苏教教学课件微生物的培养基一课件

第一节第一课时微生物包括哪五类：病毒细菌放线菌真菌原生动物特点：结构都相当简单,多数个体十分微小(<o.1mm)的生物的总称。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.

原核

原生生物界真菌界病毒界真核病毒

SARS病毒禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）真菌如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌青霉

了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。

一、课题目标：

掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：三、技能目标：（2）按培养基的物理形态分：液体培养基半固体培养基固体培养基一基础知识:（3）按培养基的功能分：P12基础培养基选择培养基鉴别培养基（1）按培养基的化学成分分：·天然培养基·合成培养基·半合成培养基阅读课本P8第三段分别说出它们的优点、缺点。各种培养基的具体配方不同，但一般都包括哪些成分？答：不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质。

注：另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。

二无菌技术：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。阅读P8---P9说出消毒和灭菌有何不同？1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源4、紫外线消毒……(1)常用消毒的方法：1、灼烧灭菌:2、干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.(2)常用灭菌的方法：分类定义方法灭菌法杀灭一切微生物物理法：热力、辐射、微波、等离子体化学法：醛类、烷化剂高效消毒法杀灭一切致病微生物紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等中效消毒法杀灭除芽孢外的致病微生物超声波、碘类、醇类、酚类低效消毒法杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子无菌技术：常蝇识1．脱无菌疾技术脂包括咱：（1）对溪实验司操作吨空间楚、操向作者疤的衣乘着和沈手进东行清洁桶和消恰毒；（2）将柿培养配器皿遭、接丝式种用竿具和治培养啦基等奴器具搁进行灭菌；（3）为蜡避免伞周围瘦微生应物污轧染，索实验头操作舒应在酒精灯灯火刘焰附暖近旁进哪行；（4）避妙免已耍灭菌罪处理盆的材惜料用爪具与周围酸物品相接壁触。2．树消毒悲方法衫：（1）日扛常生淹活经哗常用冷到的甘是煮沸消毒捉法；（2）对计一些巷不耐偏高温妹的液乒体，储则使涝用巴氏消毒侍法（佛作简圾要介配绍）槽；（3）对降接种恳室、平接种咽箱或甩超净份工作棕台首径先喷族洒石炭笔酸或加煤酚败皂等溶孔液以塔增强学消毒德效果隶，然淡后使深用紫外稿线进行版物理甲消毒美。（4）实才验操铸作者灵的双胡手使排用酒精进行榆消毒没；（5）饮耕水水羽源用氯气进行哀消毒争。3．灭详菌方斜法：（1）接析种环坏、接肉种针注、试怎管口着等使吸用灼烧灭菌糕法；（2）玻亮璃器狱皿、布金属田用具怒等使救用盼干热疾灭仗菌法例，所游用器想械是干热乐灭菌竖箱；（3）培欠养基扒、无死菌水警等使缠用趋高压票蒸汽灭菌纷法，所窝用器畜械是高压字蒸汽漫灭菌膜锅。（4）表齿面灭病菌和云空气竹灭菌救等使舍用紫外者线灭菌瓣法，国所用蝇器械厨是紫外业灯。三、贯实验否操作1.制备逮牛肉伴膏蛋田白胨缸培养浸基（秧用于桐培养扣细菌金）【补充】培养现基的矮配制暂原则态：①目的闷要明夹确：根据芝培养梢的微拍生物种种类牛、培睡养的析目的尼等确门定培洲养基让的类喝型和继配制习量。②营养晕要协言调：培养掘基中锯各种宝营养跟物质比的浓凑度和虽比例餐要适蹄宜。恋例如夹：碳畅氮比4∶兆1时，脖谷氨斤酸棒挺状杆竟菌大诊量繁拿殖而凉产生略谷氨披酸少侨；碳恰氮比视为3∶滨1时，专菌体牵繁殖疯受抑秒制而尘谷氨嚷酸合台成量材大增趟。③pH要适持宜：细耍菌培梁养基pH中性缎或偏松碱性饱，霉悼菌培吉养基刘呈酸弹性。1．配职制：跳计算、称量、熔化2．调咐节pH：姜用3%的HC强I/抚Na轿OH调节pH际7．0-负--歼7．23．分程装：谊分装竹过程川中注义意不尿要使毯培养兼基沾在婶管口疤或瓶隆口上施，以哗免沾班污棉畏塞而引唤起污浑染。哗分装炊三角茄烧瓶动的量以不齐超过付三角钓烧瓶乞容积陆的一胶半为饱宜。4．包滋扎：操作欲步骤:5．灭员菌:将50够ml培养文基用玻产棒转庄移至余三角继锥瓶辽中，武塞上汗棉花笛塞，贡包上雷牛皮问纸，剑再放故入高压凑蒸气灭菌把锅，湾在压当力为10兽0k准Pa、温饼度为12酸1℃，灭救菌15～30介mi剂n。将培养惊皿用旧味报纸劣包裹唇，放尺入干热氧灭菌箱内遍，在16执0～17舍0弹℃下灭尽菌2h。6．倒验平板:待培币养基冷却嘴到50桶℃左右猪时，剪在酒谋精灯帮附近搞倒平俘板。2d后观岛察平接板，枝无杂显菌污篮染才娘可用孩来接逆种.7．无录菌检箭查：将灭谊菌的捧培养团基放详入37葛℃的温格室中宣培养24映—4校8小时吓，以剥检查平灭菌堂是否如彻底投。倒平位板:菌种肿的保拆存1、临宽时保队藏：似接种竭到固乒体斜摩面培功养基慢，菌熔落长闯成后讨置于4℃冰箱挖保存己。2、长获期保默存：抓甘油帝冷冻听管藏翠法1.培养起基灭奔菌后气，需别要冷落却到50御℃左右弹时，成才能放用来鼻倒平陕板。封你用我什么竖办法稀来估泡计培古养基绣的温晃度？问题效讨论答：可以起用手日触摸守盛有姓培养谎基的萝锥形把瓶，妻感觉征锥形它瓶的验温度假下降殿到刚急刚不辅烫手赖时，享就可粪以进类行倒猎平板穿了。2.为什午么需荡要使帆锥形驶瓶的膀瓶口承通过刑火焰扑？答：鸡通过歌灼烧僻灭菌大，防渴止瓶利口的雄微生途物污桃染培鞭养基蒜。注意:3.平板掠冷凝胆后，尺为什权么要刑将平忆板倒撤置？4.在倒茂平板单的过摆程中懂，如哨果不蒙小心治将培浅养基仁溅在蚊皿盖晨与皿念底之俯间的蹈部位船，这卸个平脖板还星能用朵来培晓养微姥生物控吗？粉为什班么？答：脸平板殃冷凝笑后，厉皿盖书上会替凝结千水珠沈，凝均固后历的培欧养基产表面荡的湿筒度也女比较来高，牛将平约板倒沾置，漏既可慨以使美培养松基表鞭面的拖水分段更好榜地挥瘦发，联又可缓以防愉止皿苦盖上位的水顽珠落财入培众养基耐，造股成污裙染。答：鼠空气县中的义微生扩物可盟能在塔皿盖慎与皿确底之架间的初培养剖基上耐滋生浆，因南此最辜好不轮要用貌这个为平板嫩培养却微生邀物。选择盘培养蕉基加入青霉斗素的培跨养基:分离秋酵母苦菌、疤霉菌坝等真博菌加入限高浓盏度食盐的培吉养基:分离闻金黄鹅色葡楚萄球占菌不加殃氮源乘的无氮培养佣基:分离柜固氮胃菌不加慕含碳逢有机阁物的无碳培养阅基:分离偶自养颠型微幅生物加入青霉舒素等葵抗生验素的培便养基:分离巧导入席了目线的基胃因的化受体愁细胞加入氨基爱喋呤月、次目黄嘌如呤和泛胸腺瓦嘧啶踩核苷的培妙养基:分离位杂交肠瘤细杠胞2、纯团化大光肠杆裹菌:接种秤方法施有：平板持划线送法和茂稀释皇涂布丛平板硬法平板抵划线漆法:通过哥接种败环在钟琼脂链固体齐培养朋基表姿面连震续画罩线的形操作,将聚瓣集的及菌钟严逐步槽稀释羊分散恐到培怖养基贡的表竭面.在数植次画贵线后,可以港分离蔽到由袜一个绕细胞拣繁殖哨而来州的肉络眼可虽见的蒸子细叛胞群孝体,这就术是菌脸落.微生亮物的苦接种蛙技术划线件后策培坊养一腔段时角间后微生客物的柴恒温阿培养微生释物的窝恒温旨培养问题佛讨论1.为什队么在榨操作培的第趟一步叉以及珠每次传划线银之前倚都要做灼烧串接种李环？请在划戏线操千作结速束时赖，仍熟然需叛要灼览烧接充种环兽吗？迫为什锯么？答：仙操作瓜的第漂一步揭灼烧帅接种护环是哑为了蛾避免牛接种冤环上嘱可能勤存在旨的微汗生物荣污染树培养认物；华每次策划线何前灼任烧接谨种环商是为县了杀宝死上呜次划廊线结取束后休，接搏种环载上残揪留的抹菌种习，使伶下一欧次划踢线时弄，接务种环吩上的姜菌种别直接斤来源尼于上削次划弄线的旦末端旷，从镜而通途过划睛线次海数的劣增加蹈，使授每次肾划线缎时菌养种的姿数目码逐渐腾减少拢，以五便得背到菌塑落。竞划线愉结束嘉后灼慨烧接俩种环告，能踢及时嘉杀死快接种山环上纠残留暑的菌谷种，午避免松细菌上污染隆环境雀和感灿染操妈作者姐。2.在灼匪烧接匙种环对之后码，为身什么所要等尸其冷充却后匠再进前行划客线？答：寺以免拒接种著环温遍度太化高，知杀死盒菌种刮。3.在作范第二赠次以躲及其焦后的猾划线篇操作爱时，递为什冬么总泊是从勉上一鞭次划电线的裙末端纵开始已划线？答：嚼划线异后，贱线条境末端虎细菌向的数局目比总线条略起始漠处要仇少，弄每次疤从上俘一次筝划线恰的末咱端开桃始，畅能使秃细菌瞒的数捕目随令着划浅线次询数的今增加侵而逐圣步减粘少，船最终看能得追到由刚单个孟细菌辣繁殖皮而来桑的菌倡落。四、地课题少成果撞评价（一娱）培户养基要的制抽作是毫否合截格如果棒未接巨种的笔培养挽基在扩恒温皱箱中下保温1～2增d后无键菌落阵生长主，说缠明培器养基刻的制望备是赌成功驾的，小否则乌需要她重新秘制备支。（二织）接饱种操脖作是糠否符恩合无京菌要津求如果微培养哀基上腾生长帮的菌良落的党颜色元、形藏状、稍大小挖基本驳一致浴，并结符合柄大肠吗杆菌励菌落怎的特耕点，磁则说熔明接讽种操村作是踢符合际要求圈的；本如果戚培养仁基上佛出现兼了其胀他菌柱落，意则说追明接扰种过处程中兆，无立菌操漂作还贪未达纱到要阁求，兽需要慈分析煎原因岸，再淋次练揉习。（三肌）是荐否进映行了舅及时慰细致鄙的观卵察与拒记录培养12俭h与24温h后的华大肠宴杆菌缩慧菌落值的大亡小会妇有明透显不锅同，休及时访观察执记录绑的同垄学会胸发现捉这一饲点，梅并能汁观察透到其誉他一皱些细好微的鼠变化颂。这廊一步按的要赏求主求要是欺培养刷学生因良好锁的科污学态丢度与希习惯座。本课肾题知鞭识小市结:【典例担解析】例1．关见微生煌物营育养物泉质的流叙述遥中，踩正确昂的是:A.是碳丧源的正物质哑不可寨能同兵时是企氮源B.凡碳贫源都类提供敌能量C.除水枕以外统的无罩机物久只提逗供无秤机盐D.无机屋氮源艰也能弊提供涂能量解析日：不同行的微盘生物岛，所中需营趣养物硬质有页较大嘱差别昌，要肥针对舍微生曲物的嘉具体酱情况勒分析麻。对盐于A、B选项锣，它脱的表换达是揪不完投整的套。有盈的碳洲源只诉能是哑碳源莫，如告二氧笑化碳勤；有彩的碳科源可堆同时煌是氮扰源，殿如NH4HC尊O3；有策的碳命源同若时是亮能源芽，如椅葡萄本糖；悄有的庆碳源吃同时在是氮凯源，侮也是柳能源凑，如持蛋白疼胨。蜻对于C选项阳，除镇水以饥外的织无机踩物种贴类繁禾多，孤功能致也多烧样。桃如二哥氧化杏碳，努可作望为自锋养型编微生就物的衬碳源壳；Na今HC另O3，可检作为援自养客型微脱生物键的碳逮源和薪无机仍盐；辟而Na顶Cl则只储能提趁供无逮机盐钱。对屋于D选项畜，无捷机氮句源提们供能圆量的沉情况荒还是路存在街的，烧如NH3可为斜硝化绣细菌则提供坦能量冬和氮慨源。答案爆：D例2．下敌面对捆发酵腹工程仙中灭捎菌的厚理解不正秧确的是:A.防止倦杂菌怎污染B.消灭垮杂菌C.培养店基和报发酵寄设备辫都必征须灭劳菌D.灭菌也必须斥在接川种前答案理：B解析惊：灭菌做是微斥生物胞发酵怨过程饺的一敞个重绑要环摔节。A说的箩是灭色菌的堂目的旱，因物为发胸酵所柄用的贪菌种栏大多斥是单抽一的邀纯种立，整格个发炎酵过隆程不作能混训入其仪他微道生物翠（杂暗菌）更，所惨以是哨正确号的；B是错闭误的易，因配为灭凡菌的狐目的响是防够止杂够菌污止染，季但实秘际操访作中钩不可俱能只遮消灭营杂菌蜓，而稀是消系灭全朴部微雪生物乖。C是正哲确的浅，因性为与吃发酵匹有关顺的所汽有设嘴备和走物质息都要浮灭菌击；发界酵所鬼用的键微生寸物是扁灭菌茅后专惯门接防种的辰，灭拣菌必游须在冠接种迎前，干如果哥接种痰后再逝灭菌皆就会狼把所坑接菌旱种也默杀死纹。编号成分含量①粉状硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml例3．右带表是春某微拴生物威培养丹基成盼分，莲请据闲此回榆答：（1）右窗表培验养基生可培六养的穴微生饭物类镰型是（2）若啊不慎搜将过矩量Na琴Cl加入说培养勾基中敢。如不些想浪鹊费此烈培养暑基，俗可再朽加入.用于跌培养炎金黄域色葡怜萄球潜菌.自养着型微鉴生物含碳奔有机虑物（3）若基除去情成分阔②，闯加入犬（CH2O），浊该培烫养基熊可用右于培露养。（4）表逝中营拖养成键分共影有类。（5）不逼论何麻种培娘养基沟，在煎各种斜成分蛮都溶怀化后衔分装赌前，浑要进殃行的算是。（6）右脏表中征各成祥分重嗽量确负定的巾原则梢是。（7）若横右表证培养干基用乏于菌效种鉴畜定，智应该席增加胡的成景分是。固氮愿微生坦物3调整pH依微巧生物尺的生窄长需雷要确持定琼脂残（或爹凝固