分子生物学历年考题

05年分生一名词解释：SiRNA: 利用双链小片段RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。Blue/whitescreen:蓝白斑筛选。即体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ’基因，该基因含一段编码半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α－肽的DNA片断，IPTG陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α－互补，形成完整的β－半乳糖苷酶。该酶能催化指使剂底物X－gal形成蓝色菌落。当外源基因插入lacZ’基因中MCS(肽基因阅读框架被破坏，细菌内将无β－半乳糖苷酶活性，结果重组克隆呈白色菌落。Knockdown: （基因）敲除。是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设G-protein:G蛋白。是三聚体GTP结合调节蛋白的简称，位于质膜内胞浆的一侧，由二聚体通过共价结合锚定于膜上起稳定αα亚基本身具有GTPG蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作用，当G蛋白α亚基与GDP结合，处于关闭态；当胞外配体与受体结合形成复合物时，导致受体胞内结构域与ααGDP被GTPDNA-chip:DNA芯片。指通过微阵列技术将高密度DNA片断阵列通过高速机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃片等固相表面作为探针样品DNA/RNA面的研究。Off-targeteffect:脱靶效应。指的是与一个内源性基因某一位点并不完全同源的RNA通过抑制翻译而导致基因表达的静默。Supergenefamily:称为一个超基因家族。Environmentgeneticproject:示易感或抗性基因的DNA多态性。Tumorvaccine:的抗原成分，与不同的佐剂联合应用达到免疫激发的目的。二问答题：请从“一条基因一条蛋白”到“一条蛋白一条基因”说说你对基因概念的变化的理解。基因诊断的优缺点及发展前景。逆转录酶在RNA病毒感染宿主及自身复制中的意义。PCR与细胞内DNA（5点）试从肿瘤多基因，多机制说明肿瘤的基因筛选。答1.基因概念演变过程如下：1909W.Johannsen首先使用，以代替在此之前所用的“遗的物质概念。1926年Morgan2040年代，BendleTatumX射线照射链孢霉菌使其产生不同的突变体，发一个酶”的学说。2050年代初，BenzerT4应，从而提出了“顺反子”概念。一个顺反子即是一个基因。但后来“顺反子”多用于指RNARNA和多顺反子RNA,即是由此而来。2060（一段DNA序列，其转录产物是编码一条多肽链的RNA分子或者是一个有独力功能的RNA分子tRNA或rRN。2090年代以来，对基因的结构与功能的研究不断深入，许多基因的核苷酸序列被基因是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位，是RNA和蛋白质相关遗传信息的基本存在形式，是指贮存RNA序列信息和有功能蛋白质多肽链序列信息、以及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。大部分生物中构成基因的核苷酸物质是DNA，少数生物（如RNA病毒）中是RNA.题中“一条基因一条蛋白”反应的是2040基因诊断是指采用分子生物学的技术方法来分析受检者的某一特定基因的结构（DNA水平）或功能（RNA水平）是否异常，以此来对相应的疾病进行诊断。基因诊断有时也称为分子诊断或DNA诊断(DNAdiagnosis)。1应用范围广2（3）特异性强，敏感性高，且便于定量操作（4）可预先诊断。基因诊断的应用：遗传病患病风险分析，如出生缺陷的产前诊断，植入前遗传诊断，遗传筛选等。其他疾病易感性预测性诊断，如肿瘤或其他家族性疾病（AD基因病）的易感性预测。疗效评价及用药指导，例如评价临床治疗急性淋巴细胞性白血病。法医学个体认定病原体诊断，包括病毒、细菌、真菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体以及寄生虫等的诊断。指导的DNA合成②RNA水解③DNA指导的DNA合成逆转录酶的意义1）用于合成cDN，建立cDNA（）获得基因或探针（）。底物都是。不会产生冈崎片断。一个细胞只在有丝和减数分裂的时候进行DNA复制而PCR可以反复进行4DNA复制受到许多复杂的因子的调控5PCR复制不精确;体内DNA复制是整体染色体的复制试从肿瘤多基因，多机制说明肿瘤的基因筛选。07级医学分子生物学考试医学分子生物学考试题型：名词解释6个（每个530分，问答7个（每个1070分。75分及格。一名词解释：基因，遗传图，基因表达，基因工程，荧光原位杂交，PCR-SSCP,DNA或RNA图谱基因表达：是指基因转录及翻译的过程基因工程geneengineering：又称为重组DNA导入受体细胞，并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。荧光原位杂交fluorescencein-situhybridization,FISH对原位杂交样本进行检测的技术。PCR-SSCPCR产物双链DNdsDN变性为单链DNAssDN，加样于变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，由于DNAssDNAPCR产物序列的差异，从而对DNA缺失或插入进行检测。二问答题：HBV复制？答、是目前已知的感染人类的最小的嗜肝双链DNA、结构特别精密浓缩（）3.2kb2/3为单链，两条链不等长（2）长、长链：5’端与3b、短链：约为长链2/3。短链间的空隙可由DNAa.重叠的基因序列较多，有4个开放读码框OR，分别编码病毒的核壳（C、包膜（S）蛋白、病毒复制酶、与病毒基因表达有关的蛋白质。b、调节序列位附加信号位于ORFC中；GRE位于ORFS3、逆转录复制。遗传信息的传递过程？centraldogma：中心法则：遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA录和翻译过程，以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程对癌基因，原癌基因和抑癌基因的认识？限制性内切酶在分子克隆中的作用，并举例说明？载体的认识？答载体vecto：指能携带外源DNA片段导入宿主细胞进行扩增或表达的工具。本质为DNADNA<10Kb；带有遗传筛选标记；有适当的限制酶切位点，便于外源基因的插入和筛选。结合你的专业，谈谈对基因诊断的认识？答基因诊断：利用分子生物学和分子遗传学技术，从DNA/RNA水平检测和分析基因的存（DNA）的表达产物（mRNA、蛋白质）的确定和序列测定，实现疾病的早期诊断。特点:①特异度高。可检测DNA片段的缺失、插入、重排，甚至单个碱基的突变。②灵敏度高。待测标本目的基因只需pg水平。③稳定性高。基因的组成是核酸，比蛋白质稳定得多，且,,确定与疾、限制性核酸内切酶酶谱DNADNAc、DNA、DNA2、基因连锁分析：限制酶片段长度多态性连锁分析RFLDNA序列的多态性如果发生在限制性内切酶的识别位点上，就会造成酶切位点的缺失或新位点的出现，酶切后DNA片段长度发生变化。若某一致病基因与特异的多态性3、mRNA检测：可利用反转录PCRmRNA行常规PCR。原核生物和真核生物基因组的不同点？1、原核生物为裸露的环形DNA；真核生物细胞核中含线性DNA，线粒体也含少量环状DNA、原核基因组只有一个复制起点；真核基因组远远大于原核基因组，结构复杂，具90％以上。4、前者一般不含内含子，转录和翻译偶联连续进行；真核生物基因不连续，含内含56、原核基因组形成多顺反子结构；真核基因由一个结构基因与相关的调控区组成，转录产物为单顺反子。7DNA2－3种蛋白质分子。108、原核基因组具有操纵子结构；真核基因组中功能相关的、原核生物基本上是单倍体，真核基因组是二倍体。09年分子生物学FISHlaboratoryonlentivirusvectorJunkDN：处于DNA尾部的重复序列是不编码蛋白质的“垃圾DN基因工程geneengineering：又称为重组DNA导入受体细胞，并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。缩微芯片实验室laboratoryonachi(microlab)。荧光原位杂交fluorescencein-situhybridization,FISH对原位杂交样本进行检测的技术。碱裂解法：在NaOHpH（12.0～12.6）条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁，裂解细胞，与NaOH共同使宿主细胞的蛋白质与染色体DNADNA。(SDS法：以含EDTSDS及无DNA酶的RNA酶裂解缓冲液破碎细胞，经蛋白酶K处理后，用pH8.0的Tris饱和酚抽提DNA要进行透析或沉淀处理获得所需的DNA样品。Ct值:PCR阈值所对应的循环次数。慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感