培养基的配制-培养基种类及成分（植物组织培养技术）

任务一培养基成分与种类1培养基的分类2培养基的成分3基本培养基的类型

目录1培养基的分类2培养基的成分3基本培养基的类型

目录一、培养基的分类（一）根据态相不同：固体培养基（加琼脂的培养基）

液体培养基（不加琼脂的培养基）（二）根据培养物的培养过程：初代培养基（第一次接种外植体的培养基）继代培养基（用来接种继初代培养之后培养物的培养基）生根培养基（用来诱导试管菌生根的培养基）（三）根据营养水平不同：基本培养基（只含有大量元素、微量元素、有机营养物质）完全培养基（在基本培养基的基础上，添加植物生长调节质以及特殊

添加物的培养基）

1培养基的分类2培养基的成分3基本培养基的类型

目录二、培养基的成分通常植物组织培养所用培养基主要包括：水分、无机盐、有机营养成分、植物生长调节物质、介质、糖类。（一）水分水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。水分类型：蒸馏水、自来水、纯水等

选择：研究上，通常用蒸馏水；

生产上，可用高质量自来水。（二）无机盐类类型：大量元素和微量元素大量元素是指植物所需浓度大于0．5mmol／L的元素微量元素是指植物所需浓度小于0．5mmol／L的元素大量元素：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钙、镁、硫碳、氢、氧主要来源于水。氮：蛋白质的主要成分。

大多数培养基既含有销态氮又含铵态氮。铵态氮对植物生长较为有利。供应的物质有KN03、NH4NO3等。有时，也添加氨基酸来补充氮素。NH4+浓度过高时对培养物有毒害作用磷：磷脂的主要成分，而磷脂又是原生质体、细胞核的重要组成成分。常用的物质有磷酸二氢钾或磷酸氢二钾等。钾：调节细胞渗透压，同时是植物体内多种酶的活化剂。制备培养基时，常以氯化钾、硝酸钾等盐类提供。钾促植物生长健壮，增强抗性，茎秆挺拔。钙：是构成细胞壁的一种成分，钙促进幼根生长。常以CaCl2·2H20提供。镁：镁影响酶的活性，并决定新陈代谢过程。硫：硫是含硫氨基酸和蛋白质的组成成分。它们常以MgS04·7H20提供。微量元素：主要有铁、锰、锌、铜、硼、碘、钼、钴铁:

铁是一些氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等的组成成分。同时，它又是叶绿素形成的必要条件。微量元素中，铁的使用量最大。在制做培养基时用FeS04·7H20和Na2-EDTA（乙二胺四乙酸二钠）结合成螯合物使用。锰：参与植物的光合、呼吸代谢过程，影响根系生长。锌：是各种酶的构成要素，能增强光合作用效率，参与生长

素的代谢，促进生殖器官发育和提高抗逆性。铜：有促进离体根生长的作用。硼：能促进生长器官的正常发育，参与蛋白质合成或糖类运输。钼：参与氮素代谢（三）、有机营养成分主要包括：各种维生素、肌醇、氨基酸和天然有机添加物。维生素主要有盐酸硫胺素（VB1）、盐酸吡哆醇(VB6)、烟酸（VB3）、抗坏血酸（VC）、泛酸钙、生物素（VB7）、叶酸（VB11）、钴胺素、VB2等。一般用量为0.1～1.0mg／L。有时用量较高。其中盐酸硫胺素可全面促进植物生长；抗坏血酸有抗氧化功能，防止褐变；盐酸吡哆醇能促进根的生长。Vc有防止组织变褐的作用。维生素具有热易变性，易在高温下降解，可进行过滤灭菌肌醇使用浓度一般为l00mg／L，适当使用肌醇，能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。氨基酸是很好的有机氮源，是蛋白质的组成成分，可直接被细胞吸收利用，对外植体的芽、根、胚状体的生长、分化均有良好的促进作用。

培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。

有时应用水解乳蛋白或水解酪蛋白，它们是含有约20种氨基酸的混合物，用量在10～1000mg／L之间。由于它们营养丰富，极易引起污染。天然有机添加物其成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。它对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显。主要有椰乳、酵母提取液、马铃薯、香蕉汁、番茄汁等椰乳：在愈伤组织和细胞培养中作用明细，一般使用浓度为10-20%香蕉汁

用量为150～200ml/l。用黄熟的小香蕉，加入培养基后变为紫色。对pH值的缓冲作用大。主要在兰花的组织培养中应用，对发育有促进作用。马铃薯

去掉皮和芽后，加水煮30min，再经过过滤，取其滤液使用。用量为150～200g／L。对pH值缓冲作用也大。添加后可得到健壮的植株。（四）、生长调节物质是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、分裂、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠以及萌发等许许多多的生理生化活动。在培养基的各成分中，植物激素是培养基的关键物质，对植物组织培养起着决定性作用常用的有生长素类和细胞分裂素类。生长素类

常用的生长素类有IAA(吲哚乙酸)IBA(吲哚丁酸)NAA(萘乙酸)

2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)NAA和IBA广泛用于生根，并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。细胞分裂素类主要有：6-BA(6-苄基氨基嘌呤)、Kt(kinetin激动素)、Zt(zeatin玉米素)等。其中Zt活性最强，但非常昂贵，常用的是6-BA。赤霉素GA培养基中添加的是GA3赤霉素不耐热，高压灭菌后将有70％～100％失效，应当采用过滤灭菌法加入。（五）、糖类

糖作为碳源在植物组织培养中是必不可少的，它不仅能够提供给植物材料能量，而且也能维持一定的渗透压。常用的糖是蔗糖、葡萄糖、果糖和山梨糖等，麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖在组织培养中也有应用。蔗糖使用浓度在2％～3％，在大规模生产时，可用食用白糖作为碳源。（六）、介质或载体琼脂(agar)在固体培养时琼脂是最好的固化剂。琼脂的用量在6～10g／L之间。卡拉胶又称为鹿角菜胶、角叉菜胶。卡拉胶的水溶性很好，在70℃开始溶解，80℃则完全溶解。卡拉胶在国内外组培上已经大量使用。（七）、其他物质抗生物质主要有青霉素、链霉素、庆大霉素等活性炭1培养基的分类2培养基的成分3基本培养基的类型

目录三、基本培养基的类型1、含盐量较高的培养基主要包括MS、LS、BL、ER培养基等特点：无机盐浓度高，特别是硝酸根离子、钾离子和铵离子含量丰富。2、硝酸钾含量较高的培养基

主要有B5、N6、SH培养基等