TNAIA 0210-2023 水稻中噁唑酰草胺及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱质谱法

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TB团 体 标 准T/NAIA0210-2023水稻中噁唑酰草胺及其代谢物残留量测定 液相色谱-质谱/质谱法DeterminationofmetamifopanditsmetabolitesresiduesinriceLiquidchromatography-massspectrometry2023-04-28发布 2023-05-01实施宁夏化学分析测试协会 发布前言本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。区农业服务中心、宁夏食品检测研究院、宁夏化学分析测试协会。翔、开建荣、王彩艳、陈嘉龙、马小龙、季莉、魏新举、张学玲、张小飞。本文件为首次发布。水稻中噁唑酰草胺及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法范围本文件规定了水稻中噁唑酰草胺及其代谢物残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本文件适用于水稻中噁唑酰草胺及其代谢物的测定。规范性引用文件（有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法术语和定义噁唑酰草胺及其代谢物metamifopanditsmetabolites噁唑酰草胺是一种芳氧苯氧丙酸酯类除草剂，有三种代谢产物，分别为N-(2基)-2-(4-羟基苯氧基)-N-甲基丙胺（HPFMPA）、N-(2-)-2--N-（HFMPA）和4-(6-氯并恶唑-2-丙氧基)苯酚（6-CBO）。原理试样用乙腈提取，用十八烷基键合硅胶N-丙基乙二胺净化，用液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量。试剂与材料除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水符合GB/T6682中规定的一级水。乙腈（CH3CN，CAS号：75-05-8）：色谱纯。5.2 氯化钠（NaCl，CAS号：7647-14-5）。N-丙基-乙二胺吸附剂（PSA）：40µm～60µm。十八烷基键合硅胶（C18）：40µm～60µm。农药标准品：噁唑酰草胺（CAS256412-89-295.0%）、HPFMPA（CAS号256412-88-1，纯度99.9%）、HFMPA（CAS号1257227-64-7，纯度99.7%）、6-CBO（CAS号19932-84-4，纯度98.5%）。标准溶液配制10mg（0.011000mg/L℃下保存。噁唑酰草胺及其代谢物混合标准溶液：根据需要分别取适量噁唑酰草胺及其代谢物的10mg/L标准中间溶液，-18℃下保存。仪器与设备高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。6.2 0.01g0.0001g。组织捣碎机。高速万能粉碎机：10000r/min。振荡器。离心机：4000r/min。涡旋混合器。离心管：50mL，塑料。滤膜：0.22μm，有机相。分析步骤试样的制备（再脱粒）200g和足够量稻壳，分别装入样品瓶中，贴好标签后立即放入-18℃冰箱中冷冻备用。秸秆样品（即植株样品）1cm以下的小段，用高速万能粉碎机（可加少量的液氮（30g30200g样品装入样品瓶中，贴好标签后立即放入-18℃冰箱中冷冻备用。样品提取与净化糙米和稻壳称取试样5.00g（精确至0.01g）于50.0mL离心管，加水10.0mL复溶30min，加入20.0mL405.0g1离心机，4000r/min5min1.00mL15.0mL离心管中（100mgPSA50mgC18）0.22μm滤膜，用液相色谱-质谱/质谱测定。秸秆2.00g（0.01g）50.0mL10.0mL30min，加入20.0mL405.0g1离心机，4000r/min5min2.00mL15mL离心管中（100mgPSA和50mgC18）涡旋净化后过0.22μm滤膜，用液相色谱-质谱/质谱测定。测定液相色谱参考条件色谱柱：C18柱，150mm×2.1mm（i.d），3.5μm，或性能相当者。柱温：45℃。c）流速：0.4mL/mind）流动相：A相为水，B相为乙腈，梯度洗脱条件见表1。e）进样量：2.0μL。表1 流动相及其梯度条件（VA+VB）时间(min)流速(mL/min)VA(%)VB(%)0.000.470300.500.470302.000.410904.000.410904.100.470307.000.47030质谱参考条件a）离子源类型：电喷雾离子源；b）扫描方式：选择离子监测模式；c）电喷雾电压：3.5kV；d）毛细管传输温度：300e）碰撞压力：1.5mTorr；f）鞘气：30arb；g）辅气：10arb。表2噁唑酰草胺及其代谢物的多反应离子监测分析参数名称保留时间/min定性离子对/（m/z）定量离子对/（m/z）滞留时间/s碰撞能量/eV噁唑酰草胺Metamifop3.70441.2/180.0441.0/288.0441.2/180.00.10.12524HPFMPA2.46290.0/109.0290.0/137.0290.0/109.00.10.13314HFMPA1.48198.0/126.3198.0/180.1198.0/126.30.10.112116-CBO2.36168.0/76.3168.0/132.0168.0/76.30.10.12821色谱测定与确证HPFMPA、HFMPA、6-CBO3.70、2.46、1.48、2.36min，选择离子监A3规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表3定性确证相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度>50%>20%~50%>10%~20%≤10%允许的相对偏差±20%±25%±30%±50%空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。结果计算和表达试样中各农药残留量以质量分数计，按公式（1）计算试样中各农药的含量。1000

……（1）m 1000式中：——试样中被测物残留量的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；——试样溶液中被测物的含量，单位为毫克每升（mg/L）；V——试样中加入的提取溶液体积，单位为毫升（mL）；m——试样质量的数值，单位为克（g）。22字，1mg/kg3位有效数字。精密度在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录B的要求。定量限本方法的定量限噁唑酰草胺、HPFMPA、HFMPA、6-CBO均为0.01mg/kg。附录A（资料性）LC-MS/MS的选择离子监测（SRM）色谱图LC-MS/MS的选择离子监测（SRM）色谱图见图A.1。