第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析

第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析第一页，共三十八页，编辑于2023年，星期一本章内容第一节结构与性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质的检查第四节含量测定第五节体内药物分析（自学）第二页，共三十八页，编辑于2023年，星期一第一节结构与性质乙胺含苯环的基团

苯乙胺类1、苯环常被活泼的酚羟基取代2、具有碱性的脂肪乙胺侧链，易于被氧化*拟肾上腺素类药物具有收缩血管、升高血压、散大瞳孔、舒张血管等药理作用，临床上常用于升压、平喘、充血治疗等，应用广泛。第三页，共三十八页，编辑于2023年，星期一一、基本结构(Structure)拟肾上腺素类药物，分子结构中具有苯乙胺基本结构儿茶酚胺类第四页，共三十八页，编辑于2023年，星期一苯环没有羟基取代，中枢作用加强α位有烃基，α-C为手性C第五页，共三十八页，编辑于2023年，星期一弱碱性：

烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性。游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水酚羟基特性：邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在碱性溶液中更易变色。*光学活性：手性碳原子，具有旋光性苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基；紫外、红外吸收特性二、化学性质(feature)第六页，共三十八页，编辑于2023年，星期一第二节鉴别试验(identification)一、与三氯化铁反应(酚羟基)药物三氯化铁肾上腺素Adrenaline0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色盐酸异丙肾上腺素Isoprenalinehydrochloride深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenalinebitartrate翠绿色，加5%碳酸氢钠试液显蓝色，红色盐酸去氧肾上腺素Phenylephrinehydrochloride紫色盐酸多巴胺Dopaminehydrochloride墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫红色硫酸沙丁胺醇Salbutamolsulfate硫酸沙丁胺醇加三氯化铁试液2滴，振摇，溶液显紫色；加碳酸氢钠试液，即成橙黄色浑浊液第七页，共三十八页，编辑于2023年，星期一二、与甲醛－硫酸反应具有酚羟基取代的本类药物，可与甲醛在硫酸中反应，形成具有醌式结构的有色化合物。肾上腺素显红色，盐酸异丙肾上腺素显棕色至暗紫色，重酒石酸去甲肾上腺素显淡红色，盐酸去氧肾上腺素为显玫瑰红→橙红→深棕红的变化药物甲醛－硫酸肾上腺素Adrenaline红色盐酸异丙肾上腺素Isoprenalinehydrochloride棕色，暗紫色重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenalinebitartrate淡红色盐酸去氧肾上腺素Phenylephrinehydrochloride玫瑰红，橙红，深棕红第八页，共三十八页，编辑于2023年，星期一三、氧化反应（酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色）肾上腺素碘或过氧化氢中性或酸性肾上腺素红放置棕红色多聚体盐酸异丙肾上腺素偏酸性条件碘异丙肾上腺素红硫代硫酸钠淡红色溶液重酒石酸去甲肾上腺素酒石酸氢钾饱和液pH3.56碘试液放置5min硫代硫酸钠溶液为无色或仅显微红色或淡紫色肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素明显的深红棕色或紫色第九页，共三十八页，编辑于2023年，星期一四、双缩脲反应 盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。

例：Chp2010，鉴别盐酸麻黄碱 方法：取本品1%水溶液1ml，加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠液1ml，即显蓝紫色，加乙醚1ml振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。盐酸去氧肾上腺素的鉴别：乙醚层不显色，可与盐酸麻黄碱区别

第十页，共三十八页，编辑于2023年，星期一五、与亚硝基铁氰化钠反应(Rimini试验)

重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基重酒石酸间羟胺水溶解亚硝基铁氰化钠试液丙酮(无甲醛)数滴，碳酸氢钠少量△红紫色Rimini反应例子第十一页，共三十八页，编辑于2023年，星期一药物溶剂浓度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)重酒石酸间羟胺水0.10272盐酸异丙肾上腺素水0.052800.50盐酸多巴胺0.5%硫酸0.03280盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍水0.012340.60盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274盐酸伪麻黄碱水0.50251,257,263六、UV和IR第十二页，共三十八页，编辑于2023年，星期一第三节特殊杂质检查

(Detectionofspecificimpurities)一、酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。降解产物肾上腺素红多聚体第十三页，共三十八页，编辑于2023年，星期一通过UV光谱检测Ch.P2010第十四页，共三十八页，编辑于2023年，星期一紫外分光光度法检查酮体的条件及要求

药物杂质

溶剂C(mg/ml)λ(nm)A肾上腺素

肾上腺酮HCl(9→2000)2.0310≤0.05盐酸去氧肾上腺素

酮体

水2.0310≤0.20重酒石酸去甲肾上腺素去甲肾上腺酮

水2.0310≤0.05盐酸异丙肾上腺素

酮体

水2.0310≤0.15盐酸甲氧明

酮胺

水1.5347≤0.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求第十五页，共三十八页，编辑于2023年，星期一二、光学纯度检查大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子结构中存在手性碳原子通过比旋度测定控制药物的质量ChP2010

药物

溶剂C(mg/ml)比旋度肾上腺素HCl(9→2000)20-50.0~-53.5盐酸去氧肾上腺素

水20-42~-47重酒石酸去甲肾上腺素

水50-10.0~-12.0盐酸麻黄碱

水50-33~-35.5盐酸伪麻黄碱

水50+61.0~+62.5第十六页，共三十八页，编辑于2023年，星期一

手性药物光学纯度检查的最佳方法是实现对映体分离分析，目前常用的方法为色谱法和电泳法重酒石酸去甲肾上腺素的光学纯度检查：称取重酒石酸去甲肾上腺素消旋体约50mg溶于5ml蒸馏水中，滴加氨水调pH为78；以乙酸乙酯萃取3次，所得乙酸乙酯层用蒸馏水洗涤2次，再用1g硫酸钠脱水，过滤除去硫酸钠，得到溶液置于50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得手性分离系统适用性溶液。同法制备(R)-重酒石酸去甲肾上腺素供试品溶液。取20l注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定。用ChiralpakAD-H色谱柱，以正己烷-乙醇-乙醇胺(800∶200∶2)为流动相；检测波长为280nm；流速0.8ml/min。对映体的分离因子为7.2。通过手性高效液相色谱法分离，按峰面积归一化法，可以测定重酒石酸去甲肾上腺素的光学纯度p227例7-8第十七页，共三十八页，编辑于2023年，星期一A.TLC法——盐酸去氧肾上腺素

B.纸色谱法——盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查（Chp2010版）C.HPLC法：大多数药物均采用此法

肾上腺素中有关物质的检查（供试品溶液自身稀释对照法）三、有关物质检查Ch.P2010第十八页，共三十八页，编辑于2023年，星期一第四节含量测定(Assay)原料：非水溶液滴定法、溴量法、亚硝酸钠法制剂：比色法、提取容量法、紫外分光光度法、高效液相色谱法第十九页，共三十八页，编辑于2023年，星期一一、非水溶液滴定法(弱碱性)定义：是指在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法.应用：主要用于测定有机碱及其氢卤素盐、硫酸盐以及有机酸碱金属盐类药物的含量，也用于测定某些有机弱酸的含量。溶剂的种类：酸性溶剂：冰醋酸碱性溶剂：DMF两性溶剂：甲醇惰性溶剂：氯仿，甲苯，丙酮第二十页，共三十八页，编辑于2023年，星期一为什么要应用非水滴定法？

这是因为本类药物多为弱碱性，在水溶液中用酸碱滴定液直接滴定没有明显的突跃，终点难以观测，常不能获得满意的测定结果。而在非水酸性溶剂中，只要在水溶液中的pKb<10，均可以被冰醋酸均化到溶剂醋酸根水平，相对碱度显著增强。因而可使弱碱性的药物都能顺利进行滴定。第二十一页，共三十八页，编辑于2023年，星期一非水溶液滴定法——主要用于原料药的测定弱碱BpKb<10则在水溶液中无法进行滴定以高氯酸滴定弱酸为例，在冰醋酸中：BH+A-+HClO4BH+ClO4-+HA有机弱碱盐：原理第二十二页，共三十八页，编辑于2023年，星期一一般方法供试品量（8ml滴定液），冰醋酸或醋酐，（5%醋酸汞的冰醋酸溶液）高氯酸滴定液（0.1mol/L），结晶紫.空白试验.

冰醋酸为溶剂醋酸汞消除氢卤酸的干扰加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐伯氨基的乙酰化物不能用结晶紫为指示剂若碱性较弱则加醋酐使突跃明显第二十三页，共三十八页，编辑于2023年，星期一讨论

适用范围:Kb<10-8的有机碱8＜pKb＜10冰醋酸作溶剂10＜pKb＜12冰醋酸+醋酐pKb＞12醋酐醋酐解离生成的醋酐合乙酰离子[CH3CO+·(CH3CO)2O]比醋酸合质子[H+·

CH3COOH]的酸性更强，更有利于碱性药物的碱性增强。

酸根影响:在醋酸溶剂中：置换顺序：高氯酸>氢溴酸>硫酸>盐酸>硝酸>磷酸>有机酸。不同的酸对滴定终点的显示有影响，对滴定结果也有影响！！第二十四页，共三十八页，编辑于2023年，星期一

滴定剂稳定性:

醋酸具有挥发性，且膨胀系数较大，因此温度和储存条件影响滴定剂的浓度。标定与滴定时温度超过10度，应重新标定，如未超过10度，应对浓度进行校正：N1=N0/[1+0.0011(t1-t0)]

终点指示方法:电位法和指示剂法电位法：指示电极：玻璃电极参比电极：饱和甘汞电极指示剂：结晶紫，橙黄Ⅳ，萘酚苯甲醇，喹哪啶红，孔雀绿等注意：指示剂的终点颜色变化，均需要用电位滴定法来确定。第二十五页，共三十八页，编辑于2023年，星期一1.游离弱碱药物测定:如吡啶类、苯并二氮杂卓类直接测定，根据碱性强弱不同选择不同的具体条件。2.HX酸盐类：如吩噻嗪类加醋酸汞应用实例在冰醋酸中不解离BH+Cl-+HClO4→BH+ClO4-+HClBH+Cl-+Hg（Ac）2→2BHAc+HgCl2BHAc+HClO4→BH+ClO4-+HAc醋酸汞的量要加足，否则测定结果偏低河北医科大学第二十六页，共三十八页，编辑于2023年，星期一3.硫酸盐类药物的测定有机碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至有机碱的硫酸氢盐。

硫酸沙丁胺醇冰醋酸+醋酐一元碱1：1BH+ClO4-+H2SO4BH+HSO4-+HClO4在冰醋酸中酸性强，使反应不能发生河北医科大学第二十七页，共三十八页，编辑于2023年，星期一硫酸奎宁片ChP（2005）取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸奎宁0.3g），置分液漏斗中，加氯化钠0.5g与0.1mol/L氢氧化钠溶液10ml，混匀，精密加氯仿50ml，振摇10min，静置，分取氯仿液，用干燥滤纸滤过。精密量取续滤液25ml，加醋酐5ml与二甲基黄指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定，至溶液显玫瑰红色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于19.57mg的（C20H24N2O2）2·H2SO4·2H2O。经碱化处理，生成奎宁游离碱，然后再用高氯酸滴定第二十八页，共三十八页，编辑于2023年，星期一4.硝酸盐测定硝酸在冰醋酸介质中的酸性不强，滴定反应可以进行完全，但是硝酸具有氧化性，可以破坏指示剂使其变色，无法指示终点。采用电位法指示终点5.磷酸盐与有机酸盐磷酸与有机酸在冰醋酸介质中的酸性极弱，不影响滴定反应，可直接滴定。第二十九页，共三十八页，编辑于2023年，星期一二、溴量法盐酸去氧肾上腺素测定方法：取本品约0.1g，精密称定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴滴定液(0.1mol/L)50ml，再加盐酸5ml,立即密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液(0.1mol/L)相当于3.395mg的C9H13NO2·HCl。第三十页，共三十八页，编辑于2023年，星期一①游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失②不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量2％为宜。③平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。第三十一页，共三十八页，编辑于2023年，星期一三、亚硝酸钠法

盐酸克仑特罗分子结构中含有芳伯氨基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示终点取本品约0.25g，精密称定，置100ml烧杯中，加盐酸溶液(1→2)25ml使溶解，再加水25ml，照永停滴定法，用亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)相当于15.68mg的C12H18Cl2N2OHCl

第三十二页，共三十八页，编辑于2023年，星期一四、紫外分光光度法&比色法苯乙胺类药物分子具有苯环结构具有特征的紫外吸收，Chp2010采用这种方法测定多种紫类药物。如盐酸甲氧明注射液，重酒石酸间羟胺注射液。比色法—重氮化-偶合显色或与亚铁离子络合显色 以盐酸克伦特罗为例，测定原理如下：第三十三页，共三十八页，编辑于2023年，星期一注意：由于偶合剂（N-(1-萘基)-乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。改错：P233增加内容：…..时时振摇10分钟，再各加0.1%盐酸萘乙二胺溶液1ml，摇匀，放置10分钟，用盐酸溶液（9→100）…第三十四页，共三十八页，编