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念珠菌感染的特性与耐药性分析目的探讨念珠菌感染的特点及耐药性情况,为临床合理选用抗真菌药物提供实验室依据。方法应用回忆性调查分折的方法,对我院1年间住院病人、门诊病人标本别离的193株念珠菌进展统计并对常用抗真菌药敏试验结果进展分折。结果别离出的念珠菌以内科系统为主,共别离出136株(占70.47%);检出真菌最多的部位是呼吸道,占真菌标本的76.17%;其种类以白色念珠菌及热带念珠菌为主,分别占73.58%和15.54%;药敏结果中:两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率,特比蔡芬对白色念珠菌的敏感率仅6.3%,但对热带念珠菌的敏感率为100%o结论加强临床真菌别离菌株对抗菌药物的耐药性关注,根据药敏试验合理应用抗真菌药物十分重要。关健词:念珠菌,感染特性,耐药性目录第一章绪论1念珠菌简介1.2念珠菌致病机理3念珠菌影响因素1.4念珠菌相关感染第二章念珠菌感染特性及耐药性分析1材料与方法2结果3讨论第一章绪论念珠菌简介念珠菌是一种腐物寄生菌,广泛存在于自然界。是人体正常菌群之一,平时主要存在于人体的口腔、皮肤、粘膜、消化道、阴道及其他脏器中。正常人群白色的带菌率可高达40%;从阴道粘膜别离出来的念珠菌85%-90%为白色。而白色的致病性最强。2致病机理念珠菌是一种条件致病菌,念珠菌的致病性是相对的。侵入人体后是否发病取决于人体免疫力的上下及感染菌的数量、毒力。在正常情况下,寄生在人体内的念球菌呈酵母细胞型,一般不致病。在机体某些生理、病理因素影响下,阴道或阴茎内环境改变,机体抵抗力或免疫力降低时,念珠菌就会大量繁殖开展为菌丝型,侵犯组织,到达一定量时,人体就会发病,引起临床病症。这些因素通常包括妊娠、糖尿病、口服避孕药、长期应用广谱抗生素、免疫抑制剂及皮质激素使用等使机体免疫力下降,或改变阴道内环境的情况下,妇女阴道上皮细胞糖原增加,酸性增强,白色念珠菌会繁殖引起念珠菌感染,如阴道炎,故本病常见于孕妇、糖尿病患者及承受雌激素治疗的患者。此菌还可引起龟头炎。致病力影响因素念珠菌的致病力和以下因素有关:①粘附力;粘附力与毒力成正比,在念珠菌属中白念珠菌粘附力最强;②两型性形态:当感染时,白念珠菌常呈菌丝型。菌丝型的毒力比酵母型的毒力强;③毒素:菌细胞外表的多糖毒素和另一种被称为“念珠菌毒素〃可能是致病的因素;④细胞外表成份;⑤细胞外酶:白念珠菌可产生分泌一些酶,如溶血磷脂酶、磷脂酶和细胞外酸性蛋白酶(CAP)等。其中以CAP最为重要。CAP不仅能水解蛋白质,并能水解角蛋白及胶原,具有促进白念珠菌的粘附功能。相关感染白念珠菌感染,首先是粘附在宿主的上皮细胞上,然后在以上所述的白念珠菌致病因素作用下形成感染灶。粘附在上皮细胞是因为宿主细胞膜外表上有白念珠菌的粘附受体,即岩藻糖和N-乙酰葡萄胺;白念珠菌胞壁上具有多种粘附介导体,其中较为重要的有甘露聚糖一一蛋白质复合物(M-P)和几丁质。几丁质是(1-3,1-6) 葡聚糖与N-乙酰葡萄糖受化合物而成的立体空间多聚体;白念珠菌胞壁具有纤维蛋白原,纤维连接蛋白等成分的粘着受体。而这些成分广泛分布于血管壁、炎症和创伤愈合等部位,有极强的粘着性,与白念珠菌粘附后能桥连白念珠菌与宿主细胞间的粘附,使白念珠菌更容易粘附和侵袭宿主。第二章念珠菌感染特性及耐药性分析随着科学技术的开展,广谱抗生素、免疫抑制剂及各种侵入性诊断治疗的广泛应用,时机致病菌念珠菌感染在近年明显增多。真菌感染已成为白血病,淋巴瘤,免疫抑制,长期使用广谱抗生素,中心静脉插管,中性粒细胞减少,烧伤,低体重的早产儿,血液透析,骨髓或器官移植,胃肠道手术和机械通气等特殊人群的严重感染性疾病⑴⑵。并且念珠菌对常用的抗真菌药物存在耐药菌株,给临床治疗带来很大困难。我们对临床标本别离的193株念珠菌属的感染类型及药敏进展分析,现将结果报道如下:2.1材料与方法1.1材料1.1.1标本来源193株念珠菌来自我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。1.1.2仪器VITEK-AMS32全自动微生物分折仪,法国Bio-Merieux公司制造。1.1.3试剂YBC卡为Bio-Merieux公司配套产品,念珠菌chromGA显色培养基(法国科玛嘉公司提供),8种抗真菌药物:两性霉素B、5-氟胞喀咤、氟康嗖、酮康理、咪康建、制霉菌素、伊曲霉素、特比秦芬(辉瑞公司提供)。1.4质控菌株白色念珠菌ATCC90029,购自卫生部临检中心。氟康噗可承受的抑菌环直径范围为28-39mm。1.2方法细菌别离鉴定按《全国临床检验操作规程》⑶进展培养别离,别离所得念珠菌采用chromGA显色培养基或用VITEK-32YBC卡鉴定到种的水平。细菌药敏试验采用2003年美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)认可的酵母菌纸片扩散法进展敏感性试验。Mueller-Hinton(MH)琼脂中补充2%葡萄糖和0.5mg/L美蓝⑷。酵母菌在无菌生理盐水中稀释,比浊至0.5号麦氏管浊度,酵母菌量约为IX106〜5X106/ml,均匀的涂抹在4nlm厚平皿培养基上,贴上药敏纸片后,放置35℃孵箱,24小时判断结果。质控菌株同时进展K-B法药敏试验,结果符合NCCLS质控要求。2.1念珠菌的分布:193株念珠菌分布在10多个科室,以内科系统为主,共别离出136株(占70.47%);外科系统别离出28株(占14.51%)。分布构成(见表1)表1 193株念珠菌分布的科室构成科室株数构成比%科室株数构成比%内科系统13670.47外科系统2814.51呼吸5126.42胸夕卜84.15干部病房2211.40脑夕卜52.59血液199.84外科重监室42.07内科重监室136.74肝胆42.07消化105.18骨科52.59神经84.15泌外、普外21.04心内52.59其它系统2814.51肾病科42.07儿科105.18内分泌21.04妇产科21.04风湿10.52门诊115.70中医10.52其它63.12念珠菌的临床标本分布:念珠菌的感染来自临床各类标本。其中以痰标本为主,别离出147椒占76.17%);生殖系分泌物别离出10株(占5.18%);尿别离出8株(占4.15%);口腔分泌物别离出5株(占2.59%);其它标本别离出23株(占11.92%)o193株念珠菌的种类和对抗真菌药物的药敏结果(见表2):白色念珠菌在念珠菌感染中别离率最高,别离出142株(占73.58%);药敏结果中:两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率,特比蔡芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%,但对热带念珠菌的敏感率为100%。表2:念珠菌对抗真菌药物的药敏结果抗真菌药物白色念珠菌(n=142)热带念珠菌(n=30)其它真菌(n=21)合计(n=193)SIRSIRSIRSIR两性霉素95.0721128296.67333•••71.4219.0595292.754.153.115-氟胞喀咤20.421.4178.17301060142923.8161.921245.187358氟康噗70.4225354237026.6733380.95•••19.05715022.805.70酮康噗43.6647.898.456040•••66.6728574.7648.7044566.74咪康噗253555.6319.02•••208038.1047.62428622.8046.1131.09制霉菌素97.890.701.41100••••••9524•••4.7697.93052155伊曲霉素81.69105675586.671033371.4395219.0581351036829特比泰芬6307.0986.61100••••••41.1852%5.888.625.7085.062.3讨论2.3.1念珠菌的感染特性:调查说明念珠菌感染的患者主要分布在呼吸、血液、消化、肿瘤等内科科室及儿科,尤其是呼吸科患者念珠菌感染所占比例高达26.42%,与一些有关报道不同⑸,原因可能是该病区的患者多为长期患病的老年人。机体对真菌感染的易感性主要与宿主防御功能有关⑹,老年人因生理防御功能、免疫功能衰退,白细胞介素2(IL-2)的产生减少,致使T细胞增殖能力减弱,易引起念珠菌感染,本组病例>50岁患者占78.24%,故真菌感染率升高;其次是血液、消化、内科监护室、干部病房、儿科,主要是由于体弱、免疫力低下、病情较重,长期反复使用多种抗生素等因素,导致体内微生态的平衡紊乱,造成菌群失调,抑制了常见的条件致病菌,使真菌大量繁殖。各种临床标本中,痰液标本检出率最高⑺,事实上痰液的细菌检测多为混合型感染,由于正常人的上呼吸道也存在少量的真菌,使检出率大于感染率。故我们应重视真菌的镜检标准化⑻,告知患者正确的留取痰液的方法,念珠菌存在于自然界及正常人的口腔、胃肠、阴道、皮肤上,白色念珠菌是条件致病菌,当全身或局部免疫力降低时可出现临床病症。白色念珠菌在念珠菌感染中别离率最高,占73.58%,白色念珠菌同时是致病力最强且具有抑制机体免疫功能的能力⑼,其感染可分为内源性何和外源性的。正常情况下,人体内部正常菌群与病原微生物相互抑制生长,处于相对平衡状态,当使用抗生素后,敏感细菌被抑制或杀灭,则使白色念珠菌繁殖,导致真菌感染。2.3.2念珠菌的耐药特性:抗真菌药的类型不同,对不同种真菌的体外抗菌活性有较大的差异口”我院采用两性霉素B、5-氟胞喀咤、氟康喋、酮康喋、咪康噗、制霉菌素、伊曲霉素、特比蔡芬8种抗真菌药物,念珠菌对其敏感率依次为92.75%、21.24%、71.50%、48.70%、22.80%、97.93%、81.35%、8.62%,传统的两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率,可作为治疗念珠菌感染的常用药物。两性霉素B抗菌谱广,但副作用较大,故用药过程中要严密观察其肾毒性口口;而
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