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学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精PAGE6学必求其心得,业必贵于专精PAGE四、加试非选择题(32~33题)专练加试特训1生物技术实践(A)1.尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响,但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用,才能被植物吸收利用。某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌,并尝试进行计数,培养基配方如下:K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚红琼脂0.12g0.12g15mL0。025g2。0g0.25mg0.5g(1)分解尿素的细菌都能合成________,该种细菌在生态平衡中起到______________的作用。(2)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?________(填“能”或“不能"),原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)分离得到分解尿素的细菌后,如果要扩大培养,则应选择________培养基进行培养.培养一段时间后,使用________对微生物细胞进行计数。计数过程中,下列哪种行为会影响计数的准确性________。A.计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数B.如果方格内微生物细胞数量多于300个,培养液先稀释后再计数C.如果微生物细胞有粘连,要数出团块中的每一个细胞D.压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数答案(1)脲酶参与氮循环(或维持氮平衡)(2)不能琼脂是未被纯化的混合物,内含一定的含氮化合物,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(3)液体血细胞计数板A解析分解尿素的细菌都能合成脲酶,因此可以选用以尿素为唯一氮源的培养基来分离尿素分解菌,并且用琼脂糖来代替琼脂作为微生物培养基的固化剂,这样就使培养基中只含有尿素这一种含氮化合物,有利于对这种细菌的筛选。(1)含有脲酶的细菌将尿素降解为氨作为其生长的氮源,从而也起到维持生物圈氮元素平衡的作用.(2)因为琼脂是一种未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物,不利于目的菌的筛选,所以该培养基不能分离出分解尿素的细菌。(3)扩大培养需要使用液体培养基,微生物的计数可以采用涂布分离法或利用血细胞计数板进行显微计数,结合后续选项可以看出本题采用的是后者。计数过程需要注意操作规范,如A选项所述的操作会影响计数的准确性,计数前应该把试管上下倒转数次,使细菌分布均匀,再取培养液进行计数。2.某市葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题,引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工,获得了较好的效益,其生产流程如图所示,据图回答:(1)在筛选菌种A时,需要在接种前用________________法对葡萄果汁进行灭菌。(2)在纯化菌种A时接种了5个平板,每个平板均接种了0.1mL样品并培养.其中乙平板的菌落分布如图,纯化菌种A的接种方法是____________,推测出现平板乙可能的操作失误是________________.(3)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和____________。(4)将葡萄加工成果汁时,为提高果汁的产量和品质,应加入适量的______酶,该酶能破坏植物细胞的________(填细胞结构).答案(1)高压蒸汽灭菌(2)涂布分离法涂布不均匀(3)细胞分裂素(4)果胶(果胶酶和纤维素)细胞壁解析(1)培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。(2)分析图乙中培养基培养结果,培养基中的菌落没有呈线形分布,可以推知采用的纯化方法是涂布分离法;由于菌落有聚集现象,可以推知平板乙可能的操作失误是涂布不均匀,导致菌落分布不均匀.(3)进行植物组织培养时,培养基中常常添加的植物激素有生长素和细胞分裂素。(4)果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等,它们能催化果胶的分解,水解植物细胞壁,从而使果汁变得澄清,提高产量和品质。3.(2017·浙江模拟)如图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程,请回答下列问题:(1)该实验培养基应该含有________(多选)。A.尿素 B.氯化钠C.葡萄糖 D.琼脂糖(2)尿素溶液可用________________使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底,可以采用的方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)图中步骤C为________.相对于划线分离法,过程D涂布分离法的优点是________________________________________________________________________。(4)如果菌落周围出现________色环带,说明该菌落能分泌脲酶。答案(1)ABCD(2)G6玻璃砂漏斗过滤将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间,观察有无菌落出现(3)倒平板单菌落更易分开(4)红解析(1)分解尿素的细菌是异养微生物,因此培养基中应该加入有机碳源,如葡萄糖;分离分解尿素的细菌培养基从功能上分应属于选择培养基,应该以尿素为唯一氮源;从物理性质上分应属于固体培养基,因此应加入凝固剂琼脂糖。故选:ABCD。(2)尿素溶液可用G6玻璃砂漏斗过滤使之无菌.若要检查B过程灭菌是否彻底,可以采用的方法是将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间,观察有无菌落出现.(3)图中步骤C为倒平板.相对于划线分离法,过程D涂布分离法的优点是单菌落更易分开。(4)如果菌落周围出现红色环带,说明该菌落能分泌脲酶,脲酶分解尿素产生氨,使pH升高,酚红指示剂颜色发生变化。4.多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用,是土壤、河水中常见的污染物之一。下图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤。请回答:(1)步骤①→③的培养过程中,培养液中加入多环芳烃菲作为唯一碳源,目的是__________________________。(2)步骤①→③的培养过程中,需将锥形瓶放在摇床上振荡,一方面使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;另一方面能__________________________。(3)步骤④用划线分离法纯化菌株Q的过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是__________________________。采用固体平板培养基培养细菌时要倒置培养的目的是________________________________。(4)接种环通过灼烧来灭菌,完成步骤④中划线操作,共需灼烧接种环________(A.4B.5C.6D.7)次。(5)为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株,研究人员又对菌株Q进行了诱变处理,得到突变株K。为了比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力,设计了下列实验,请补充实验步骤:①取9只锥形瓶均分成3组,编号A、B、C。②向9只锥形瓶中分别加入________________为唯一碳源的培养液。③向A、B、C3组培养液中分别加入______________________________________________.④28℃恒温培养3天后,测定锥形瓶中多环芳烃菲的降解率。答案(1)筛选出菌株Q(2)增加培养液中的溶氧量(3)线条末端细菌的数目比线条起始处少(或能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落)防止冷凝后形成水珠滴在培养基上污染培养基(4)C(5)②等量的多环芳烃菲③等量的无菌水、菌株Q菌液和突变株K菌液5.回答下列关于微生物和酶的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示:(1)①过程称为________,②过程是为了________________。(2)Ⅰ号培养基称为________________(按功能分);该培养基中除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分____(A。琼脂B.葡萄糖C.硝酸铵D.碳酸氢钠)。(3)一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌,其中“高压”是为了_____________________。在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶作用的最佳温度范围进行测定。图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图中的曲线②。(4)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是________(A.40~50℃B.50~60℃C.60~70℃D。70~80℃).(5)据图判断下列叙述错误的是________。A.该酶只能在最佳温度范围内测出活性B.曲线②35℃数据点是在80℃时测得的C.曲线①表明80℃是该酶活性最高的温度D.曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降答案(1)稀释分离纯化嗜热菌(2)选择培养基C(3)杀死培养基中的细菌芽孢(4)C(5)A6.(2017·台州模拟)某研究小组欲用苹果汁为原料,利用发酵瓶制作果酒和果醋,请分析回答:(1)将苹果汁放入发酵瓶时,要预留约________的空间。为得到酒精和糖含量较高的果酒,可在果汁中加入一定比例的________。若发酵瓶内持续无气泡产生,则需加入更多的________,使发酵作用尽快发生。(2)变酸的果酒表面有一层醋化醋杆菌形成的菌膜,若要在该菌膜中筛选出高表达量的醋化醋杆菌菌株,可通过获得____________的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目,则常采用____________法。对获得的优质醋化醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基________上低温保存。(3)如图是果酒和果醋的发酵装置,关于果醋发酵叙述错误的是________.A.发酵前,瓶内酒-水混合物的pH需调至7.0B.发酵过程中,充气口要适时适量充气C.发酵过程中,排气口排出醋酸发酵产生的CO2D.发酵完成后,出料口的pH值不再减少答案(1)1/3蔗糖酵母菌(2)单菌落涂布分离斜面(3)C解析(1)将葡萄汁装入发酵瓶时,要留大约1/3的空间,并封闭充气口.为得到酒精和糖含量较高的果酒,可在果汁中加入一定比例的蔗糖。若发酵瓶内持续无气泡产生,则需加入更多的酵母菌,使发酵作用尽快发生。(2)变酸的果酒表面有一层醋化醋杆菌形成的菌膜,若要在该菌膜中筛选高表达量的醋化醋杆菌菌株,可通过获得单菌落的方法来分离筛选。接种微生物常用划线分离法和涂布分离法,其中涂布分离法可以统计获得菌种的数目。对获得的优质醋化醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基斜面上低温保存.(3)将酒-水混合物pH调至7。0有利于醋化醋杆菌生长与繁殖,缩短发酵时间,因此发酵前,瓶内酒-水混合物的pH需调至7.0,A正确;醋化醋杆菌是嗜氧菌,因此发酵过程中,充气口要适时适量充气,B正确;醋化醋杆菌发酵不会产生二氧化碳,发酵过程中,排气口排出含氧量较少的空气,C错误;发酵完成后,不会有醋酸再产生,因此出料口的pH值不再减少,D正确.7.葡萄收获的季节性较强,并且不易运输,易造成积压,腐烂变质。为了解决上述问题且满足不同人群的需求,可以将其加工制作成果汁、果酒、果醋等。图1是简单的生产流程图,结合所学知识回答下列问题:图1(1)果胶酶的使用过程①中,需要对酶的活性、酶的用量进行研究.在图2甲、乙两个曲线中,果胶酶活性受环境因素影响的变化曲线是________;乙曲线中纵轴还可以用_____________来表示。自变量X可以代表____________;自变量Y可以代表____________.图2(2)果胶酶的最适用量是图2中的____点对应的量。(3)③→⑤过程中不用灭菌一般也不会受到杂菌的污染,原因是____________________________________________________________________________________________。(4)果酒和果醋的制作过程相比,从发酵条件来看,二者不同之处是____.A.都需要氧气B.都不需要氧气C.前者需要氧气,后者不需要氧气D.前者不需要氧气,后者需要氧气答案(1)甲过滤得到的果汁体积温度、pH等果胶酶的浓度(或用量)(2)B(3)培养液中缺氧环境及酵母菌产生的乙醇能抑制绝大多数细菌的生长繁殖(4)D解析(1)果胶酶的活性受温度、pH等条件的影响,每一种酶的最适pH和最适温度是一定的。衡量实验结果的指标有两种,一个是果汁的量,另一个是果汁的澄清度.(2)果胶酶的最适用量是过滤得到果汁澄清度最高时对应的最小酶量,B点后酶量增加而澄清度不再增加,因此B点对应的量为最适用量。(3)缺氧条件不利于大多数细菌的生存,同时乙醇有杀菌作用。(4)酒精发酵为厌氧发酵,醋酸发酵为需氧发酵。8.请回答下列有关微生物培养、发
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