氯化胆碱测定之原理与方法

氯化胆碱测定之原理与方法第一页，共二十七页，编辑于2023年，星期日大纲氯化胆碱之简介含量测定方法介绍过氯酸无水滴定法银量法凯氏定氮法四苯硼钠重量法雷氏盐重量法离子层析法第二页，共二十七页，编辑于2023年，星期日简介属于水溶性维生素B群(VitaminB4)因幼畜自身尚无合成胆碱的功能，体内所需胆碱全部依赖外界供给胆碱最早于1940年由猪胆汁中被分离出来胆碱是生物体代谢的中间产物，它常以氯化物等盐的形式存在第三页，共二十七页，编辑于2023年，星期日简介主要的胆碱盐有氯化胆碱(cholinechloride)、氯化琥珀胆碱(succinylcholinechloride)、溴化氨酰胆碱(hexabiscarbacholine)、氯化乙酰胆碱(acetylcholinechloride)、磷酰胆碱(phosphorylcholine)、氯化氨甲酰胆碱(bethanecholchloride)等，以氯化胆碱最常做为饲料添加剂第四页，共二十七页，编辑于2023年，星期日简介1mgcholinechloride=0.87mgcholine分子式：HOCH2CH2N(CH3)3ClCASNo：67-48-1分子量：139.63CAname：2-hydroxy-N,N,N-trimethylethanaminiumchloride第五页，共二十七页，编辑于2023年，星期日胆碱之生理作用磷脂质(phospholipids)成份之一,增进脂质传递及细胞建构合成乙酰胆碱(acetylcholine;神经传导物neurotransmitter)之前驱物(precursor)参与动物体内的甲基化反应，是重要的甲基供给体第六页，共二十七页，编辑于2023年，星期日氯化胆碱之制备环氧己烷法三甲胺(trimethylamine)与环氧己烷(ethyleneoxide)反应生成液体氯化胆碱方法简单，成本低质量好，但设备要求耐酸耐腐蚀第七页，共二十七页，编辑于2023年，星期日氯乙醇法三甲胺、氯乙醇(chloroethanol)与水加热反应生成晶体氯化胆碱氯化胆碱质量优劣以三甲胺残留来衡量第八页，共二十七页，编辑于2023年，星期日粉末状氯化胆碱是以液体状态均匀浸渍在载体，再经干燥除水而成载体种类：农产副产品：小麦麸皮、玉米芯粉、玉米杆粉、稻壳粉、花生壳粉、薯类淀粉渣天然矿物：沸土、膨泣土、海泡石、膨化珍珠岩人工合成化合物：二氧化硅、水合硅酸第九页，共二十七页，编辑于2023年，星期日氯化胆碱对其他维生素有破坏作用，特别是有金属元素存在时，对VitaminA、D、K的破坏较快，因此在复方制剂中不建议加入胆碱添加氯化胆碱后之补助饲料应尽快使用第十页，共二十七页，编辑于2023年，星期日氯化胆碱含量测定第十一页，共二十七页，编辑于2023年，星期日过氯酸无水滴定法氯化胆碱与醋酸汞反应，氯化胆碱转化为醋酸盐和难电离的氯化汞，在醋酸中以高氯酸对生成的醋酸盐进行滴定第十二页，共二十七页，编辑于2023年，星期日称取80℃下干燥3h的样品0.7g于250mL三角瓶中，加40mL甲醇，充分摇动30min后过滤，再分别用20mL、15mL、15mL甲醇洗涤沉淀3次，将滤液和洗液合并，在水浴上蒸发至干，以20mL冰醋酸溶解后，加2mL醋酸酐，10mL醋酸汞和两滴结晶紫指示剂，用0.1M过氯酸溶液滴定至蓝色，同时做空白X＝（V－V0）C×0.1396/M×100C:高氯酸标准溶液实际浓度(M)

V:消耗高氯酸标准溶液体积(ml)V0:空白试验消耗硝酸银标准溶液体积(ml)M:检品质量(g)

0.1396:氯化胆碱莫耳质量(g/mmol)第十三页，共二十七页，编辑于2023年，星期日银量法分析检品中氯含量来确定氯化胆碱的含量称取0.5g样品于250mL定量瓶中，加50mL水摇匀后，加0.5mL铬酸钾，用0.1M硝酸银溶液滴定至砖红色，同时做空白Ｘ＝C（V－V0）×0.1396/（M×50/100）×100C:硝酸银标准溶液的实际浓度(M)V:消耗硝酸银标准溶液体积(ml)V0:空白试验消耗硝酸银标准溶液体积(ml)M:检品质量(g)0.1396:氯化胆碱莫耳质量(g/mmol)

第十四页，共二十七页，编辑于2023年，星期日凯氏定氮法称取样品1g左右于带有白色定性滤纸的漏斗中，用水冲洗10次左右，取出滤纸烘干，以凯氏定氮法测定含氮量N1，同时称0.5g～0.6g直接测定含氮量N2。氯化胆碱含量=（N2-N1）/10.03×100%第十五页，共二十七页，编辑于2023年，星期日四苯硼钠(Sodiumtetraphenylboron)重量法称取样品约1g于100mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，过滤，精确量取滤液10mL于100mL烧杯中，加20mL水，一滴AlCl3三氯化铝（10％），20mL四苯硼钠（四苯硼钠C24H20BNa2g加水溶解稀释至100mL，加2滴0.5MNaOH摇匀放置24h，过滤，可保存5天），不断振摇30min，用预先烘干称重坩埚过滤，水洗烧杯4次，每次10mL左右，并将滤液一并过滤，将沉淀在105℃烘干2h，取出放入干燥器内冷却，称重。氯化胆碱含量=[沉淀质量(g)×0.3298×100]/样品质量(g)×101g沉淀=0.3298g氯化胆碱。第十六页，共二十七页，编辑于2023年，星期日雷氏盐

(二氨基四硫代氰酸铬铵;Reineckesalt)重量法试液中氯化胆碱与雷氏盐(二氨基四硫代氰酸铬铵)反应，形成结晶沉淀，用重量法测定氯化胆碱含量W2＝［(m2-m1)/m］×10×0.33045×100m2:沉淀(g)m1:空白试验沉淀(g)m:检品(g)0.33045:氯化胆碱分子量与沉淀物分子比值10:样品溶液稀释倍数TheCouncilonPharmacyandChemistryofAmericanMedicalAssociation(AMA)第十七页，共二十七页，编辑于2023年，星期日离子层析法（IonChromatography）利用离子交换原理将带有不同电荷、离子半径和结构等有差异的离子分离测定胆碱离子第十八页，共二十七页，编辑于2023年，星期日测定方法之盲点不肖厂商为获取高额利润，于产品中掺假以降低成本。利用检测方法之非特异性，掺入在标准规定条件下亦能发生此反应且现象基本相同的物质，以致无法正确反映出氯化胆碱的真实含量。第十九页，共二十七页，编辑于2023年，星期日根据氯化胆碱的分子式C5H14NClO（分子量：139．63），纯氯化胆碱氮含量为10％，氯含量为25.4％常见掺假物：三甲胺盐酸盐(trimethylaminehydrochloride;C3H10NCl)、氯化铵(ammoniumchloride;NH4Cl)、氯化钠(sodiumchloride;NaCl)、氯化钾(potassiumchloride;KCl)、硝酸盐(nitrate)、亚硝酸盐(nitrite)、尿素(urea)、脲醛聚合物(ureaformaldehydepolymer)第二十页，共二十七页，编辑于2023年，星期日过氯酸无水滴定法氯化铵、氯化钠、氯化钾、三甲胺盐酸盐等也能与过氯酸反应，所以该检测方法对氯化胆碱不具特异性在合成氯化胆碱过程中，其中间产物三甲胺盐酸盐的残留量每多1％，用此法测定时，所测得之氯化胆碱含量就会多1.4％第二十一页，共二十七页，编辑于2023年，星期日银量法由于该方法测定的是氯离子，可溶性氯化物或三甲胺盐酸盐均会使测定结果偏高

第二十二页，共二十七页，编辑于2023年，星期日凯氏定氮法凯氏法所测得的氮含量并不全是氯化胆碱中所含氮，还有其他物质所含的氮含有硝酸盐，亚硝酸盐，尿素，脲醛聚合物等含氮化合物，均会使检测结果偏高第二十三页，共二十七页，编辑于2023年，星期日四苯硼钠重量法Pb2+、

Ag+、钾盐、铵盐、有机胺、生物碱及其他四级胺盐类化合物均能与四苯硼钠生成沉淀而干扰测定，使结果偏高第二十四页，共二十七页，编辑于2023年，星期日雷氏盐

Reineckesalt（二氨基四硫代氰酸铬铵）

重量法环六次甲基四胺(hexamethylenetetramine)不会被碱分解，能与雷氏盐反应生成粉红色沉淀，使测定结果偏高采用酸碱水解雷氏盐重量法测定即先将样品加2M

硫酸溶液10mL

煮沸30min

，使环六次甲