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文档简介
(无蛋白血滤液制备的基本原理是以蛋白质沉淀剂沉淀蛋白过滤法或离心法除去沉淀的蛋白常用的方法有三氯醋酸法氢氧化锌法黑灯改良法及福林-宪法(钨酸法实验采用最后一种方法,即钨酸法制备无蛋白滤液。·实验原理:钨酸钠与硫酸混,生成钨酸。血液中的蛋白质在小于其等电点的溶液中时,可被钨酸沉淀。沉淀液过滤或离心,上清液即为无色、透明、pH约为6的无蛋白血滤液。可供非蛋白氮、血糖、氨基酸、尿素、尿酸及氯化物等项目测定使用。·实验试剂:10%钨酸钠溶液,mol/L硫酸溶液·实验对象:新鲜鸡血·操作步骤:eq\o\ac(○,1)eq\o\ac(○,)取50ml锥形瓶或大试管1支,吸取充分混匀的抗凝血份(1ml净管外血液,缓慢放入锥形瓶或试管底部eq\o\ac(○,2)eq\o\ac(○,)准确用10ml移液管加入蒸馏水,随加随摇,但也不能过于剧烈eq\o\ac(○,3)eq\o\ac(○,)再加入1ml硫酸溶液,随加随摇eq\o\ac(○,4)eq\o\ac(○,)放置约5min后振摇不再发生泡沫蛋白质已完全变性沉淀,用滤纸过滤后即得完全无色的无蛋白血滤液18
·实验过程(附图28
33取样这未入馏的凝,观到色艳亮没凝块或质加清水混匀蒸馏水随加随摇于血液中后可以观察到无任何变化,只是血液颜色稍稍变浅,血液粘稠度有所下
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3.加入硫酸溶液加入硫酸溶液并混匀后,可以观察到血液颜色变得暗淡,但并没有出现凝聚等反应现象,这一步主要是为钨酸(钠)与血液中的蛋白反应提供酸性环境。4.加入钨酸钠溶液58
加入钨酸钠溶液并且混匀后可观察到血液颜色变为棕褐色且变得浑浊有气泡容器壁上有痕渍,这是因为血液中的蛋白与钨酸作用而发生沉淀的结果5.过滤收集清液68
滤过后可看到离心管中的血清液无色澄澈,故实验操作成功附录:以上实验过程(图片)是第二次操作的结果,第一次操作时因为加入试剂时过快,没有做到随加随摇,故有很多气泡,效果不是
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