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文档简介
专题2微生物的培养与应用1.微生物的实验室培养2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数3.分解纤维素的微生物的分离考点1、培养基的种类2、无菌技术的内容及方法3、分离纯化微生物的研究思路、方法一、培养基结果常用的方法消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)灭菌杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子二、消毒和灭菌煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌培养基培养皿空气接种环双手牛奶②巴氏消毒③化学消毒⑤紫外线消毒⑥高压蒸气灭菌①灼烧灭菌④干热灭菌常用的消毒方法和灭菌方法三、微生物实验室培养1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板2、微生物接种最常用的方法中的是:
平板划线法和稀释涂布平板法1、根据培养基的用途可分为:四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数培养基中加入某种化学物质,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长。选择培养基Q3:培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入_____________以纤维素作为唯一碳源的选择培养基,可以分离分解纤维素的微生物。Q1:分离利用石蜡油的微生物,用____________________的培养基Q2:分离产生蛋白酶的微生物,用___________________的培养基Q4:分离固氮微生物用______的培养基。例以石蜡油作为唯一碳源以蛋白质作为唯一氮源青霉素缺氮鉴别培养基如:可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽)在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物。2、统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计一定容积的样品中微生物数量。②方法:用计数板计数。③缺点:不能区分死菌与活菌。四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(2)间接计数法(活菌计数法)①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。②为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式:每克样品中的菌株数C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)M代表稀释倍数土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数3、细菌分离与计数的实验流程在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的_____将尿素分解成了____。氨会使培养基的碱性_____,PH______。因此,我们可以通过检测培养基____变化来判断该化学反应是否发生。脲酶氨增强升高PH4、对分离的菌种的鉴定在以_____为唯一氮源的培养基中加入______指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变___,说明该细菌能够_________。尿素酚红红分解尿素4、对分离的菌种的鉴定1、纤冷维素坦酶五、魂分解协纤维损素的属微生坦物的纸分离纤维营素酶慕是一碗种复合犯酶,至帽少包商括三蓝种组挤分,那即C1酶、CX酶和鹅葡萄驼糖苷笨酶。纤维项素纤维静二糖葡萄碑糖C1酶Cx酶葡萄稠糖苷曾酶(1关)筛选谁纤维爹素分少解菌鹊的方戴法是__类__首__毒__屡__该方践法可深以通倦过__烫__夕__反应娃直接康筛选横。刚果葡红染筛色法颜色2、纤收维素煌分解不菌的中筛选愉原理(2准)其原抚理是案:刚懒果红搞可以般与纤颈维素杀形成__锤__戴__护__脾_,当后纤维迈素被__辟__造__资__分解帽后,霞红色符复合繁物无慌法形徐成,帅出现锦以__舒__蠢__旧__牺__米_为中居心的__撞__乌__,我龟们可岸以通蛋过__棚__找__煌__尽__柱__膊_来筛胳选纤佣维素钻分解折菌。红色芒复合鹿物纤维丙素酶纤维诵素分哥解菌透明螺圈是否利产生众透明态圈土壤标取样选择屿培养梯度关稀释将样幕品涂晓布到选鉴别迷纤维蝇素分福解菌津的培皱养基练上挑选阴产生花透明帽圈的碑菌落3、分延离分膛解纤鸟维素委的微慈生物丘的实仁验流瓶程土壤良取样选择趋培养涂布俱培养纯化害培养前置厦染色亲法后置嫩染色姥法富含村纤维用素土顷壤增大芹分解踪蝶菌含劣量染色因鉴别分离滑出分贼解菌分离倾纤维驰素分乘解菌霞的实固验过脖程中脖操作做有误腹的是()A.经揭选择份培养势后将溜样品仇涂布姨到鉴恨别纤治维素敬分解坝菌的椅培养因基上B.富值集培底养这欣一步融可省等略;掘但培配养纤络维素摊分解默菌少C.经笋稀释晕培养甩后,东用刚乱果红果染色D.对膏照组匪可用吵同样筛量的四培养勺液涂备布到宜不含用纤维以素的巧培养奖基上A【解析】经选铁择培湿养后奋,再淹经稀跑释,银才能兴将样眨品涂联布到舟鉴别首纤维奔素分识解菌赚的培旨养基占上;赶富集沃培养孕可省些略;路经稀巨释培经养后币,用枣刚果烟红染驳色,普设置婚对照公能证梢明经争富集种培养吉的确钓得到航了欲替分离别的微鞠生物颈。【资料易三】刚果功红染亩色法方法早一:先培是养微轻生物躁,再揪加入巷刚果印红进光行颜欠色反巨应方法搭二:在倒罩平板晃时就序加入颗刚果亡红生物挤柴油油料愈作物植物粉油甲醇微生娇物M提取脂肪寒酶(20巩10仅·山东黑)生爬物柴摩油是浸一种肢可再拳生清播洁能静源,双其应豪用在雾一定砌程度妻上能袭够缓博人类承对化菜石燃粪料的涂消耗罚。科费学家侮发现西,在夏微生唇物M产生敬的脂今肪酶访作用腹下,练植物顷油与界甲醇叛反应创能够烟合成浑生物圣柴油架。高考陷体验(1)用音于生樱产生馆物些私油的歉植物牲油不爪易挥驼发,趣宜选李用__躺__声__竞_、__叉__挺__堪_方法督从油筛料作买物中计提取游。(2)筛提选产什脂肪分酶的御微生采物M时,树选择建培养绑基中愿添加庆的植洪物油舱为微简生物陕生长切提供__析__破__尝_,培咱养基共灭菌阅采用骗的最产适方员法是__矿__和__扭__拆__辰__法。压榨萃取碳源高压催蒸汽旧灭菌(3)测己定培傍养液寸中微荒生物区数量柿,可辈选用__乐__耳__淘__庄__打__头_法直纹接计妖数;买从微祥生物M分离浆提取岔的脂部肪酶熔通常轮需要看检测__牵__咳__更__竟__,以脱确定阳其应棕用价铲值;掩为降烈低生艺产成侄本,踏可利铲用__幻玉__厘__回__超_技术散使脂滋肪酶年能够求重复胞使用博。(4)若玻需克绝隆脂登肪酶怜基因玻,可持应用具耐热DN郊A聚合床酶催胸化的__煮__青__判__招_技术创。显微猜镜直价接计船数酶活甲性固定恳化酶PC令R2、某摔小组亏同学罗为了效调查彻湖水爆中细免菌的么污染捧情况必而进向行了命实验凝。实槽验包顾括制嚷备培丽养基钟、灭质菌、货接种暴及培慰养、锡菌落扶观察汪计数蔬。请棍回答碑与此歌实验嘴相关率的问酱题。(1)培向养基懂中含客有的屿蛋白医胨、红淀粉输分别辟为细电菌培鹿养提尸供了__镰__俊__熄_和__泡__吓__饰_。除故此之负外,尼培养剑基还捷必须庆含有鞭的基路本成沫分是__茶__解__轧__和__颜__储__。(2)为床了使诸该实途验所蕉得结寇果可仰靠,败还应矮该同彼时在食另一超平板鼓上接龄种__窗__宿__愁__作为玻对照灯进行句实验帽。氮源碳源水无机盛盐无菌蜻水(3)培盟养20小时杆后,惰观察简到平途板上研有形拒态和犁颜色匹不同遣的菌较落,漠这说肤明湖慌水样旅品中妹有__蚁__导__纽奉__种细乞菌。短一般糕说来要,菌港落总婆数越倘多,延湖水站遭受闯细菌裂污染君的程掉度越__超__琴__半__。(4)如笨果要驱检测流水中括是否天含有测大肠获杆菌敢,培诞养基扁中还作应加枯入__被__幻玉__负_。多大(或严这重)伊红—美蓝(2汗01油0年青阅岛市评模拟)啤酒鼻是我俯们日他常生庙活中悉最常肃见的妙饮料骡之一谁。生狭产过边程大样致如腔下:荣将经狗过灭晶菌的抱麦芽翅汁充敌氧,含接入晋啤酒澡酵母朋菌菌绒种后厉输入枪发酵良罐。旨初期归,酵谦母菌疲迅速抱繁殖棋,糖扒度下面降,粒酒精迟浓度把渐渐踏上升蛇,泡吴沫不爽断增航多;愈当糖归度下脱降到农一定脂程度灰后,咐结束逗发酵租;最助后分夸别输婶出有趟形物求质和洞啤酒垃。根周据上朴述过有程,碑回答舒以下雾问题裂:(1粗)具有拌耐高幼糖和尸耐酸推特性还的酵刘母菌耽是理堤想的凝酒精企发酵厕菌种有,对快野生蔑酵母叉菌进论行诱善变后升通过你筛选蒜可以绝得到洒具有政这些客特性究的突晶变菌暑,诱糊变及透筛选不过程祝如下例:步骤1:野余生菌艰液体悔培养楚一段传时间颗后接骡受紫前外线织照射融诱变暖处理暮。步骤2:制香备选嫂择培公养基来。在询基本叉培养贤基的处基础黎上,登注意崖添加__肠__臣__旁__爸__您__借__买__和调掉低pH,加监琼脂筐后灭绸菌,由制成潜固体拣平板战。高浓匹度蔗蜓糖(葡萄浸糖)步骤3:将镇紫外罗线照购射后箱的菌爷液稀胀释涂里布平续板。步骤4:根拣据__刑__幼__披__谱__咽__被__益__卵__塔__彻_筛选银出突融变菌锹。(2陷)上述蹈步骤2、3的目锈的分严别是__箱__类__娱__霜__桨__守__报__旗__筑__、__篇__奥__粒__羊__育__最__申__填__他_。(3轰)酿酒为过程棒中,孟经检浮测活彩菌数楼量适帖宜但陷却不略产生巧酒精切,应陪采取灿的措差施是__观__谨__桐__寸__。是否忠能在征选择居培养化基上辞生长提供续高糖夫和酸阻性筛辉选环羊境获得学单菌侵落隔绝晨空气(4匹)秸秆接的主吵要成绞分为叮木质急素、皮纤维醉素和善半纤王维素凑,但诉是酵颈母菌诉却无皱法直聪接利偶用,抱原因造是其__却__泰__盆__遮__榆__招__准__叶__杯__钟__脆__没_。缺乏锻相应姻分解断酶系(或缺和乏纤等维素胜酶和擦半纤沾维素砌酶)(2协00知9年宁厚夏)(捷1)在微评生物助培养怜操作钥过程算中,父为防咐止杂霞菌污邀染,冰需对甚培养巧基和录培养雄皿进客行__广__座_(消毒抱、灭禽菌);操匀作者内的双宰手需攀要进视行清毛洗和__降__鼠_;静剪止空同气中赏的细巾菌可苗用紫迈外线现杀灭油,其暮原因样是紫光外线译能使孔蛋白捕质变躁性,浇还能__届__菊__银__折
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