0.5乙%酸反复冲洗,即获细菌纤维素。木醋杆菌 种子培养基中葡萄糖 ，玉米浆,生物素， 柠檬酸 。将菌龄为的液体种子，按的接种量，在 摇床中培养后静止培养，纤维素产量高达 ，是国内外报道的未进行诱变育种产纤维素的最高值。发酵培养基生物素 ， 柠檬酸 其余同种子培养基。醋杆菌C2的最适碳源为D甘露糖醇和蔗糖，最适氮源为酵母粉，蛋白胨，无机盐为 - 和柠檬酸三钠；该菌株产酶最佳培养基配方为：蔗糖7%,酵母膏07%,蛋白胨1.1%,MgSO4-7H2O02%,柠檬酸三钠01%。使用该培养基配方发酵醋杆菌C2,纤维素产量可达9.5g/L青霉素菌种：产黄青霉一；培养基：发酵培养基，一玉米浆，磷酸二氢钾，碳酸钙，麸质粉，葡萄糖。将长好的种子移入。自动发酵罐。发酵过程各参数控制：值.〜65空气流量/,转速/,培养温度25℃,单糖浓度46.8%,发酵全过程采用控制补料。从60小时带放后每4小时补加一次玉米浆，每次补入 直到放罐。发酵单位测定是利用高压液相色谱仪用外标法测定。发酵培养：种子培养基移入发酵罐后接种量为： ，培养温度维持在6,通气率为 ，罐顶压力0 ，用/和/维持.左右。发酵培养基：黄豆粉1.5，棉%籽粉2%，花生粉3，%磷酸二氢钾0.1，5硫%酸铵1%，碳酸钙0.1，5葡%萄糖0.3，0苯%氧乙酸0.5，7硫%酸钠0.5，4发%酵菌种：产黄青霉，发酵周期14小0时。种子培养阶段通风1头孢菌素发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，罐压 公斤，最高通风量1分，在左右， 种子培养基：玉米浆、蔗糖、葡萄糖、一蛋氨酸、豆油、 ，3 〜。发酵培养基：玉米浆、淀粉、糊精、蛋氨酸、葡萄糖、豆油、 FH〜。发酵菌种采用顶头孢霉，周期 小时螺旋霉素发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，罐压公斤，最高通风量1分，在左右，培养基主要成分为？，发酵菌种采用螺旋霉素链霉菌，发酵周期13小0时左右。根据螺旋霉素生物合成的研究结果，短链脂肪酸是合成螺旋霉素的前体结果发现在发酵培养后添加。浓度的乙醇，能够提高其发酵效价左右表加入豆油能较大幅度地提高螺旋霉素的发酵效价。在培养 时加入较在基础料中加入更能提高螺旋霉素发酵效价，豆油的浓度以1为浓好。新霉素发酵参考环境：〜吨罐，搅拌转速转分，罐压公斤，最高通风量1分，在左右，培养基主要成分为热榨的黄豆饼粉，菌友的酵母粉、蛋白胨，发酵菌种采用？菌，发酵周期13小0时左右。推荐产品： 。在新霉素发酵过程中，需不断补充碳源糖和氮源硫酸铵）若一次补人的糖量太多且供气不足时，碳源氧化不完全，会导致有机酸堆积，则值下降；当培养基中的蛋白质、氨基酸或其它含氮的有机物中碳被利用后，将释放出游离使 值上升。同样，一次补人糖和硫酸