南开811细胞生物学冲刺及模拟卷讲义

第二章 细胞的统一性与多样第三章 细胞生物学研究方法第四章 细胞质膜 第六 线粒体和叶绿第七章细胞质基质与内膜系统第八章蛋白质分选与膜泡第九章细胞信号转导第十章 细胞骨架第十一 细胞核第十三 细胞周期与细第十四章 细胞增殖调控与癌细胞第十五章 细胞分化与 表达调第十六 细 与细胞衰 第十七 细胞社会的联 67 命题规律（形式

8

461。切记 SuccessbelongstotheperseveringOpportunityfavorsthepreparedConfidenceinyourselfisthefirststepontheroadto （一一、知识体系一般体积小，直径.-10μm核区与组（环状DNA 有无有 无有无有无有 一、知识体系1光学显微镜（在显微水平上研究细胞3 电子显微镜（在亚显微水平3 电术器收集二次电子成象。CO2临界点干燥法防止引起样品品凹陷处铺上一层金属盐，从而出现负染效果，分辨率可达1.5nm。脆弱部位断裂（脂双层断裂从而显示出镶嵌在膜脂中的蛋白质），用铂、金等金差速离心和密度梯度离心（速度沉降和等密度沉降免疫荧光与免疫电镜是最常见的研究细胞内性通常则采用免疫印迹、放射免疫沉淀和蛋白质、质谱分析等技术原位杂交：用标记的核酸探针通过分子杂交确定27异核苷酸序列 两种基本类型：成纤维样细胞和上皮样细胞。 A。当D吸收激发光，使D处于激发态D*。这时如果在附近存在A，D*的激发能传给附近的A，使A处于激发态A*,A*就会发荧光。 模式生 特

一、知识体系3。a外在膜蛋白（或称外周膜蛋白）b（或称整合膜蛋白c脂锚定蛋白 的极性头部形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过Ca+、Mg+等阳离子与带负电温度对膜脂的运动有明显的影响，相变温度与膜的流动性成反比。一般来说鞘磷脂含量增加，膜的流动性下降。 ③膜蛋白的不对称 血影蛋白、肌动蛋白、血型糖蛋白、带3蛋白、带4.1蛋白和锚蛋白。一系列实验表明血影蛋白、肌动 血影蛋白四聚体的游离端与肌动蛋白相连，形成网格状的膜骨架结构。带4.1蛋白加强了二者的结合； （二第五章物质的跨膜一、知识体系 载体蛋白（介导主动和22通道蛋白（channelprotein）（b没有饱和值 不需要提供能量 不需要提供能量

需要膜转运蛋白的协助。需要载体蛋白的协助。Na+—K泵。aα亚基与Na+结合促进ATP水解α亚基上的天冬氨酸磷酸化，构象改变将Na+泵出细胞；同时细胞外K+与α亚基结bNa+依赖的磷酸化K+依赖的去磷酸化有序交替发生，每秒发生1000a维持胞内高K+低高Na+bc吸收营养 ②Ca2+泵也与ATP的水解相耦联，每消耗一个ATP分子转运出２个Ca2+，的机制与Na+—K+泵类似 功能将H+泵出细胞，建立和维持

ABC

①网格蛋白依赖的胞吞作用（动物细胞通过受体介导的胞吞作用对胆固醇的摄取胆固醇主要在肝细胞中合成，随后与磷脂和蛋白质形成复合物，即低密度脂蛋白LDL进入血液，通过与细胞表面的低密度脂蛋白受体特异地结合形成受体—LDL复合物，几分钟内便通过网格蛋白有被小泡的内化作用进人细胞，经脱被作用并与胞内体融合。在胞内体中，LDL与受体分离，胞内体以出芽的方式形成运载受体的泡，受体返回细胞质膜重复使用。然后含有LDL的胞内体与溶酶体融合

第六章线粒体与叶绿体一、知识体系④线粒体基 F1球状的F1头部为水溶性蛋白复合物，由五种九个亚基组成α3β3γεδ。α3β3组成“橘瓣状”结构，β亚基的核苷酸结合位点具有催化合成或水解的活性。γε亚基组成“转子”，位于α3β3中间共同旋转以调节三个β亚基催化位点的开放与关闭。②电子传递链各组分粒体内膜中不对称分布，当高能电子沿其传递时，所释放的能量将H+从基质泵到膜间隙，形成H+电化学梯度。在这个梯度驱使下，H+穿过合成酶回到基质，同时合成电化学梯度中蕴藏的能量到高能磷酸键。电子及质子通过呼吸链上电子载体和氢载体的交替传递，粒体内膜上形成3次回路，导致3对H+抽提至膜间隙，生成3个分子。b3个βcATP通过旋转催化而合成 a黄素蛋白（既是递H+体又是递电子体，每次能传递两个电子和两个H+b细胞色素（血红素中的铁通过Fe3+和

催化电子从CoQH2到Cyt 催化电子从CytC传递给分子O2形成第七章细胞质基质与内膜系统一、知识体系③第面的功能与细胞膜相关③第面的功能与细胞膜相关。(第四版新增一是:细胞内的各种膜相细胞器使细胞质基质产生区室化，从而通过生物膜结构将蛋白质等细胞质基质pH稳态维持机制：(第四版新增) 3一个是Na+HCO-/Cl-反向转运体;3另一个是Na+/H+反向运载体(Na+3 HCO-来清除多余的OH-3a蛋白质的修饰。蛋白质糖基化。糖基化主要发生在内质网和 b控制蛋白质的c泛素（ubiquitin）：普遍存在于真核细胞中的由76个氨基酸残基组成的序列高度保守的小分子球蛋白，通过其C端的Gly与要被降解的不稳定的或错误折叠的靶蛋白质的残基的ε-氨基形成异肽键而共价连接，并指引该靶蛋白质运到蛋白酶体中进行降解。白酶体为多亚基复合物，成中空桶状结构，中间为20S催化，两端各结合一个19S亚基的帽，起调节 ①微粒体主要是核糖体，此外还有主要参与合成脂质，还有解毒和Ca+的功⑤内质网应激与信号调控（四版新增①基体的极②基体4种标志性化学反③基体至少由互相联系的4个部分组成a基体顺面膜囊或顺面结构(CGN)b基体中间膜基体膜囊以及状结构(TGN)（07、09年选择）d基体周围大小不等的囊 ④基体的功a基体与细胞的分泌活bc③溶酶体的发生（见右图③过氧化物酶体的发生（四版新增过氧化物酶体的发生有2种途径：一是细胞内已有的成熟过氧化物酶体经增殖而产生子代氧化物成过氧化物酶体经产生子代过氧化物酶体。构成过氧化物酶体的膜脂可能在内质网上合后，通过磷脂交换蛋白（PEP）或膜 方式完成其转运 （三第八章蛋白质分选与膜泡一、知识体系端转移到内质网膜，后续翻译过程将在内质网膜上进行。现在已知，信号假说是解释分泌性蛋白在糙面内质网上合成的重要理论，该过程是包括蛋白质N端的信号肽、信号识别颗粒和内质网膜上信号识别颗粒的受体分泌蛋白在内质网上合成的共翻译转运过程：②信号序列与SPR ④SRP ⑥信号肽酶切除信号序列 2然后新生肽边合成边转入糙面内质网腔或定位在ER膜上，经转运膜泡运到基体加工包装再分选至溶酶体、细胞质膜或分泌到细胞外。内质网和基体本身的蛋白质分选也按此途径来完成。翻译后转运途径：即蛋白质在细胞质基质游离核糖体上合成以后，再转移到膜围绕的细胞器，如细胞核、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体，或者成为细胞质基质的可溶性驻留蛋白和骨架蛋白。跨膜转运膜泡：蛋白质被不同类型的转运膜泡从糙面内质网合成部位转运至基体进而再分选转移至细胞的不同部位，其中涉及供体膜出芽形成不同的转运膜泡、膜泡和转运膜泡与靶膜的融合等过程。选择性门控转运：在游离核糖体上合成的蛋白质通过核5。细胞质基质中蛋白质的转运（1）细胞内膜泡需要多种转运膜泡参与，根据转运膜泡表面包被蛋白的不同，主要分3种类型物物 ，以及从基体顺面状区到②在细胞内由马达蛋白驱动、以微管为轨道的膜泡（以后学转运膜泡与靶膜的锚定和融合的机制SNARE即SNAP受体（可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子结8蛋白受体），位于细胞器和膜泡膜上的跨膜蛋白大，介第九章细胞信号转导一、知识体系1（开启）（关闭）2种状态的转换来控制下游靶蛋白的活性的调控蛋白。包括两类：一类是①NO血管内皮细胞和神经细胞是NO的生成细胞，NO合酶（NOS）（需要NADPH）在催化精氨酸转化为瓜氨酸的同时释放出NO。NO是一种具有自由基性质的脂溶性气体分子，可透过细胞膜快速扩散，通过作用于邻近（平滑肌）靶细胞而发挥作用。②NO G蛋白偶联受体（GPCR）都含有7次疏水跨膜α螺旋段，N端在细胞外侧，C端在细胞胞质侧。其中胞外环状结构域（E4环）结合胞外信号（配体）；跨膜螺旋5（H5）和螺旋6（H6）之间的胞内环状结构域（C3环）对于受体与G蛋白之间的相互作用具有重要作用。激活离子通道的GPCR，如心肌细胞的乙酰胆碱受体，其效应蛋白是K+激活磷脂酶C以IP3和DAG为双信使的GPCR ①激活离子通道的GAch配体与M型Ach受体结合→Gi蛋白（GiαGβγ）→Gβγ→K+通道→胞内K+外流→细胞膜超极化→光刺激→视紫红质（Gt蛋白偶联的光受体）→Gt蛋白（GtαGβγ）→Gtα被活化→Gtα与cGMP磷酸二酯酶（PDE）抑制性γ亚基结合导致PDE活化→活化的PDE即催化性α和β②激活或抑制腺苷酸环化酶的G蛋白偶联受体所介导的细胞信号通路a主要效应是通过活化cAMP依赖的PKA使下游靶蛋白磷酸化，从而影响细胞代谢和细胞行为。这是细b此外还有一类细胞缓慢应答胞外信号的过程，即cAMP—PKA信号通路对真核细胞表达的调控。 ③激活磷脂酶C,以IP3和DAG作为双信使的G首要效应酶：磷脂酶C（PLCβ）：催化PIP2水解产生二酰甘油（DAG）和肌醇-145-三磷酸（IP3）配体→GPCR→Go/Gq蛋白（Goα/Gqα）→PLCβIP3→ER上的IP3门控受体→胞内Ca2+浓度升高→Ca2+ DAG+Ca2+→激活PKC→调节代谢或转录①受体酪氨酸激酶是细胞表面一大类重要受体，为单次跨膜蛋白。所有都由一个胞外配体结合结构域、一个疏水的跨膜α螺旋和一个胞外结构域（包括一个具有蛋白酪氨酸激酶活性的催化位点）组成。的主要功能是控制细胞生长、分化而不是调控细胞中间代谢。②Ras③RTK-Ras配体→受体→受体二聚化→受体自磷酸化→激活RTKs→接头蛋白如GRB2→鸟苷酸交换因子GEF（Sos）→Ras活化→Raf（MAPKKK）→6MAPK→进入细胞核→其他激酶或调控蛋白的磷Wn-β-catenin信号通路（关键组分和作用GPCR-cAMP/PKA和RTK-Ras-MAPK信号通路接或间接导致胞质内特殊转录因子的活化，进而影响核内的表达。Wnt受体和Hedgehog受体介导的信号通路是通过配体与受体结合胞质内多蛋白复合物去装配，从而释放转录因子，然后转位到核内调控表达。上述4类信号通路的共同特点：一是所介导的细胞反应是长期反应，结果是改变核内的转录；二是第十章（见右图 在电镜下微丝是一条直径约为7nm的扭链，双股螺旋状。因为肌动蛋白单体具有极性，成核反应：即形成至少有2-3个肌动蛋白单体组成的寡聚体，然后开始多聚体的组装。成核过程是肌动蛋速度快于肌动蛋白水解ATP的速度时，在延长的微丝末端形成个由肌动蛋白-ATP亚基组成的帽，使微丝比含ATP、Mg2+，高浓度Na+，K+ 鬼笔环肽（phalloidin）：只与F-肌动蛋白结合，微丝解聚，保持微丝稳定。⑥胞质①分子马达（molecularmotor）（四版称马达蛋白）:主要指依赖于微管的驱动蛋白丝的肌球蛋白这三类蛋白超的成员。它们能够利用水解释放的能量驱动自身有规则地沿微丝或微管定向运动以所携带的货物。马达蛋白具有2种结构域：①与微丝或微管结合的马达结构域；②与大分子复合物或膜性细胞器特异结合的“货物”结构域。颈部的调控结构域：即连接马达结构域和尾部杆状区的一段α螺旋，这里正是轻链（钙调蛋白）的结合部位，它在肌球蛋白分子上发挥杠杆作用。尾部的“货物”结构域：位于尾部杆状区的最末端区域9，主要是携带要的“货物”根据各种肌球蛋白分子结构上的差异，习惯上将Ⅱ型肌球蛋白称为传统的肌球蛋白，其他各种类型称为非传统的肌球蛋白。其中研究较多的是Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅴ型。除Ⅵ型肌球蛋白外，所有类型的肌球蛋白都是沿微丝向正移动的。包括2条重链和4条轻链。Ⅱ型肌球蛋白分子的尾部主要起结构支撑作用。双极肌球蛋白纤维组装时其尾部位于纤维的，而头部则朝向两侧（如粗肌丝）。非传统型肌球蛋白 型肌球蛋白：只有1个头部（马达结构域）和1个尾部（具有多样性且其多样性与所“货物”的种类不同型 球 ， 两 型 球 在运动过程中，Ⅴ型肌球蛋白的步幅正好是微丝上由个肌动蛋白亚基所组成的重复结构的长度。该蛋白的两个头部交替与微丝结合可确保整个分子以及所运载的“货物”始终与微丝相连。原肌球蛋白（tropomyosin,Tm）：由2条平行的长度40nm的多肽链绕成α螺旋构型。Tm镶嵌于肌动蛋白丝 ①动作电位的产生：神经冲动通过神经-肌肉接点传到肌细胞，经T ③原肌球蛋白移位：Ca2+通过Tn复合体使原肌球蛋白移位到肌动蛋白螺旋沟槽的深处，解除肌动蛋⑤到达肌质网的神经冲动一旦停止，肌质网就通过2+泵将Ca2+ 第五 重要知识点归纳串讲（四（见右图微管蛋白：一个能聚合形成微管的球状细胞骨架蛋白。α/β-微管蛋白异二聚体是微管组装的基本单位。微管蛋白上都有一个结合位点，但α-微管蛋白上结合的不能被水解，称为不可交换位点（N位点），而β-微管蛋白上结合的可水解，直接参与微管组装，称为可交换位点（E位点）。微管蛋白的C端均含有酸性氨基酸序列，因此微管表面带有较强的负电荷。原纤丝：微管的横截面是由1个球形蛋白亚基构成的环状结构。微管的管壁是由α/β-微管蛋白异二聚体纵向排列而成的13根原纤丝合拢而成。每一根原纤丝的两端都是不对称的，它们在微管的某一端都是α-微管蛋白，而在另一端都是β-微管蛋白，从而使得整根微管在结构上呈极性状态。人们通常将微管组装较快的一端称为正极（拥有β-微管蛋白），而另一端称为负极。二联体微管（纤毛和鞭毛中的轴丝微管三联体微管（中心体或基体的微管）

延伸阶段，通过在两端以及侧面增加二聚体而扩展成片状，当片状聚合物加宽到大致13秋水仙素微管组织中心（MTOC）织中心，如中心体、轴突、基体和其它特殊的部位（核膜外表面、细胞的两极、基体的膜囊区和新中心体：由一对相互垂直的圆柱状（桶状）中心粒及周围无定形的电子致密的基质（PCM）组成，是微管组织中心。中心粒（centriole）由9组平行排列的等间距的三联体（A、B和C）微管组成，A管为完全微管，B管和C管为不完全微管。γ-微管蛋白对微管的起始组装有重要作用：微管直接于中心粒无定形致密周质区（PCM）。成核模型认为：由13个γ-微管蛋白在中心体的PCM中呈螺旋状排列形成的开放的环状复合物，决定着微管原纤丝的数目和极性。当微管组装时，γ-微管蛋白只与微管蛋白二聚体中的α-微管蛋白结合，这样，朝外的一端就一定是β-微管蛋白（即正）。 1微管结合蛋白（MAP）：管的组织结构和功能具有调控作用。包括MAP1、MAP2、MAP3、MAP4和tau尔基体、物质系统瘫痪。体外培养的神经细胞神经突起停止生长 驱动蛋白的分子结构：在结构上与Ⅱ型肌球蛋白相似，由2条具有马达结构域的重链（KHC）和2条与重链的尾部结合的具有“货物”结合结构域的轻链（KLC）组成。M-驱动蛋白：（KIF13）马达结构域在中部，结合在微管的正或负，使得微管处于不稳 步行模型：驱动蛋白的2个头部交替向前，每水解1个ATP动2倍的步距，即16nm“尺蠖” 动力蛋白（dynein）超由2个组成：细胞质动力蛋白和轴丝动力蛋白（鞭毛或纤毛动力蛋白）。胞质动力蛋白水解释放的能量将“货物”沿微管向负转运。CyDn与动力蛋白激活蛋白（dynactin）复合物密切相关。Dynactin调节动力蛋白活性和动力蛋白与其“货物”的结合能力。CyDn与基体、胞内体/溶酶体和其它一些膜泡的，动粒和有丝纺锤体的定位，及细胞后的分离等密切相关。轴丝微管主要有3种排列模式 2型：轴丝的是9组二联体微管，中间是2根由鞘所包围的微管轴丝的结构：的9组二联管中A管为完全微管，B管为不完全微管（与A管共用3个亚基）；2个微管均为完全单体微管；鞘和A管之间由放射辐条相连；相邻的二联体之间通过连接蛋白相连；有2个动力蛋白臂从二联体的A管伸出，分别位于轴丝的内侧和外侧，它们沿着相邻二联体的B管滑动，使纤毛或鞭毛产生局部弯曲。基体的结构：基体（basalbody）在结构上与中心粒类似，为9＋0型排列，即基体含有9组三联体微管（A、B和C管中只有A管为完全微管），没有微管。轴丝中的9组二联体微管是由基体中的A管和B管向外延伸而成的。轴丝微管的正都指向纤毛或鞭毛的顶端。纤毛或鞭毛的运动本质是由轴丝动力蛋白所介导的相邻二联体微管之间的相互滑动的A管伸出的动力蛋白的马达结构域在相邻二联体的B管 行 ，导致二联体之间会产生滑动109 心体；极微管从两极发出，在纺锤体中部赤道区相互交错；星体微管从中心体向周围呈辐射有丝过程中的运动有赖于纺锤体微管的组装和去组装：动粒与动粒微管之间的滑蛋白（向动粒微管的负运动）沿微管的运动来完成。分布在极微管区的驱动蛋白5为双极四聚体马达蛋白，当其各用2个马达结构域沿着极性相反的2中间丝蛋白的主要类型：中间丝是由中间丝蛋白组装而成的直径约为10nm的绳索状结构。主间丝的组装；而Ⅲ型中间丝通常在细胞内形成同源二聚体。（12年选择）中间丝蛋白的种类具有组织特异性。中间丝蛋白被认为是区分细胞类型的。 →2个二聚体以反平行和半分子交错的形式组装成的四聚体（无极性，中间丝组装的最小单位）→由核纤层（nuclearlamina）：由Ⅴ型中间丝蛋白组装（12年考点）而成，位于核膜内侧由微丝微管中间丝 7内径15，外径2410 ＋- -＋ 肌球蛋白（向正

动力蛋白（向负

细胞松驰素

秋水仙 紫杉

--（四一、知识体系核被膜（nuarnpe位置决定了它具有两方面的功能：一方面，核被膜构成了核、质之间的天然选择性屏障，将细胞分成核与质两大结构与功能区；另一方面，核被膜调控细胞核内外的物质交换和信息交流。①核周间隙：：20-40nm②真核细胞中，核膜伴随着细胞周期的进行有规律的与重建。在期，双层核膜崩解成单层膜泡，核孔复合体，核纤层去组装；到末期，核被膜开始围绕重新形成。旧核膜参与了新核膜的构建膜的构建与重建的动态变化受细胞周期调控因子①胞质环：即外环，位于核孔边缘的胞质面，在环上有8③栓：即栓亦称颗粒位于核孔中心，可能其物质作用④核质环：即内环，环上对称地连有8①介导核孔复合体与核被膜的连接，将核孔复合体锚定在“孔膜区”，从而为核孔复合体装配提供一个起始位点。②在内、外核膜融合形成核孔中起重要作用。③在核孔复合体的核质交换功能活动中起一定作用。 ①通过核孔复合体的扩b主 c主动具有双向性，即核输入与核输出主动是一个信号识别与载体介导的过程——亲白的入核转运机亲白（karyophilicprotein）：在细胞质内合成后，需要或能够进入细胞核内发挥功能的一类蛋白质核定位信号 Arg，此外还常含有Pro。NLS的氨基酸残基片段可以是一段连续的序列(SV40T抗原)，也可以分成两段，两段之①结合：NLS②转移：需要GTP 核纤层:紧贴内层核膜下，是一层由纤维蛋白构成的网络结构，它与胞质中间丝（Ⅴ型纤维蛋LaminA、LaminB以及LaminC。其中LaminA和LaminC是同一个的不同拼接体,它们 结构支撑；调节表达；调节DNA修复；与细胞周期的关系：细胞过程中，核纤层蛋 (1)染色质(2)染色质蛋白（组蛋白和非组蛋白核小体的发现—主要实验①铺展染色质的电镜观察： ②用非特异性微球菌核酸酶消化染色质，酶解片段长为200bp的整数倍；若处理露的DNA，则产生随机大 应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重构技术，发现核小体颗粒是直径11nm、高6nm 对SV40微 ①每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体及一个分子H1 ③147bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈,组蛋白H1在颗粒外结合额外20bpDNA，锁住④两个相邻核小体之间以连接DNA相连，典型长度60bp不同物种变化值为0～80bp 组蛋白与DNA之间的相互作用主要是结构性的，基本不依赖于核苷酸的特异序列，实验表明，核小体具 核小体沿DNA的定位受不同因素的影响，进而通过核小体相位改变影响表达(4染色质组装的多级螺旋模型： DNA双螺旋→核小体→螺线管→超螺线管→染色单体 后以每圈6个核小体为单位盘绕成直径30nm的螺线管。由螺线管形成DNA环,每18个环呈放射状平面排列,结合在核基质上形成微(miniband)。是 建成子。(5常染色质：指间期核内染色质纤维折叠压缩程度低,处于伸展状态,用碱性染色时浅的那些染色质。并非所有分为：结构异染色质或组成型异染色质和间性异染色质。DNaseIa很少有组蛋白H1bcH2Bd核小体组蛋白H2Ae组蛋白H3的变种H3.3只在活跃转录的染色质中出现； 3、染色质的与表当前染色质结构改变与活化的关系的研究主要集中在如下3个方面①DNA③HMG①X失活

①以染色质为模型的转录（“核小体犁”假说②转录因子介导的表达调转录因子至少包括两个结构域：DNA结合域，结合特异的DNA序列；激活结构域：，激活转录。二聚体的形成是许多不同转录因子的共同特征，在表达调控中起重要作用。 锌指模式 ③DNA甲基化介导的表达调DNA甲基化 5‘—C上。（09年填空④组蛋白修饰介导的表达调

①的形态结中期的类型：中着丝粒、亚中着丝粒、亚端着丝粒和端着丝粒②的3种功能元自主DNA序列(ARS)、着丝粒DNA序列(CEN)和端粒DNA序列 ③带型（核型分析与显带技术 纤维中心(FC)、致密纤维组分(DFC)和颗粒组分(GC核仁的主要功能是核糖体的生物发生，这一过程包括rRNA

（五第十三章细胞周期与细胞一、知识体系①G1与DNA合成启动相关，开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA色质去凝集。此期细胞体积增大、中心粒开始③G2④M 1 有丝选择法：用于单层贴壁生长细胞。优点是细胞 密度梯度离心法：根据不同时期的细胞在体积和重量上存在差别进行分离。优点是方法简单省时，效率高，成本低。缺点是对大多数种类的细胞并不适用。DNA合成阻断法：采用低毒或无毒的DNA合成抑制剂特异的抑制DNA的合成，而不影响其他时相的细胞进行周期运转，从而将被抑制的细胞抑制在DNA合成期。目前采用最多的DNA合成抑制剂为脱氧胸苷）或羟基脲（HU）。如G1/S-双阻断法最终将细胞群阻断于G1/S交界处。此法的优点是同步化效率高，几乎适合于所有体外培养的细胞体系。缺点是诱导过程可造成细胞非均衡生长。3 将细胞阻断在细胞中期。此法的优点是操作简便，效率高。缺点是这些药物的毒性相对较大。细胞快,G1期、G2期非常短,酵母细胞周期持续时间较短；封闭式细胞，即细胞时核膜不解聚；

①前期：凝缩—前期的标志；细胞极的确立和纺锤体的装配②前中期：核膜崩解—前中期的标志性之一前中期标志性之二—完成纺锤体装配，形成有丝器；前中期标志性事之三—整列。③中期：排列到赤道面上的机制（牵拉假说和外推假说）④后期：两条姐妹染色单体分离⑥胞质：胞质整个过程可以简单的归纳为4个步骤：

S期仅DNA总量的99.7%-细线期：染色质凝缩；具有念珠状染色粒（由染色质紧密包装而成）；细线期的端粒与核膜结合，使染 粗线期：同源的非姐妹染色单体之间发生交换（重组）；联会复合体中间出现重组结（与重组

一、知识体系a细胞融合和PCC（凝缩a细胞融合和PCC（凝缩bc分离纯化出芽殖酵母中发现的cdc28，p34cdc28激酶，调控G1/S和G2/M期转换。p34cdc28与p34cdc2同源p34cdc2与p32同源；p56cdc13与p45同源；cyclinB与p56cdc13结论：MPF＝催化亚基单位（CDK）＋（Cyclin）。CDK为周期蛋白（cyclin）依赖性蛋白激酶。可以说MPF即p34cdc2激酶，p34cdc2激酶=p34cdc2（CDK1）+cyclinBa结构上都含有周期蛋白框即所有周期蛋白中都存在的约由100个残基组成的相当保守的氨基酸序列，其功能是介导周期蛋白与CDK结合。CDK是由周期蛋白结合并活化的调控细胞周期进程的蛋白激酶。通过磷酸化其底物发挥作用。CDK抑制因子（CKI）：指对CDK起负调控作用的蛋白质，包括Cip/Kip和INK。①Cip/Kip家族：包括p21、p27和p57等，其中p21主要对G1期CDK（CDK2~4和CDK6）起抑制作 ；p21还与DNA4 ①参与G2/M期转化的Cyclin—CDK复合物MPF=CyclinB+CDK1（p34cdc2） ③CDKCDK1活性首先依赖于cyclinB含量的积累：cyclinB一般在G1期晚期开始合成，通过S到G2期含量最大。随着cyclinB含量积累到一定程度，CDK1活性开始出现。到G2期晚期阶段CDK1活性达到最大并一直持续到M期中期。周期蛋白与CDK结合只是激活CDK活性的先决条件：仅周期蛋白与CDK结合，并不能使CDK激活。（即无活性前体MPF）cC催化下Thr14和Tyr15去磷酸化，cyclinB-CDK1仅①M期CDK激酶和蛋白磷酸酶对APC②纺锤体组装检查点调控APC的活性，如cdc20和Mad2（有丝捕获缺陷蛋白2）分别为APC有到中期，Mad2从动粒上，解除对cdc20的抑制作用，促使APC活化，导致M期周期蛋白降 cyclinD-CDK4/6为细胞G1/S期转化所必需：cyclinD包括D1、D2和D3，；cyclinD-CDK4/6的底物主要是Rb蛋白即成视网膜细胞瘤蛋白，Rb蛋白是E2F的抑制因子，E2F是促进与G1/S期转化和DNA有关的转录的转录因子，Rb蛋白在G1/S期转化中起负调控（“刹车”）作用，在G1期的晚期通过磷酸化而失活。cyclinE-CDK2为S期启动所必需：cyclinE-CDK2的主要作用是去除p107（类Rb蛋白）对E2F的抑制作用，促进G1/S期转化；cyclinE-CDK2是β的主要靶酶，β可以有效地抑制cycinECDK2活性，进而将细胞在G期；cyclinE在肿瘤细胞中的含量比正常细胞中要高得多；在细胞中，提高cyclinE的表达，该细胞则快速进入S期，而且对生长因子的依赖性降低。 ①ORC（起始点识别复合物）：ORC识别DNA起始点并与之结合，这是DNA起始所必需的②cdc6和cdc45也是DNA所必需的调控因③DNA执照因子—Mcm蛋白：在M期，胞质中的执照因子Mcm蛋白（实质是一种DNA解旋酶）与染色质接触并与之结合，使染色质获得DNA所必需的“执照”，但随着DNA进程“执照”信号会不断减弱直到，只有等到下一个M期重新获得“执照”，才能开始新一轮的DNA。在一个细胞周期中DNA只一次的机制即DNA执照假说。适合。除CDKDNA检查点主要包括2种 ②DNA检查点：指由于停滞的叉导致的S期的延长。这2种检查点能够将细胞停滞在S期和G2/M期。当DNA叉阻断 单链DNA时，CHK1通路被激活；当DNA双链断裂时，-CHK2通路被激活。是DNA损伤信号感受因子，也是与I-3-K同源的激酶，激活下游信号通路。CHK即检查点激酶。①细胞生长、和分化失去控制：细胞核-质比例增大，速度加快，成为“不死”的永生细胞②具有侵润性和扩散性：良性肿瘤虽不受正常生长调控，但不具有侵润性和扩散性。癌细胞的细胞黏着性下降，具有侵润性和扩散性。由转移并在身体其它部位增殖产生的次级肿瘤称为转移灶。④表达谱或蛋白质活性改变：癌细胞的种种生物学特征主要归结于表达及调控方式的改变。如多 癌（oncogene）：即控制细胞生长和的一类正常，其突变能引起正常细胞转变成癌细胞癌编码的蛋白质主要包括生长因子、生长因子受体、信号转导通路中的分子、转录调控因子、细胞周期调控蛋白、DNA修复相关蛋白和细胞凋亡蛋白等7大类型。细胞信号转导是细胞增殖与分化过程的基本调控方式，而信号转导通路中蛋白因子的突变是细胞的主要原因。抑癌或肿瘤抑制：该类编码的蛋白质可以抑制细胞生长并防止细胞，其功能丢失性突变 。p53：1979年发现的第一个抑癌，编码一种 调控蛋白（p53），p53蛋白是一种转录因子，当DNA受到损伤后被活化，细胞周期运转或者介导细胞凋亡。细胞通过p53和 根据的自然突变率、人一生中细胞的次数（1016）和生活环境中的因素（如辐射、化学（至少5~6个）。生殖细胞中发生突变，细胞发生所需的突变数的积累时间就会缩短，携带这种突变的成员更易患；白血病等血细胞的恶性增生，因不涉及侵润这一环节，而直接随血液流遍全身，故只要少数突变，便可导症发生，患病也相应提早。癌的突变性质是显性的：2个拷贝中只要有1个拷贝突变就会激活癌，导致细胞与正常干细胞相比：肿瘤干细胞也具有无限增殖、转移和抗（排除）化学毒物损伤的能力，而且二者使用一些共同的信号通路，但肿瘤干细胞增殖失控，失去正常分化能力，转移到多种组织后形成异质性的肿瘤，破坏正常组织与的功能。肿瘤干细胞于成体干细胞：在因子的诱导下，干细胞、周期中细胞和终末分化细胞可能转化为肿瘤干细胞，最终能够增生为肿瘤；当然它们的部分也会发生异质化而失去性。第十五章细胞分化与 一、知识体系细胞分化指在发育中，由一种相同的细胞类型经细胞后逐渐在形态、结构和功能上形成稳细胞分化的关键在于不同类型细胞中特异性蛋白质的合成，而特异性蛋白质的合成的实质是的选择性表达。细胞分化是多细胞生物发育的基础与。②细胞分化是选择性表达的结鸡在发育过程中产生具有不同功能的细胞：细胞合成卵清蛋白；成红细胞合成β珠蛋白；胰岛分别用上述3种蛋白的作探针，对3种细胞中提取的总DNA进行Southern杂交实验，结果显示，上述3种细胞的组DNA中都含有卵清蛋白、β珠蛋白和胰岛素；A因仅在细胞中表达，β珠蛋白只在成红细胞表达，胰岛素只在胰岛细胞表达。③组合调控组织特异性的表胞分化是由多种调控蛋白共同调节完成的。N种调控蛋白理论上可以启动产生2n种细胞类型。在启动细胞分化的调控蛋白组合中，往往存在一两个起决定性的调控，称主导。一旦这种关键性调控蛋白与其它调控蛋白形成适当的调控蛋白组合，不仅可以将一种类型的细胞转化成另一种类型的细胞，而且遵循类似的机制，甚至可以诱发整个的形成。去分化（dedifferentiation）：或脱分化，是分化细胞失去其特有的结构变成具有未分化细胞特征的过程。如：植物的愈伤组织。高等动物的克隆也涉及细胞去分化的过程，但已分化细胞的细胞核需要在卵细胞质中才能完成其去分化的程序。这一过程又称为重编程（reprogramming）,其中涉及DNA与组蛋白修饰的改变。显的差异通常，植物比动物再生能力强；动物比高等动物再生能力强；人和其它高等动物只具是指细胞经和分化后仍具有产生完整有机体的潜能或特性。植物细胞具有全能性，在适宜的条件下可培育成正常的植株。动物细胞核移植实验证明细胞核具有发育全能性。具有多种分化潜能的细胞称为干细胞。在整个发育过程中，细胞分化潜能逐渐受到限制，即由全能性细胞转化为多能和单能干细胞。但对于细胞核而言，却始终保持其组的全能性②干细胞是机体中能进行自我更新和多向分化潜能并具有形成克隆能力的一类细胞。全能干细胞（totipotentstemcell）可以分化产生3 （luriotentstemcell）一 单能干细胞（unipotentstemcell）仅能分化产生一种或几种类型的细胞。根据来源不同，干细胞又可分为：胚胎干细胞和成体干细胞。真正意义上的哺乳动物全能干细胞只有 1①卵细胞质的不 性对细胞分化的影在胚胎发育过程中，一部分细胞会影响周围细胞使其向一定方向分化，这种作用称为近旁组织的相互作用，也称为胚胎诱导，典型的例证是眼发生中的逐级诱导过程。④细胞与决⑤环境对决定的影⑥其他（ 细胞分化过程中，表达的调节主要是转录水平的调节 （六第十六章细胞 一、知识体系细胞凋亡是一个由决定的主动的生理性行为，即细胞接受某些特定信号刺激后进行的正常生理应答反应。RobertHorvitz因这一研究成果获得2002年生理学和医学奖。细胞凋亡具有典型的形态学和生化特征，凋亡细胞最后以凋亡小体被吞噬消化。细胞表面的特化结构如微绒毛，细胞间接触的，但细胞膜依然完整，仍具有选择透过性；细胞质中线粒体大体完整，但核糖体逐渐从内质网上脱离，内质网囊腔膨胀，并逐渐与质膜融合；细胞核内染色质固缩，形成新月形帽状结构等形态，沿着核膜分布。凋亡小体（apoptoticbody）是细胞凋亡过程中断裂的大小不等的DNA含物一起被反折的细胞质膜包裹，在细胞表面产生许多泡状或芽状突起，然后逐渐分离，形成的单个圆形小体。1 ②DNA③DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL法④彗星电泳法（comet有些如台盼蓝可以使死细胞，而无法进入活细胞②DNA细胞凋亡时，细胞内特异性核酸内切酶活化，染色质DNA在核小体间被特异性切割，DNA200bp或其整倍数的片段。因此凋亡细胞中提取的DNA在进行常规的琼脂糖凝胶电泳时呈现出梯状条带（细胞凋亡的典型特征）。这一方法是鉴定细胞凋亡最为简便可靠的方法之一。③DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL法④彗星电泳法（comet染色。凋亡细胞中的DNA降解片段在电泳时迁移较快，使细胞核呈现出一种彗星式图案，而染色。凋亡细胞中的DNA降解片段在电泳时迁移较快，使细胞核呈现出一种彗星式图案，而则保持圆球形⑥检测细胞膜成分变化（细胞凋亡早期，位于细胞膜内侧的磷酯酰丝氨酸翻转至细胞膜外侧诱导细胞凋亡的因子大致可分为2大类：①物理性因子：包括射线（紫外线，γ射线等）、较温和的温度刺激（如热激，冷激）等。②化学及生物因子：包括活性氧基团和分子、Ca2+载体、激①Caspase②非Caspase①Caspases：意指天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶，是一组存在于细胞质中的与细胞凋亡有关的结构类似的蛋白酶，其活性位点包含半胱氨酸，能选择性裂解靶蛋白中天冬氨酸残基后的肽键，切割的结果是使靶蛋白活化或失活，而非完全降解。 RobertHorvitz经研究发现，ced3和ced4是线虫发育过程中细胞凋亡的必需，ced9的功能是抑制细胞凋亡。鉴于这一重要发现，RobertHorvitz与另外两位线虫研究模型的建立者，英国的SydenyBrenner和JonE.Sulston共同获得了2002年生理学和医学奖。凋亡起始者：caspase-2、-8、-9、-10和-11，负责对效应者caspases的前体进行切割（激活）；起始caspases的活化属于同性活化：即同一种caspases配体主要是肿瘤坏死因子（TNF）成员。是由激活的单核－巨噬细胞分泌的能够诱导细胞凋亡和诱发炎症反应的信号分子，其本身属于细胞因子。配体的生物学功能是通过与细胞表面的受体结合来实现。（DD），负责招募凋亡信号通路中的细胞内信号分子。Fas是受体中的代表成员当配体（主要指TNF）与细胞表面受体（如Fas，受体中的代表成员）结合后，白再通过其效应结构域（DED）招募起始caspases-8酶原，形成诱导信号复合物（DISC）。起始caspases-8酶原在DISC中通过同性活化而被激活，进而切割效应caspases-3酶原，产生有活性的caspases-3，导致细胞凋亡。另一方面，活化的caspases-8还通过切割信号分子Bid将凋亡信号传递到线粒体，凋亡的内源性途径。细胞凋亡的内源性途径中，Cytc ①Bcl-2亚族：包括Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-w等，大多具有4个BH结构域BH1~4，②Bax亚族：包括Bax、Bak和Bok，具有3个BH结构域BH1~3， 3等）刺激时，胞内线粒体的外膜通透性会发生改变，向细胞质中释放出细胞色素cCytc（关键释放的Cytc与Apaf-1（凋亡蛋白酶活化因子）结合，之后Apaf-1通过其N端caspase募集结构域CARD招募细胞质中的caspase-9酶成凋亡复合体（apoptosome），caspase-9酶原在凋亡复合体中发生自身切割而活化，活化的caspase-9再进一步切割并激活caspase-3和caspase-7酶原，最后③非Caspases G和AIF等，直接进入细胞核，DNA断裂 断裂成50kb大小的DN段。EndoG（核酸内切酶G）：EndoG属于Mg2+依赖性的核酸内切酶，位于线粒体中，主要负责线粒体DNA的修复和。在受到凋亡信号刺激后，EndoG从线粒体中释放出来进入细胞 将我的信号。 ④穿孔蛋白-颗粒酶介导的细胞凋亡（四版新增细胞毒性T淋巴细胞（或自然细胞）是动物体抗御和细胞的“生力军”，它们接收激后，产生毒性颗粒即穿孔蛋白和颗粒酶，释放到细胞外。在被或的靶细胞外，颗粒酶A和B切割细胞外基质蛋白，使靶细胞与基质及周围细胞脱离；同时，颗粒酶A和B在穿孔蛋白的协助下进入靶细胞切割细胞内蛋白，通过caspass依赖性和非依赖性2种方式促使靶细胞凋亡。穿孔蛋白-颗粒酶介导的细胞凋亡在机体免疫防御中发挥重要作用。颗粒酶（granzyme）：是一类丝氨酸蛋白酶，主要包括颗粒酶A、B、H、K和M。①颗粒酶A：通过caspases非依赖性凋亡途径促使细胞凋亡。颗粒酶A能促使位于内质网的SET，转移到细胞核内并活化，切割核DNA；颗粒酶A还可通过切割核纤层蛋白和组蛋白，破坏细胞核和结构的稳定性，更有利于DNA酶的作用。②颗粒酶B：主要通过caspases依赖性凋亡途径促使细胞凋亡。控制细胞的方式主要有2种：①大多数细胞都需要获得来自其它细胞的存活信号来维持生存否则，细胞就会激活程序。②细胞直接接收到来自其它细胞的信号，激活程序细胞存活因子：主要包括多种有丝原和生长因子。它们与细胞表面的受体结合后，启动细胞内活凋亡抑制因子（如bcl-2）的转录，在免疫系统的发育、机体的免疫反应以及抗细胞凋亡等过程中发细胞凋亡抑制因子（c-IAP）：细胞中天然存在的caspases酶原活化及其本身活性的抑制因子，BIR（棒状IAP重复）结构域，能够直接与caspases活性分子结合，阻抑其对底物的切割作用。并解除其抑制凋亡的作用；Htra2Omi（丝氨7白酶）从线粒体释放出来切割c-IAP解除其抑制细胞坏死（cellnecrosis）：是细胞程序性的另式，当细胞凋亡不能正常发生而细胞必须时，坏死作为凋亡的“替补”方式被细胞采用，具有包括炎症反应在内的重要生理功能。另外DNA损伤的积累致使PARP被活化，ATP水平急降也会导致细胞坏死。

细胞自噬的过程1 胞自噬不需要吞噬细胞的协助就能进行自我销毁，因此能够在需要大量细胞的过程中发挥作用。 细胞衰老（cellageing，cellsenescence）：一般含义是衰老（replicativesenescence）， 。Hayflick界限（Hayflicklimit）：除了干细胞和癌细胞，正常的体外培养的细胞增殖能力和①不可逆的生长停滞：细胞停止②衰老相关的β-半乳糖苷酶（SAβ-gal）的活化：衰老细胞中存在的pH6.0条件下即表现活性的溶 ①衰老（RS）的机线性的“末端”问题：在DNA时，由于DNA聚合酶不能从头合成子链，当子链5’端与母链3’端配对的RNA引物被切除后，子链5’端会产生末端缺失，使得子链的5’端随着次数的增加而逐渐缩短。端粒（ omere）和端粒酶（ omerase）：①端粒是位于线性末端的由重复序列组成的“帽子”结构，对结构稳定和末端等有重要作用。②端粒酶是存在于真核细胞内的一种核糖白，成分为模板RNA和反转录酶。功能在于以自身RNA为模板，进行反转录补齐末端丢失的端粒DNA，解决线性末端问题。衰老的机制—端粒假说：端粒的缩短（一种DNA损伤）被p53识别，然后通过p53-Rb信号通路导致细胞衰老；端粒酶能够弥补端粒的缩82导致细胞的永生化。②压力诱导的早熟性衰老压力诱导的早熟性衰老（SIPS）：除了细胞内端粒缩短可以诱发衰老以外，许多刺激因素，如氧化性损伤学说：代谢过程中产生的活性氧（ROS）成分（O2-OH·，H2O2），对核酸、蛋白质和脂质造成损伤并使线粒体DNA发生特异性突变，的氧化性损伤的积累，最终导致衰老。rDNA（rRNA）与衰老：酵母的外的环形rDNA（ERC）的积累（因同源重组），掠夺了DNA正常和转录所需的重要物质，从而抑制了细胞的增殖，导致酵母细胞衰老。一、知识体系1封闭连接（occluding封闭连接（occludingjunction）：将相邻上皮细胞的质膜紧密地连接在一起，溶液中的小分紧密连接（tightjunction）：紧密连接是存在于上皮细胞间的一种特殊的封闭连接，也存在于血管内皮细胞间（如血脑屏障）。通过相邻细胞质膜上由成串排列的特殊跨膜蛋白（如闭合蛋白和密封蛋白）形成的嵴线（焊接”）的相互作用将两个细胞的质膜紧密地连接在一起。紧密连接处相邻细胞质膜紧紧靠在一起，没有缝隙。一是形成渗透屏障，可溶性物质从上皮细胞层一侧通过细胞间隙扩散到另一侧，起重要的封闭作用。紧密连接在大脑毛细血管内皮细胞之间形成血脑屏障，离子和水分子通过血管内皮细胞进入大脑（2）锚定连接（anchoring锚定连接（anchoringjunction）：通过细胞质膜蛋白及细胞骨架系统将细胞与细胞或细胞与胞外 通讯连接（communication通讯连接 神经元间或神经元与效应细胞之间的化学突触（chemicalsynapse）和植物细胞间的胞间连丝（smodesma）①间隙连接（gap结构与成分每个连接子（conneon）由6个相同或相似的间隙连接蛋白（connexin）呈环状排列而成，形成间隙连接通透性的调节 ②胞间连丝（smodesma）：胞间连丝穿越细胞壁，由相邻细胞的细胞质膜共同组成管状结构，是由光面内质网延伸形成的链样管。在管状质膜与链样管之间是由细胞液构成的环孔。胞间连丝在植物细胞间的物质和信号传递中起着非常重要的作用。胞间连丝介导的细胞间的物质具有选择性，并且是可以调节的。除极少数特化的细胞外，高等植物细胞之间通过胞间连丝相③化学突触（chemicalsynapse）：化学突触是存在于可兴奋细胞之间的细胞连接方式，它通 胶原（collagen胶原的概念：一类参与胞外基质构建的纤维状的糖蛋白分子，在胞外基质中含量最高，刚性及抗张力强度最大，构成细胞外基质的骨架结构。胶原是动物体内含量最丰富的蛋白质。也是发育中胶原的合成与组装：起始于内质网，并在基体中进行修饰，最后在细胞外组装成胶原纤维：前α肽链→前胶原→原胶原→胶原原纤维→胶原纤维。弹性蛋白具有2个明显的特征：构象呈无规卷曲状态；通过Lys乳糖）-糖醛酸二糖单位构成的不分支的长链多糖。糖胺聚糖可分为透明质酸乳糖）-糖醛酸二糖单位构成的不分支的长链多糖。糖胺聚糖可分为透明质酸素、硫酸乙酰肝素和硫酸角质素等4透明质酸：透明质酸是一种重要的糖胺聚糖，但它不但不被硫酸化，而且通常也不与任何蛋白共纤连蛋白（FN）：纤连蛋白是由2个相似亚基通过C端形成的二硫键交联而成粘连蛋白，整个分子呈“V形”。每个亚基有数个结构域，有的能识别并结合细胞外基质组分，有的（含有RGD三肽）能识别并结合细胞表面受体（整联蛋白）。层粘连蛋白（LN）：一种粘连性高糖蛋白，通过二硫键将1条α链、1条β链和1条γ链连在一起，分基（底）膜：一薄层特化的细胞外基质结构。主要成分：Ⅳ型胶原、基膜蛋白聚糖、巢蛋白以及层粘连蛋白等。层粘连蛋白（LN）作为“分子桥”将细胞与基膜紧密结合在一起。 是质膜的正常结构成分 大学入学考试模拟试题一（上 （ （A10-BCD ABCD核外ABCD扫描电 ）ABD相差和微分显微镜技ABC

D均一 ABC转D转（（ABC

D膜蛋 APSBESCEFDPF（，下列推断错误的 ）（（ （（ （BD鸟本苷可抑制其活 DACoQ-CytBNADHCoQCCoQD细胞色素C氧化 ABCD A革兰BCD褐 （ （ABCD ABC ABCDABCD球 ABC基D D终止转移序列数 DNO通过 ABCG

D疏水性分子相互作 ABCD ）2 ABCD ABCD细胞皮 ABCD A200bpD大约146bp整倍数的片 A扩B转CD 2（ （ADNABCDAG期BG2CMDS ABCD） 的是（）A开始凝BCD细胞极确 ABCD）38.有活性的CDK1激酶符合下列哪种描述（）AThr161 （ ）（A全部的有效表B全部的有序表C选择性表D随机表ABCD细胞 A重CD的转（ （ABC由调控的细胞自我消亡的过BGCDDNA A基BCD内质 ）A细胞最小次B细胞最大次C细胞最适次D细胞 ABC周围组织的炎症反D组DNA的降 ABCD ABCD纤连蛋 （ ）（ABCD ABCD胞间连 大学入学考试模拟试题一（下1925年，E.Gorter和F.Grendel用抽提人的红细胞质膜的膜质成分，发现它是红细胞表面积的2Danielli和Davson推测质膜中含有蛋白质成分并提出“蛋白质-脂质-蛋白质”三明治式的质膜结构模型。② . ③1972年，S.J.Singer和G.Nicolson对单位膜学说1)膜的流动④1988⑤在细胞生长和等整个生命活动中，生物膜在三维结构上处于不断动态变化中，从而保证各种代逆浓度梯度（或电化学梯度需要载体蛋白

需要膜转运蛋白

①外膜：厚约6nm，蛋白质和脂质各占50%②内膜：厚约6-8nm③膜间隙：宽度6-8nm线粒体是物质最终彻底氧化分解的场所，其主要功能是进行三及氧化磷酸化合成为细胞生命活动提供直接能量。此外，与细胞中氧自由生成、细胞凋亡、细胞信号转导、细胞内多种离子的跨膜转运及电解质稳态平衡的调控有关。⑧到 2 ①嵌有质子泵，形成和维持溶酶体内环境的酸性，溶酶体酶的最适pH为5.0G蛋白偶联受体都含有7次疏水跨膜α螺旋段，N端在细胞外侧，C端在细胞胞质侧。其中胞外环状结构域（E4①激活离子通道的G②激活或抑制腺苷酸环化酶的G③激活磷脂酶C（以IP3和DAG作为双信使）的G①激活离子通道的G离子通道本身既有信号结合位点，又是离子通道。以光受体活化诱发cGMP门控阳离子通道的关闭为例：光刺激→视紫红质（Gt蛋白偶联的光受体）→Gt蛋白（GtαGβγ）→Gtα被活化→Gtα与cGMP磷酸二酯酶）抑制性γ亚基结合导致PDE活化→活化的PDE即催化性亚基破坏cGMP（水解）→cGMP该途径的首要效应酶是腺苷酸环化酶，为12次跨膜蛋白，催化ATP生成cAMPcAMP作用于蛋白激酶A，PKA属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。无活性时，为四聚体（R2C2）；有活性时（依赖cAMP与R亚基结合而释放出C亚基），为2个催化亚基C。cAMP与R亚基是以协同方式结合的。激素→G蛋白偶联受体→G蛋白→腺苷酸环化酶→cAMP→cAMP依赖的蛋白激酶A→靶蛋白或调控蛋白磷酸化→细胞代谢行为的改变或转录的激活。③激活磷脂酶C（以IP3和DAG作为双信使）的G首要效应酶：磷脂酶C：催化PIP2水解产生二酰甘油（DAG）和肌醇-145-三磷酸（IP3）IP3-Ca2+和DAG-PKC双信使信号通路（双信使系统07年名解）：配体→GPCR→Go/Gq蛋白（Goα/Gqα）→PLCβIP3→ER上的IP3门控受体→胞内Ca2+浓高→Ca2+与钙调蛋白结合→PIP2DAG+Ca2+→激活PKC→调节代谢或转录 微管是一种内径15nm，外径24nm的中空管状细胞骨架纤维，由α/βα/β-管的管壁是由α/-微管蛋白异二聚体纵向排列而成的13根原纤丝合拢而成。

表达 ③应用，caspase酶原分子在特异的天冬氨酸残基位点被切割，产生的2段多肽形成大小2个亚基，再聚合成异二聚体，此即为具有活性的caspase。①起始caspases的活化属于同性活化：即同一种caspases酶原分子彼此结合或与接头蛋白结合形成复合（DED）。这2种结构域存在于caspase聚合，caspases 效应caspases的活化属于异性活化：即已活化的起始者caspases招募效应者caspases酶原分子后，对①由受体起始的外源途径当配体（主要指TNF）与细胞表面受体（如Fas，受体中的代表成员）结合后，引起，胞内线粒体的外膜通透性会发生改变，向细胞质中释放出细胞色素c；释放的Cytc与Apaf-1（凋亡蛋白酶活 通过其N端caspase募集结构域CARD招募细胞质中的caspase-9酶 大学入学考试模拟试题二（上 （）（）（ （ABCD蓝细 （ （ABCD（ （B彩色显微价格昂4 ABC微分显微D（ （4ABCD

ABC

D膜蛋 （ （A BESCEFDPF （ （ABC

AC（ ）（BCCD细胞色素C还原 ABCD（ ）（ACD苹果酸脱氢 （ （A基体顺面膜B基体中间膜C基体膜D整个基 ABCD钙 D（ （CB（ （ABC基D线粒体和叶绿 ABCD24、有关cAMP信号通路，下列说法错误的是（ A这一途径的首要效应酶是腺苷酸环化酶Cβγ亚基复合物与游离的Gsα亚基结合，可使Gsα A ）ABC胞质D桥粒与半桥 （ （（ （BBCD （（BCD ）ABCD核孔复合 BCDABCD动粒微 ASBCD ）A开始凝BCD细 （ （AG1期向SBG2期向MCG1期向MDS期向G2

AH1D 当6 A水平的调BCD ）ABCD去分 ABCD ）ADNAC70S核糖体中的rRNAD80S核糖体中的rRNA断 ABCDABC （ ）（ABCD间隙连 BCD ）ABCD黏合 （ （ABCD ABCD胞间连 大学入学考试模拟试题二（下、β +c

（2）事实上，线粒体和叶绿体的生长和增殖受核组及其自身的组两套遗传系统的控制，称为半自主性细胞器，即自身含有遗传表达系统(有一定的自主性)；但编码的遗传信息十分有限，其RNA转录、蛋白质翻译、自身构建和功能发挥等必须依赖核组编码的遗传信息(自主性有限)。主要是核糖体，此外还有受体酪氨酸激酶受体酪氨酸激酶(RTKs，为单次跨膜蛋白。所有RTKs结合结构域、一个疏水的跨膜α螺旋和一个胞外结构域（包括一个具有蛋白酪氨酸激酶活性的催化位点RTK—Ras配体→受体→受体二聚化→受体自磷酸化→激活RTKs→接头蛋白如GRB2鸟苷酸交换因子GEF如（Sos）→Ras活化→Raf（MAPKKK）→MAPKK→MAPK→7。它们能够利用水解ATP释放的能量驱动自身有规则地沿微丝或微管定向运动 所携带的货物①动作电位的产生：神经冲动通过神经-肌肉接点传到肌细胞，经T②Ca2+的释放：神经冲动触发肌质网释放Ca2+③原肌球蛋白移位：Ca2+通过Tn复合体使原肌球蛋白移位到肌动蛋白螺旋沟槽的深处，解除肌动蛋白与肌球蛋白结合的。④细肌丝与粗肌丝之间的相对滑动：在肌丝的滑动过程中，肌球蛋白将ATP中的⑤到达肌质网的神经冲动一旦停止，肌质网就通过

泵将

①染色质是指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA活动的基础,与组直接相关的细胞活动都是在染色质水平进行的③染色质和具有基本相同的化学组成，但包装程度不同，构象不同。染色质和是在细胞周 DNA双螺旋→核小体→螺线管→超螺线管75单体 在细胞凋亡的内源性途径中，线粒体处于中心位置。当细胞受到内部凋亡信号（如不可修复的损伤）或外部的凋亡信号（如紫外线、活性氧等）刺激时，胞内线粒体的外膜通透性会发生改变，向细胞质中释放出凋亡相关因子，细胞凋亡。线粒体释放到细胞质中的凋亡因子有多种，其中最著名的的是Cytc。细胞凋亡的内源性途径中，Cytc的释放是关键，源于线粒体外膜通透性的改变。线粒体外膜的通透性主要受到Bcl—2蛋白的调控。Bcl—2是线虫抗凋亡蛋白Ced9在哺乳动物中的同源物，成员大当细胞受到内部凋亡信号（如不可修复的DNA损伤）或外部的凋亡信号（如紫外线、活性氧等）胞内线粒体的外膜通透性会发生改变，向细胞质中释放出细胞色素c；释放的Cytc与Apaf-1（凋亡蛋白酶活化因子）结合，之后Apaf-1通过其N端caspase募集结构域CARD招募细胞质中的caspase-9酶成参与G2/M期转化的Cyclin—CDK复合物MPF=CyclinB+CDK1（p34cdc2）G2/M期转化中CDK1起关键性调控作用。CDK1通过使某些底物蛋白磷酸化，改变其下游的某①CDK1活性首先依赖于cyclinB含量的积累：cyclinB一般在G1期晚期开始合成，通过S 周期蛋白与CDK结合只是激活CDK活性的先决条件：仅周期蛋白与CDK结合，并不能使CDKThr14、Tyr15磷酸化，CDK1化酶（CAK）使cyclinB-CDK1上Thr161磷酸化，但此CDK激酶仍无活性（即无活性前体MPF）解酶cdc25C催化下Thr14和Tyr15去磷酸化，Rab-GTP与特定转运膜泡的表面蛋白相互作用，并通过类异戊二烯基团插入转运膜泡内。一旦Rab-被结合在膜泡表面，便与靶膜上的Rab NSF即N-乙基马来酰亚胺敏感因子和SNAP即可溶性NSF明显的特异性；SNARE即S