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文档简介
绪论微生物:指个体微小通常需要借助显微镜才能看见结构简单、繁殖快速微小生物类群总称。分类:三菌四体一病毒,细菌,真菌,放线菌,螺旋体,霉形体,立克次体,衣原体,病毒。主要特点:1个体微小结构简单2吸收多转化快3生长旺繁殖快4适应强易变异发展史:1法国巴斯德,弯颈瓶试验,研究发酵过程证实是微生物作用结果并创造了加热消毒法命名“巴氏消毒法”2德国科赫创造固体培养基及细菌染色法第一章一,细菌形态:1.细菌大小:细菌个体微小,直接用肉眼观察不到,要借助光学显微镜才能看到。测量细菌大小通常以微米为单位。多数球菌直径在0.5——2微米;杆菌通常长1——5微米,宽0.5——1微米;螺旋菌通常长2——20微米、宽0.4——2微米。细菌大小是以生长在适宜温度和培养基壮领培养物为标准衡量。2基本形态和排列:依照细菌外形可将细菌分为3类;球状,杆状和螺旋球菌:单球菌,双球菌,链球菌,四连球菌,八叠球菌,葡萄球菌。杆菌:单杆菌,双杆菌,链杆菌,球杆菌,分支杆菌,棒状杆菌。螺形菌:弧菌,螺菌。二、(1)细菌基本结构:是指各种细菌都具备细胞结构。包含细胞壁、细胞膜、细胞质、核体、核糖体和内涵物等。L型细菌:一些细菌在碰到黏肽溶解酶或抑制黏肽合成物质,大多数就会失去其细胞壁而死亡,也有一部分不会死亡而成为细胞壁缺点型,仍保持一定生命力。质粒:质粒是核体意外遗传物质,为环状闭合双股DNA,带有遗传信息,控制细菌一些特定遗传性状,能在胞浆中自我复制,可维持许多代,细菌分裂时质粒可转移到子代细胞中。(2)细菌特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。三、病毒形态和结构概念:病毒是现在所知体积最微小、结构中最简单生命形式,它是在活细胞内增值、遗传和变异非细胞结构微生物。特点:(1)病毒只含一个核酸——DNA或RNA,而其余微生物则同时具备两种核酸。(2)病毒依靠核酸复制,而其余微生物则是核酸和其余成份一起参加繁殖过程,并以横二分裂方式增殖。(3)病毒缺乏完整酶系统,不能单独进行物质代谢,不能在无生命培养基上生长,必须借居于一定种类活细胞内才能生长繁殖。(4)其主要成份是核酸和蛋白质。(5)对通常抗生素不敏感,但对干扰素敏感。(6)个体微小,只能借助电子显微镜才能观察。包涵体:通常认为包涵体是病毒与细胞作用后斑块,其中有病毒粒子。结构:包含关键、衣壳、囊膜、刺突。四、其余微生物形态与结构1、放线菌:是一类单细胞有分支原核微生物它介于细菌与真菌之间。2、螺旋体:在生物学位置上介于细菌和原生虫之间,是一群细长、柔韧、呈波状或螺旋状弯曲能活泼运动单细胞微生物。3、霉形体:又称支原体是介于细菌与病毒之间微生物,他和病毒相同能经过细菌滤器,又与细菌像似,能在无生命人工培养基上繁殖4、衣原体:它是一类形态相同能经过细菌滤器,只能在易感动物体内或培养细胞上微生物介于立克次体和病毒之间5、立克次体:介于细菌和病毒之间微生物。其形态和繁殖方式近似细菌但不能在人工培养基上生长。第二章一微生物化学组成:水分,干物质干物质:无机物(钾、钠、钙、镁、硫、磷、铁及錳),有机物(蛋白质、核酸、糖类、脂类、其余有机物)二微生物营养需要:水、碳源、氮源、无机盐、生长因子1、水,水是各种生物细胞不可缺乏成份。水是良好溶剂,微生物营养吸收、渗透、分泌、排泄等都以水为媒介;微生物新陈代谢过程中一切生化反应都必须有水才能进行。2、碳源,凡能被微生物利用含碳化合物称为碳源(二氧化碳,石油、糖、脂肪等)。碳源主要提供能量和组成菌体成份原料3、氮源,凡能被微生物利用含氮物质称为氮源。主要提供合成菌体结构所需原料,极少作为能源利用4、无机盐,(1)磷:在代谢过程中有着主要作用。一部分磷组成核酸、磷脂、辅酶、或辅基,并参加碳水化合物磷酸化过程(2)硫:硫氢基是许多酶所必须。其被氧化或与重金属结合时,酶活性即消失。(3)钠和钾:维持生物细胞和培养基渗透压主要物质。(4)钙:钙离子可控制细胞生理作用,变形杆菌合成蛋白酶时需要钙。(5)镁与核酸结合成复合物存在于革兰氏阳性细菌胞浆膜上与革兰氏染色反应关于(6)铁:是过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶组成成份5、生长因子,有些微生物即使提供给他适宜碳源氮源和无机盐但仍不能正常生长,还需要一定量所谓“生长因子”其种类很多,主要是B族维生素化合物这些因子多是辅酶或辅基主要成份。三微生物营养类型1、光能自养菌:细菌内含有特殊色素能够利用光能,进行光合作用可在完全无机环境生长2、光能异养菌:这类微生物能以光为能源,利用有机化合物作为供氢体,还原二氧化碳合成有机碳化合物3、化能自养菌:这类微生物能量来自无机物氧化时产生化学能,以二氧化碳或碳酸盐作为碳源,以氨或硝酸盐作为氮源合成细胞中有机物4、化能异养菌:微生物中绝大部分都以有机物作为碳源能源。它们都是化能异养型微生物。四微生物细胞内外物质运输1、单纯扩散:环境中小分子可溶性物质从浓度高一侧向浓度低一侧渗透过程。这种扩散取决于浓度梯度差。2.促进扩散:是以细胞膜上特异性蛋白质作为营养物质载体,将营养物质运输到细胞内释放,加紧营养物质运输速度。以扩散梯度来驱动,不需要能量参加。3.主动运输:细胞内营养物质浓度高于细胞外若干倍时,营养物质逆浓度梯度向细胞内运输,这种需要能量和透性酶逆浓度梯度积累营养物质过程称为主动运输。4.基团转位:是另一个需要能量代谢方式。五.微生物合成产物:有机酸类,醇类脂类及芳香物质,维生素,抗生素,毒素,色素。1.有机酸类:一些微生物在分解代谢过程中可产生乳酸、醋酸、丙酸、丁酸等有机酸。2.醇类脂类及芳香物质:一些微生物在代谢过程中可产生醇脂类代谢物质并放出芳香味。3.维生素:是一些微生物生长所必需因子。4.抗生素:许多微生物在代谢过程中,可产生具备抑制和杀死其余微生物作用物质,这类物质称为抗生素,广泛应用于医疗和食品保藏。5.色素:许多微生物在氧气充分、温度适宜及一定条件下产生有色代谢产物,可分为水溶性和脂溶性。6.毒素:一些微生物在代谢过程中可产生对人、畜有毒害作用代谢产物。外毒素与内毒素:外毒素是微生物在生命过程中释放或分泌到周围环境中毒素;内毒素是细胞组成成份,不释放或分泌到周围环境中微生物细胞死亡或自溶或人工为破坏后才释放出来。六:细菌生长繁殖条件营养物质:细菌生长繁殖所需要营养物质有水分、无机盐和蛋白胨。有些还需要其它生长因子。酸碱度:多数细菌在PH7.2~7.6偏碱环境中都能生长。温度:随菌种不一样所需要温度也不一样,可分为嗜冷菌、嗜温菌和嗜热菌三种类型渗透压:细菌对渗透压有较大耐受力。处于低渗环境中会因细胞膨胀造成细胞膜破裂而死,处于高渗环境中会造成胞浆大量脱水浓缩而引发质壁分离,生长被抑制。所以细菌适宜在等渗环境中生长繁殖。气体:需氧菌需在有氧、厌氧菌需在无氧环境之中生长繁殖。有些细菌需在环境中加入一定量二氧化碳或氮气才能生长或生长旺盛。七细菌繁殖方式:是以横二分裂方式进行繁殖。八细菌生长曲线:概念,将一定数量细菌接种到适宜液体培养基中,其生长过程有一定规律性,以培养时间为横坐标,以细菌生长数目标对数为纵坐标,绘制一条曲线,称为细菌生长曲线。可分为四个时期:迟缓期、对数期、平衡期和衰老期。1、迟缓期:处于迟缓期细菌菌体增大,代谢活力增强,菌体产生足够量酶、辅酶和一些必需中间产物,其长短与菌种、菌龄、接菌量、培养条件等关于。在发酵工业上为缩短生产周期,应尽可能缩短该期,通常加大接种量和采取对数生长久健壮菌种。2、对数生长久:迟缓期后,细菌细胞代谢活动最旺盛,组成新细胞物质最快,细菌数成对数曲线生长,该时期菌体形态最经典、生化特征最显著抵抗力最强,惯用于观察细菌形态和染色特征。工业生产多用该时期细菌作为菌种。3、平衡期:该时期培养基内毒性代谢产物积累,营养物质消耗,以及其余环境条件改变造成细菌繁殖速度减慢,部分细菌开始死亡,细菌数目达成最大并保持稳定,并出现芽孢。4、衰老期:该时期细菌死亡率超出生长率,细菌总数不再增加,活菌数显著下降。此时期细菌形态多异常。以活细菌个数对数改变为纵坐标绘制细菌生长曲线分期及各期特点:(1)适应期——初:细菌数目不增加,体积增加快,后:个别菌体繁殖,个数少许增加。曲线平缓,大量诱导酶合成,
缩短此期,提升设备利用率,用处于对数期活性污泥接种;(2)对数期——分裂快,数目增多,活菌数≈总菌数曲线直线上升此时细胞大小、组成、生理特征等均趋于一致,代谢活跃,生长速率高,代时稳定,接种用好种子,代谢、生理研究好材料;(3)稳定时——储存物积累,养料消耗多。芽孢形成,抗生素产生,繁殖速率下降,死亡速率上升,新增菌≈死亡菌,曲线平坦,发酵产物形成主要时期(抗生素、氨基酸等),生产上应尽可能延长此期,提升产量;(4)衰亡期——菌体死亡速度大于繁殖速度,死亡菌>活菌数,自溶,内源呼吸,曲线下降,通常不作应用。九细菌培养特征1、培养基:培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用人工配制养料,通常都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包含微量元素)以及维生素和水等。有培养基还含有抗菌素和色素。
分类:按物理性状,固体、半固体和液体培养基;按组成,非合成、合成和半合成培养基;按作用,基础、营养、判别、选择、厌氧培养基等.菌落与菌苔:单个或多个细菌接种在固体培养基上,在适宜条件下,经过一定时间培养后形成单个,肉眼可见细菌细胞集聚体称为菌落。菌落彼此相连形成片称为菌苔。2、真菌繁殖方式;多数真菌是以孢子生殖,孢子形成有没有性和有性两种方式1、芽殖,成熟母细胞上生长出一个称为芽体突起,接着细胞核一分为二,一个留在母细胞内,另一个与其余物质一起进入芽体,使芽体逐步膨大并成熟,母细胞与芽体相连处收缩,成熟芽体便脱离母细胞成为新个体。新个体再出芽。一些酵母菌如假丝酵母在繁殖旺盛时,芽体还未与母细胞脱离时,芽体上又出芽,如此重复出芽,母、子细胞以及狭窄面积相连形成假丝状,称为假菌丝十病毒增殖
病毒是非细胞微生物,不具备合成本身结组成份酶系统和能量,以高度寄生性增殖。复制周期:病毒在寄主细胞内以本身核酸为模板以用寄主细胞原料、能量和生物合成场所,合成病毒核酸、蛋白质等成份,然后在寄主细胞细胞质或细胞核内装配成许多新成熟病毒体,在已裂解宿主细胞、出芽或其余方式释放到细胞外,又开始另一个感染周期,这种增殖方式称作复制;整个过程称为复制周期。复制周期分为五个阶段:吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配和释放。十一病毒培养方法:鸡胚培养法、细胞培养(悬浮培养法、固定培养法、单细胞培养法)、试验动物法。十二病毒培养特征细胞病变:病毒在细胞内增殖,并对细胞产生毒害,引发细胞变性、坏死、碎裂,进而造成细胞死亡现象,称CPE。干扰现象:两种病毒共同感染一个细胞时,可能发生一个病毒增殖抑制另一个病毒复制现象,称为病毒干扰现象。干扰素:动物细胞受到病毒感染后产生一个能够干扰病毒增殖蛋白质,释放到细胞外从而保护其余未感染细胞物质。第三章一、细菌分类标准1、形态学特征:包含细菌形状、大小、排列、结构、染色特征与培养特征等。2、生态学特征:细菌需氧要求、自主生活、共生、寄生以及其致病性等也可作为分类依据。3、生理生化特征:包含化学组成、营养类型、营养需求、繁殖方式、生长条件、代谢路径和代谢产物,对温度、PH与渗透压适应性,反抗生素及其余化学物质敏感性等。4、血清学试验:不一样种细菌抗原结构不一样,赋予他们不一样抗原特征,因为抗原抗体反应——血清学试验具备高度特异性,所以在细菌分类判定上,惯用来对未知菌进行分型判定和抗原组成份析。5、噬菌体分型:噬菌体对某种细菌寄生有专一性,而且对同种不一样型细菌也有特异性,可用噬菌体进行菌种判定和分型。6、核酸碱基组成与核酸分子杂交:比较DNA碱基组成和进行核酸分子杂交,是现在经过直接比较基因组进行生物分类最惯用两种方法。7、16SrDNA寡核苷酸序列分析:16SrDNA寡核苷酸序列分析原理是分析比较细菌株16SrDNA寡核苷酸序列,据此确定其分类地位。二、种:是生物分类基本单位,是生物在一定演化阶段,具备相对稳定一定形状特征菌株群;凡属同种生物,均具备共同基本性状特征。第四章一、无菌动物(GF):是指不携带任何微生物动物。无特定病原性动物(SPF):是指不存在一些特定具备病原性或潜在病原性微生物动物。二、水微生物学检验:测定水被粪便污染程度,最好指标是测定大肠杆菌数,通常以大肠杆菌指数和大肠杆菌价表示。每1000毫升水中大肠杆菌数,称为大肠杆菌指数。大肠杆菌价即含有1个大肠杆菌最小水量。大肠菌群是指一群在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气,需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌,这一群细菌包含大肠杆菌、肠杆菌属、克雷伯氏菌属中一部分,还包含其余属,甚至肠杆菌科以外符合上述特征细菌。现在我国要求:生活饮用水标准为1ml水中细菌总数不超出100个,大肠杆菌指数不超出3,大肠杆菌价不低于300,每1000ml水中大肠杆菌群数不超出3.第五章一、1、灭菌:用物理或化学方法杀灭物体上全部微生物,称为灭菌。2、消毒:用物理或化学方法仅能杀灭物体上病原微生物,而对非病原微生物及芽孢和孢子不一定完全杀死,称为消毒。3、防腐:预防或抑制微生物生长繁殖方法。4、无菌:指没有活微生物状态。5、巴氏消毒法:是以较低温度杀灭液体食品及物体内病原菌或特定微生物,而又不破坏其营养成份及有效成份消毒方法。分为低温长时间(63-65℃30min)、高温段时间巴氏消毒法(71-72℃15min)、超高温瞬时消毒法(132℃1-2s)二、1、(大题)湿热灭菌比干热灭菌效力高原因:①、在有水情况下蛋白质轻易凝固,蛋白质含水量与蛋白质凝固所需温度成正比。②、热蒸汽穿透性大。2、(大题)化学消毒剂作用原理:a、破坏微生物细胞蛋白b、破坏微生物酶系统c、改变微生物细胞膜通透性3、惯用消毒剂分类:酸类(苯甲酸、丙酸、水杨酸、醋酸)、碱类(石灰水、NaOH)、盐类,氧化剂及醇、酚、醛。4、(大题)影响消毒剂作用原因:a、消毒剂性质、浓度和作用时间,各种消毒剂对微生物作用方式均不一样b、微生物种类及特征,不一样种类微生物对不一样消毒剂敏感性不一样c、温度,通常消毒剂温度高时杀毒能力强d、有机物存在,消毒剂与环境中有机物结合会严重降低消毒剂杀菌效果e、PH、PH改变引发菌体电荷改变,碱性溶液中负电荷多,故阳离子去污能力大;酸性溶液中阴离子杀菌较强。三、1、寄生:一个生物从另一个生物中获取营养赖认为生,并往往对后者展现有害作用,此现象称为寄生。2、共生:两种或多个生物生活在一起,彼此并不相互损害而是相互依赖,相互有利,此现象称为共生。3、拮抗:当两种生物生活在一起,一个生物产生对另一个生物展现毒害作用物质,从而抑制或杀死另一个生物现象。4、协同:两种或多个生物在同一生活环境中,相互帮助,共同完成某种作用,称为协同。第六章一、(大题)微生物变异现象:a、形态结构变异:①、形态变异,细菌在发育过程中能够发生形态、大小等方面改变,变成与标准菌株有差异菌株。②、荚膜变异,有荚膜细菌在特定条件下,可失去形成荚膜能力。③、鞭毛变异,有鞭毛细菌培养环境改变造成鞭毛不能产生。④、芽孢变异,改变芽孢菌生存环境使之失去产生芽孢能力b、毒力变异:长久在人工培养基或加入化学物质和抗菌素及重复经过非易感动物,其往往失去或减弱产生毒力作用,反之则加强。c、培养性状变异:培养基中加入异常化学成份使培养性状发生改变。如产生光滑型或粗造型菌落d、生化特征和对药品敏感性变异:环境改变使微生物合成本身物质能力改变,微生物自发突变和耐药遗传因子使其对药品敏感性改变二、1、转化:受体菌直接摄取供体菌游离DNA片段,并将它整合到自己基因组中,从而取得了供体菌部分遗传性状过程。2、转导:以温和噬菌体为媒介,将供体菌中DNA片段携带到受体菌中,从而使受体菌取得供体菌部分遗传性状过程。3、溶源性转换:温和噬菌体DNA侵入宿主细菌后,整合于宿主菌染色体上,它与宿主细胞染色体同时复制,这个过程称为溶源性。被感染细菌叫做溶源性细菌。细菌被溶源后,因噬菌体基因加入寄主菌基因组,而使寄主菌取得一些新形状。4、结合:供体菌与受体菌直接接触或经性菌毛介导,使供体菌大段DNA(包含质粒)进入受体菌,而使受体菌基因重组过程。第七章侵袭力:是指病原性细菌突破机体防卫屏障,在体内生长繁殖、扩散能力。毒素:是细菌在生命活动过程中产生、对动物机体具备毒性作用特殊物质。外毒素:有一些病原菌在新陈代谢过程中产生,并分泌到菌体外环境中一类毒性代谢产物。内毒素:这是一类由革兰氏阴性菌在正常代谢过程中产生,在细菌生活状态下不释放或不分泌到外界环境中,只有菌体细胞自溶、死亡崩解,或人工方法破坏其细胞完整性时才释放出来毒素。外毒素与内毒素主要区分区分关键点外毒素内毒素起源革兰氏阳性菌及少数革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌存在部位细菌外环境中细胞壁外层,菌细胞崩解后释放出来化学性质蛋白质脂多糖稳定性60~80℃,30分钟被破坏80~100℃,一小时始被破坏毒性较强,对组织有选择性毒性作用较弱,展现无选择性毒性作用抗原性良好,可脱毒变为类毒素弱,不能制成类毒素检测方法中和试验热原试验传染:是病原微生物侵入机体,在一定条件下与机体相互作用展现出一系列病理改变过程。病原菌引发传染条件:1.病原菌独立和数量;病原菌毒力强弱决定了它们能否突破机体防御屏障深入扩散生长繁殖。病原菌若没有相当强毒力,就不能引发传染;侵入动物机体内病原菌还必须有足够数量,少许病原菌侵入体内后很可能被机体免疫防御系统消亡而不能引发传染。2.传入门户:机体中各种组织器官内环境不一样,病原菌本身生物学特征亦不一样,某种病原菌在一个组织器官中,可能要比它侵入另一个组织、脏器更适宜其生长繁殖。所以对具备感受性机体而言,病原菌必须经由适当路径侵入一定部位才能生长繁殖引发传染,若未经过适当侵入门户通常不能引发传染。3.易感动物:传染时病原菌与机体这一对矛盾相互斗争过程,被感染者在这个矛盾过程中必须有感受性,出现一系列显著或不显著病理改变方能组成传染。4.环境条件:是引发传染非常主要诱因,环境条件改变首先可能增强一些病原体生理活性、毒力以及接触或侵入动物体可能性,降低动物机体抵抗力,促进传染发生;另首先也可能抑制一些病原体活性,增强动物机体抵抗力抑制传染。显性传染:侵入动物机体病原菌毒力强数量多,机体免疫防御功效相对较弱,病原菌在体内生长繁殖、产生毒性物质,造成机体严重病理损伤,展现出显著临床症状传染过程。菌血症:病原菌自局部病灶不停侵入血液,但不能在其中生长繁殖,可经过血流转移到其它组织、器官,在血流中呈一过性存在。败血症:病原菌自局部侵入血流,并在其中生长繁殖,造成机体全身性中毒或严重损害,如炭疽病等。脓毒败血症:化脓性病原菌侵入血流,不但在其中生长繁殖,而且还沿着血流转移到其余脏器形成化脓性病灶。毒血症:病原菌产生毒素进入血流引发全身中毒性疾病,如破伤风毒血症等。隐性传染:侵入动物机体病原菌毒力较弱、数量少,机体免疫防御功效较强,病原菌只能在体内有限生长繁殖、造成轻微病理损伤,不出现或仅出现轻微临床症状传染过程。隐形传染也叫亚临床传染。第八章一、中枢免疫器官:又称一级免疫器官,包含骨髓、胸腺、腔上囊等。外周免疫器官:又称二级淋巴器官,是T细胞和B细胞等定居、增值和反抗原刺激进行免疫应答场所,主要是淋巴结和脾脏。二、组成抗原基本条件:抗原必须具备异物性、大分子胶体性、结构复杂性和完整性。三、抗体:是机体在抗原物质刺激下产生一类具备与该抗原发生特异性反应免疫球蛋白。主要存在于动物血液、淋巴液、黏膜分泌物和组织液中,是组成机体体液免疫主要物质。四、各类免疫球蛋白特点1、免疫球蛋白M(IgM):因为它在血液中出现最早,含量少、消失快,在抗感染早期起着“先锋免疫”作用。在临床上经过检验IgM型抗体,能够作为一些传染病早期诊疗或近期感染指征。IgM具备沉淀、凝集、补体结合及中和病毒等多个功效也参加Ⅱ型及Ⅲ型变态反应。2、免疫球蛋白G(IgG):IgG即使在血液中出现稍迟,但含量高,维持时间长,具备抗菌、抗病毒和抗外毒素等多个活性,故有“主力免疫”作用,具备沉淀、凝集、补体结合、中和病毒和毒素等多个功效,参加Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型变态反应。3、免疫球蛋白A(IgA):主要单、双提两种形式。血清型IgA具备IgG和IgM一些功效。能在补体或溶菌酶参加下,产生溶菌作用,但在血清中并不显示主要免疫功效。4、免疫球蛋白D(IgD)极少分泌,IgD主要作为B细胞膜上特异性受体,是B细胞成熟标志。5,免疫球蛋白E(IgE)五、抗原抗体反应通常规律:一、具备高度特异性。二、具备可逆性。三、需要适宜浓度比。四、分两阶段进行。凝集反应:颗粒性抗原与对应抗体相遇后,在电解质参加下出现肉眼可见凝集物现象,称为凝集反应。反应中抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。沉淀反应:可溶性抗原(细菌培养物滤液、细胞或组织浸出液、血清蛋白等)与对应抗体在一定条件下,出现沉淀物现象称为沉淀反应。补体反应:凡是有补体参加反应称为补体反应。免疫标识技术:是
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