植物脱毒与组培快繁技术-软枣猕猴桃组培与快繁（园艺植物组织培养）

项目三软枣猕猴桃组培与快繁模块五植物脱毒与组培快繁技术123CONTENTS茎尖培养茎段培养软枣猕猴桃茎段培养项目三软枣猕猴桃组培与快繁45续代增值生根及驯化移栽软枣猕猴桃简介软枣猕猴桃为猕猴桃科猕猴桃属落叶藤本。喜凉爽湿润气候，常着生于阴坡的针阔混交林和杂木林内，或阳坡水分充足的山沟溪流旁；多攀缘在阔叶树上，枝蔓健壮，萌芽力、成枝力强，丰产性好，具有较强的抗寒性和抗病性。软枣猕猴桃因其潜在的营养价值和商用价值而具有广阔的国内外市场，是极具开发前景的第三代水果之一。软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁软枣猕猴桃组培快繁的工艺流程园艺植物组织培养外植体的采集与处理茎段诱导（初代）丛生芽增殖（继代）壮苗与生根培养驯化移栽软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养三、软枣猕猴桃茎段培养外植体的采集与处理软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养外植体：1.5cm带芽茎段。外植体预处理：流水冲洗30min。表面消毒：75%酒精20s+0.1%HgCl22min。软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养

茎段诱导（初代）软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养

初代培养基：MS+6BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3%+琼脂0.75%，PH调至6.0；白天温度25±1℃，夜间温度20±1℃，每天光照16h，光强2000~3000lx软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养四、继代增殖软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养

继代培养基：MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+蔗糖3%+琼脂0.75%；白天温度25±1℃，夜间温度20±1℃，每天光照16h，光强2000~3000lx

软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养五、生根及驯化移栽软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养

生根培养基：1/2

MS+IBA0.05mg／L；白天温度25±1℃，夜间温度20±1℃，每天光照16h，光强2000~3000lx

软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养五、生根及驯化移栽软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养移栽前，将生根后的试管苗培养瓶移入到温室内，增加光照，并逐渐打开培养瓶盖，降低瓶内湿度。7d左右取出健壮的生根苗，用清水洗净培养基，在温室内移栽到1:4的珍珠岩和草炭土中。软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养软枣猕猴桃组培与快繁园艺植物组织培养项目三软枣猕猴桃组培与快繁模块五植物脱毒与组培快繁技术继代增殖123CONTENTS软枣猕猴桃茎段培养项目三软枣猕猴桃组培与快繁45继代增殖生根及驯化移栽茎尖培养茎段培养一、茎尖培养园艺植物组织培养一、茎尖培养1.茎尖培养概念及类型2.茎尖培养方法及步骤3.影响茎尖培养的因素一、茎尖培养园艺植物组织培养

概念：切取茎的先端或茎尖分生组织进行无菌培养。

类型：根据培养目的和取材大小分为：茎尖分生组织培养（微茎尖培养）、普通茎尖培养。1.茎尖培养概念及类型一、茎尖培养园艺植物组织培养

意义：微茎尖培养可获得脱毒苗；茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗时间短，加快繁殖。

注：普通茎尖是指较大的茎尖（几毫米到几十毫米）的芽尖及侧芽。一、茎尖培养园艺植物组织培养2.普通茎尖培养方法及步骤取材材料处理及消毒培养接种驯化移栽一、茎尖培养园艺植物组织培养菊花茎尖消毒、接种操作程序图一、茎尖培养园艺植物组织培养①直接取材：在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。②从试管苗获取。

2.1取材取1-2㎝顶梢一、茎尖培养园艺植物组织培养

①顶梢切割成0.5－1.0cm的茎尖（除叶剥去休眠芽的鳞片）；②茎尖流水冲洗2－4h；

③75%酒精迅速漂洗30s；

④0.1%升汞或稀释20倍的次氯酸钠液消毒5－8min(取自老枝条上的可适当延长时间）；

2.2材料处理及消毒一、茎尖培养园艺植物组织培养

接前可再剥去一些叶片。然后随切随接，动作迅速。亦可将切下茎尖材料在1－5%VC液中浸一下。

2.3接种一、茎尖培养园艺植物组织培养培养基

①基本培养基：MS、White、B5、Heller、Gautheret②蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。③激素和有机添加物有明显影响。但激素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。讨论：茎尖生长过慢、过快、正常的现象及原因？

2.4培养一、茎尖培养园艺植物组织培养培养基

初代培养

①光强：1000－3000lx；光照时间：16h。光的作用？②温度：25℃左右③昼夜温差有或无，以植物或培养过程来定。④干燥季节注意保湿。如何做？

2.4培养一、茎尖培养园艺植物组织培养培养基初代培养继代培养

①新梢反复切段接种增殖，即微型扦插，培养基可用MS。②诱导不定芽③诱导原球茎诱导生根：1／2MS；蔗糖1－1.5%；增光。

2.4培养一、茎尖培养园艺植物组织培养一、茎尖培养园艺植物组织培养芽丛及切割一、茎尖培养园艺植物组织培养2.5驯化移栽一、茎尖培养园艺植物组织培养3.影响茎尖培养的因素褐变和玻璃化极性后生变化中间繁殖体的形态发生能力遗传稳定性基因型外植体大小生理状态芽在植株上部位母株年龄培养基二、茎段培养园艺植物组织培养二、茎段培养1.含义及意义2.材料选择与处理3.培养4.移栽园艺植物组织培养1.茎段培养含义及意义二、茎段培养园艺植物组织培养嫩枝去叶，剪3-4cm长；水冲洗1-3h,75%酒精30-60s，0.1%升汞3-8min(饱和漂白粉液10-20min，无菌水冲洗数次。注：生长期取芽，外植体取枝条顶部或中部茎段。2.材料选择与处理二、茎段培养园艺植物组织培养生根培养：NAA0.1-1.0mg/L,IAA、IBA可稍高。加0.3%活性炭的同时，增强光强和时间。培养基：MS，腋芽增殖效果：BAKT