培养液中酵母菌数量的动态变化

培养液中酵母菌数量的动态变化（必修3P68）探究当前第1页\共有19页\编于星期四\16点酵母菌出芽生殖酵母菌的新陈代谢类型：兼性厌氧型无氧呼吸C6H12O6＋6H2O＋6O2

6CO2＋12H2O＋能量酶有氧呼吸C6H12O6

2C2H5OH＋2CO2＋能量酶当前第2页\共有19页\编于星期四\16点一、实验目的1．通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。2．用数学模型解释种群数量的变化。3．学会使用血球计数板进行计数。当前第3页\共有19页\编于星期四\16点二、实验原理1、酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、PH、温度等因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。

2、利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数。

当前第4页\共有19页\编于星期四\16点是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格网。当前第5页\共有19页\编于星期四\16点XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2，分400个小格，每小格面积是1/400mm2。血细胞计数板的使用原理方格网当前第6页\共有19页\编于星期四\16点方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm3。当前第7页\共有19页\编于星期四\16点每个大方格中有16个中格或25个中格计数室通常有两种规格。

一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。当前第8页\共有19页\编于星期四\16点

25*16规格的，通常数五个中方格的总菌数（五点取样），然后求得每个小方格的平均值，再乘上400，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成10ml菌液中的总菌数。16*25数四个中方格（对角线）每1ml菌液中所含的酵母菌个数：酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数（25×16）酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数（16×25）当前第9页\共有19页\编于星期四\16点例1、检测员将1mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量，已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0．1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻

个／mL。（参考答案：5n×105

）当前第10页\共有19页\编于星期四\16点1．镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；血细胞计数板使用的方法步骤2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去；当前第11页\共有19页\编于星期四\16点3．计数稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。当前第12页\共有19页\编于星期四\16点三、实验探究过程（一）提出问题：培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？（二）作出假设：环境中的资源和空间有限的条件下，酵母菌种群的数量呈S型增长。（三）设计实验①全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。②分别用等量培养液，在相同适宜环境中培养等量酵母菌。③每天用血球计数板，采用抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量并作记录，连续7天。④7天后，各组向全班汇报本小组7天的数据，算出每一天数据的全班平均值，根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲线。当前第13页\共有19页\编于星期四\16点（四）实验过程1、材料用具：

探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板（1mm×1mm×0．1mm方格）、滴管、显微镜等。2、方法步骤和记录：（1）取相同试管若干支，分别加入5ml肉汤培养液，塞上棉塞。（2）用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温，标记甲、乙、丙等（3）将酵母菌母液分别加入试管各5ml，摇匀后用血球计数板计数起始酵母液个数，做好记录。（4）将各试管送进恒温箱，25℃下培养7天。3、现象观察每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。当前第14页\共有19页\编于星期四\16点培养液中酵母菌种群数量7天中的变化记录表

菌数 时间当前第15页\共有19页\编于星期四\16点（五）实验结论1、根据表格平均值，以时间为横坐标，酵母菌的数量为纵坐标，绘制出培养液中酵母菌种群数量7天中的变化曲线（种群增长曲线）。2、培养液酵母菌种群数量随时间呈S型增长变化。当前第16页\共有19页\编于星期四\16点四、实验讨论2．从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻震荡几次。这是为什么？

－－使酵母菌在试管里分布均匀，提高计数的代表性和准确性。3．本探究需要设置对照吗？如果需要，请讨论说明怎样设计；如不需要，请说明理由。

－－不需要，该实验在时间上形成前后对照。只要分组重复实验，获得平均数值，求得准确即可。4．需要做重复实验吗？

－－需要，提高数据的准确性。5．怎样记录结果？记录表怎样设计？（见上表）每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。记录表（见上表）6．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？

－－增加稀释的倍数。7．对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？

－－应计数同侧相邻两边上的菌体数，另两边不计数。当前第17页\共有19页\编于星期四\16点练习：某生物兴趣小组开展探究实验，课题是：“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”。实验材料、用具：菌种和无菌培养液、试管、血球计数板（2mm×2mm方格）、滴管、显微镜等。酵母菌的显微计数方法：①血球计数板：是带有微小方格刻度的玻璃片，用于在显微镜下对微生物的计数。②将含有酵母菌的培养滴在计数板上，计算一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。连续观察7d，并记录每天的数量。根据以上叙述回答下列问题：当前第18页\共有19页\编于星期四\16点（1）根据所学知识，该课题的实验假设是：开始一段时间酵母菌呈“J”型增长，随着时间的推移，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，酵母菌呈“S”型增长。（2）本实验没有设置对照实验，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。该实验是否需要重复实验？＿＿＿＿，试解释原因＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（3）在吸取培养液计数前，要轻轻振荡几次试管，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。该如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取的措施是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（4）请你设计表格处理实验数据。（5）在该实验的基础上，根据你对影响酵母菌种群生长的因素的推测，进一步确定一个探究实验的课题：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿