2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸历年考点真题演练含答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸历年考点真题演练含答案（图片大小可自由调整）卷I一.综合考核题库(共85题)1.利用反义RNA、核酶等反义技术及RNA干扰技术等能特异地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因的表达，以达到治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因修正B、基因增补C、基因激活D、基因失活2.pSC101质粒是第一个成功克隆真核DNA的载体，属于松弛控制型的质粒。3.植物基因转化受体系统应具备的条件？4.AIDS是由哪种病毒引起的全身性传染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV5.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeIII的来源不同，但识别的序列都是GGCC，因此他们属于_________。6.第一个被分离的Ⅱ类限制性核酸内切酶是：A、EcoKB、HindⅢC、HindⅡD、EcoB7.限制性内切核酸酶可以特异性地识别：A、双链DNA的特定碱基对B、双链DNA的特定碱基序列C、特定的三联密码D、以上都正确8.双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()A、DNA的连接反应B、DNA的降解反应C、聚合单体2‘和5’位的脱氧D、DNA的聚合反应9.连接酶通常使用的连接反应温度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃10.如何提高克隆基因的表达水平？11.末端脱氧核苷酸转移酶在基因工程的操作中主要是防止载体自连。12.Nick和Gap的含义是不同的，前者指DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开了一个磷酸二酯键。13.试述免疫共沉淀技术的原理？14.Ptrp表示（）A、噬菌体启动子B、色氨酸启动子C、乳糖和色氨酸复合启动子D、乳糖启动子15.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori16.欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E．coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题？17.甲醇酵母表达系统具有的抗药性基因是A、氨苄青霉素和卡那霉素B、四环素和氨苄青霉素C、氨苄青霉素和庆大霉素D、四环素和庆大霉素18.受体细胞的_________是接受外源DNA的生理状态_。19.________技术是基于互补的DNA单链分子能够形成稳定双螺旋结构的天然特性而发展起来的。20.下面关于多克隆位点MultipleCloneSite（MCS)的描述错误的一项是A、仅位于质粒载体中B、具有多种酶的识别序列C、不同酶的识别序列可以有重叠D、一般是人工合成后添加到载体中21.能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。22.核酸序列测定技术的发展经历了哪几个重要阶段？23.大肠杆菌DNA聚合酶有几种酶活性A、5种B、2种C、3种D、4种24.在转基因植物中经常会用到农杆菌，请问农杆菌是什么微生物？25.基因治疗有两种途径，一是_____________，二是体内法。26.转基因技术导致的生物安全威胁属于生态环境破坏。27.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是A、E.coli表达体系B、酵母表达体系C、昆虫表达体系D、哺乳类细胞表达体系28.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种29.启动子30.利用噬菌体或动物病毒作为载体转化细胞的过程称为转移。31.基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA文库中则不含_________。32.克隆即无性繁殖的意思，通过克隆可以在无性的条件下获得遗传结构和表型完全相同的一群个体。33.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？34.用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。35.关于cDNA的最正确的说法是A、同mRNA互补的单链DNAB、同mRNA互补的双链DNAC、以mRNA为模板合成的双链DNAD、以上都正确

36.原核启动子是由两端紧密连接且又高度保守的核苷酸序列组成。37.限制性核酸内切酶在基因工程中有何作用？38.既能在E．coli又能在S．cerevisiae中自我复制的载体DNA称为_________。39.何谓溶原性方式？40.用下列方法进行重组体的筛选可以说明外源基因进行了表达。A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、Western印迹D、原位菌落杂交41.大肠杆菌DNA聚合酶I是应用最广也是研究最深入的DNA聚合酶。42.基因重组的载体必须具备下列哪些特点：A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制B、插入外源DNA后也不影响自身的复制C、易于进入受体细胞D、通过自身的酶系在受体细胞中复制E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定43.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白44.Sanger双脱氧末端终止法胶板上的链就是模板链。45.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？46.何谓YAC？主要特性是什么？47.pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于_______。48.用限制性内切核酸酶HaeIII分别切割载体DNA和供体DNA后，可用E.coliDNA连接酶进行连接。49.免疫共沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用50.试述影响连接反应的因素？51.__________________是指那些既能在真核细胞中繁殖又能在原核细胞中繁殖的载体。52.关于限制性内切核酸酶的来源及其天然存在的意义，下列哪种说法是正确的?A、来自噬菌体，具有抗微生物作用B、来自酵母菌，参与DNA复制C、来自细菌，有防御病毒侵染的意义D、来自噬菌体，用于复制病毒DNA53.T4DNA聚合酶具有几种酶活性A、2种B、3种C、4种D、1种54.EcoRI切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要A、用CIP处理载体DNA防止自身环化B、进行琼脂糖凝胶电泳检测C、上述说法都正确D、用65℃处理5～10min使限制性内切核酸酶失活55.为了保证引物有较高的退火温度，要求引物的G+C含量尽量控制在40%-60%之间。56.cDNA合成第一链时所用的引物是A、PolyCB、PolyTC、发夹结构D、PolyA57.逆转录合成第一条链时一般采用下列哪一种酶A、鼠源反转录酶B、鸡源反转录酶C、兔源反转录酶D、禽源反转录酶58.通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。59.下列哪种病不可以进行遗传病的基因治疗A、血友病BB、艾滋病C、囊性纤维化D、心血管疾病60.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Trp又称为A、乳糖启动子B、乳糖和色氨酸的杂合启动子C、噬菌体的左向启动子D、色氨酸启动子61.Southernblot检测的是RNA分子。62.将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个cDNA克隆，源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个______。63.PCR引物常见的长度范围是30bp-45bp。64.核酸分子杂交的探针只能是标记的小片段DNA分子65.所有限制性核酸内切酶的最适反应温度为37℃。66.扩增外源基因时需要DNA载体中的（）性质A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我复制能力D、自我转录能力67.何谓cDNA文库？68.作为载体需要具备哪些功能？69.何谓转基因动物？70.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力71.基因工程的两个基本特点是分子水平上的操作和_________。72.具平末端的DNA片段的连接方法主要有？73.Cohen等在_________年构建了第一个有功能的重组DNA分子。74.YAC载体基本组成元件有_________，着丝粒，端粒，MCS，筛选标记。75.S1核酸酶的功能是A、切割双链的DNAB、切割单链的RNAC、切割发夹环D、以上有两项是正确的E、以上有三项是正确的76._________决定PCR扩增产物的特异性与长度。77.目前应用最广泛的原核表达系统是A、酵母菌表达系统B、枯草杆菌表达系统C、大肠杆菌表达系统D、葡萄球菌表达系统78.由于DNA是由四种碱基组成的，所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是_________。79.下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述不正确的是A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B、可以在氯霉素作用下进行扩增C、通常具有较少的拷贝数D、同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

80.pUC质粒包括哪些组成部分A、复制起点B、氨苄青霉素抗性基因C、lacZ的启动子D、多克隆位点E、潮霉素抗性基因81.采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连A、发酵工程B、转基因动物C、转基因植物D、基因治疗82.Westernblot又称为RNA印迹法。83.Cre-loxP系统两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同，Cre重组酶敲除loxP间的序列84.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。85.根据Northern印迹的结果可以说明：_________。卷I参考答案一.综合考核题库1.正确答案:D2.正确答案:错误3.正确答案:（1）高效稳定的再生能力；（2）较高的遗传稳定性；（3）具有稳定的外植体来源；（4）对选择性抗菌素敏感；（5）对农杆菌侵染有敏感性。4.正确答案:C5.正确答案:同裂酶6.正确答案:C7.正确答案:B8.正确答案:D9.正确答案:C10.正确答案:（1）表达载体的优化设计；（2）提高目标基因mRNA和目标基因产物的稳定性；（3）密码子偏爱性；（4）表达环境条件的优化。11.正确答案:错误12.正确答案:错误13.正确答案:以抗体和抗原之间的相互作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。14.正确答案:B15.正确答案:D16.正确答案:应注意的问题有：启动子、密码子、剪接、分泌。17.正确答案:A18.正确答案:感受态19.正确答案:核酸杂交20.正确答案:A21.正确答案:正确22.正确答案:经典的手工测序；第一代测序技术；第二代测序技术；第三代测序技术。23.正确答案:C24.正确答案:存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，能在自然条件下感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。25.正确答案:体外法26.正确答案:错误27.正确答案:D28.正确答案:B29.正确答案:是一段提供RNA聚合酶是被和结合的DNA序列，位于基因的上游，长度因生物种类而异。30.正确答案:正确31.正确答案:内含子32.正确答案:错误33.正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。34.正确答案:原因是：HindⅢ的切点在A基因内。35.正确答案:C36.正确答案:错误37.正确答案:扮演了如裁缝的“剪刀”的角色，它使研究人员可以按照预期目标将核酸分子切割开来，获取所需要的核酸序列片段。38.正确答案:穿梭载体39.正确答案:进入细菌的λDNA可整合入细菌的染色质DNA中，随细菌染色体DNA复制，传给细菌后代。40.正确答案:B41.正确答案:正确42.正确答案:A,B,C,E43.正确答案:B44.正确答案:错误45.正确答案:回文序列是：5'-CATATG-3'。46.正确答案:(1)含有来自其他生物DNA的酵母人工染色体，叫YAC；(2)主要特性是可以克隆较大的外源片段。47.正确答案:pMBl48.正确答案:错误49.正确答案:B50.正确答案:DNA末端的形式；DNA分子浓度的影响；连接反应温度与时间的影响；连接缓冲液的影响；酶浓度的影响；ATP浓度的影响。51.正确答案:穿梭载体52.正确答案:C53.正确答案:A54.正确答案:A55.正确答案:正确56.正确答案:B57.正确答案:A58.正确答案:正确59.正确答案:B60.正确答案:D61.正确答案:错误62.正确答案:cDNA文库63.正确答案:错误64.正确答案:错误65.正确答案:错误66.正确答案:C67.正确答案:指某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。68.正确答案:为外源基因提供在受体细胞中的复制和整合能力；为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力，外源基因的扩增依赖于载体分子在受体细胞中高拷贝自主复制的能力。69.正确答案:指利用基因工程技术，将人们想要研究的基因在动物体实现表达。70.正确答案:D71.正确答案:细胞水平上的表达72.正确答案:直接连接法；同聚物加尾法；衔接物连接法。73.正确答案:197374.正确答案:复制起点75.正确答案:B,C,D76.正确答案:引物77.正确答案:C78.正确答案:4n79.正确答案:C80.正确答案:A,B,C,D81.正确答案:A82.正确答案:错误83.正确答案:正确84.正确答案:错误85.正确答案:外源基因是否进行了转录卷II一.综合考核题库(共85题)1.一般来说，完全切割质粒或病毒DNA，要比切割线状DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。2.影响连接反应的因素有A、DNA末端的形式B、DNA分子浓度的影响C、连接反应温度与时间的影响D、连接缓冲液的影响E、酶浓度的影响3.逆转录PCR主要有两个应用，一是从mRNA出发获取目的基因，二是_____________。4.在用单一限制酶切载体和目的基因并进行连接时，为防止载体自身环化，常用____________处理载体。5._________是指转录因子用于识别靶DNA的蛋白结构域。6.基因治疗是把健康的外源基因导入A、有基因缺陷的染色体中B、有基因缺陷的细胞器中C、有基因缺陷的DNA分子中D、有基因缺陷的细胞中7.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个8.基因工程中使用的II类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。9.用蓝白斑筛选重组子时，IPTG的作用是：A、作为显色反应的指示剂B、作为酶的作用底物C、诱导载体上的抗性基因表达D、诱导载体上的LacZ基因表达10.转录水平的鉴定是指_________。11.X-gal显色反应的基本原理是使载体上与受体互补的α肽失活。12.根据Northern印迹的结果可以说明_________。13.质粒载体能够克隆多大的DNA片段A、20kbB、30kbC、40kbD、10Kb14.构建重组子时中不需要A、基因载体B、DNA连接酶C、核酶D、限制酶15.限制酶主要是从_________中分离纯化出来的。16.限制性核酸内切酶一般在多少度下保存A、10℃B、-20℃C、20℃D、0℃17.从EscherichiacoliK中分离的限制性内切核酸酶命名为E.coK。18.Cre-loxP系统四个loxP位点分别位于两条DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位19.扩增与已知DNA区段相连接的未知染色体DNA序列的PCR技术是A、常规PCRB、逆转录PCRC、反向PCRD、多重PCR20.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大A、黏粒B、酵母人工染色体(YAC)C、λ噬菌体D、质粒21.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫基因库。22.外源DNA离开染色体是不能复制的，将外源DNA与____________连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。23.动脉硬化属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、恶性肿瘤C、血友病D、艾滋病24.构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达?A、融合表达B、分泌表达C、独立表达D、包涵体表达25.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，克隆载体的选择与改造，____________的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出转化子。26.目的基因进入受体细胞内维持稳定和表达的过程称为_________。27.将抗体、抗原或细胞因子的基因导入病人体内，改变病人免疫状态，从而达到预防和治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因增补B、基因激活C、基因失活D、免疫调节28.能特异地降解单链DNA或RNA而对双链不敏感的工具酶是A、碱性磷酸酶B、末端脱氧核苷酸转移酶C、S1核酸酶D、逆转录酶29.关于多克隆位点，下列叙述正确的是A、是外源基因的插入部位B、由许多酶切位点组成C、是宿主细胞上的一段特殊序列D、是人工合成的一段DNA序列E、含有药物抗性基因30.含有多种限制性内切核酸酶识别序列的DNA片段称为_________。31.大肠杆菌是研究真核生物DNA复制、重组、基因表达及调控等过程的理想材料。32.连接反应中，为了维持还原环境，稳定酶活性，需在连接缓冲液中添加A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP33.染色质免疫沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用34.首例细胞基因治疗方案是对哪一种病的基因治疗A、血友病BB、艾滋病C、囊性纤维化D、重症联合免疫缺陷35.下列哪一种测序方法不需要跑胶A、化学降解法B、自动测序法C、胶磷酸测序法D、双脱氧末端终止法36.最早建立成功的转基因哺乳动物是A、转基因猴B、转基因小鼠C、转基因绵羊D、转基因猪37.质粒生物学特性不包括A、自我复制B、转移性C、相容性D、高拷贝数38.核酸分子杂交时，用于标记的探针可以是A、DNAB、RNAC、抗原D、抗体E、DNA连接酶39.作为PUC系列载体抗性筛选标记的是A、卡那霉素B、四环素C、氨苄青霉素D、氯霉素40.RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开，然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜)上，同一放射DNA探针杂交的技术称________。41.何谓基因工程？42.DNA重组连接的方法大致分为四种：①________；②平末端连接；③同聚物加尾连接;④接头/连接子连接。43.______________是应用最广也是研究最深入的DNA聚合酶。44.II类限制酶反应中必须添加的阳离子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+45.常规PCR反应程序中，高温变性一般设置多高的温度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃46.Northern印迹杂交可用于检测：A、目的基因在转录水平上的变化B、目的基因在翻译水平上的变化C、染色体是否异常D、目的基因在复制水平上的变化47.现在科研人员又开发了红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、_________等新型的荧光蛋白。48.下列属于基因工程步骤的是（）A、提取目的基因B、目的基因与运载体结合C、目的基因导入受体细胞D、目的基因的表达49.下面有关限制酶的叙述正确的是（）A、限制酶是外切酶而不是内切酶B、限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C、同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D、一些限制酶在识别位点内稍有不同的位置切割双链DNA，产生黏末端E、一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端50.印迹是如何形成的？51.Muller的PCR反应同大肠杆菌体内的DNA复制有哪些不同？你认为根本的差别在哪里？52.用化学降解法进行DNA测序时，必须具有几个反应系统A、2个B、3个C、4个D、1个53.M13噬菌体属于A、双链噬菌体B、单链噬菌体C、质粒D、亚病毒54.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测序时，必须具有几个反应系统A、5个B、2个C、3个D、4个55.从E.coli中分离的连接酶A、需要NAD作辅助因子B、可以进行平末端和黏性末端连接C、作用时不需要模板D、需要ATP

作辅助因子56.通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。57.何谓修饰作用？58.对pBR322描述正确的是()A、经人工改造的酵母质粒B、天然的大肠杆菌质粒C、经人工改造的大肠杆菌质粒D、天然的酵母质粒59.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。60.应用药物敏感基因转染肿瘤细胞，以提高肿瘤患者细胞对药物的敏感性。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因激活B、基因失活C、免疫调节D、药物敏感疗法61.PCR反应中的G+C含量要尽量控制在A、40%-60%之间B、10%-20%之间C、30%-40%之间D、50%-60%之间62.基因组文库一般保存在多少温度下A、4℃B、-10℃C、-60℃D、-80℃63.以病毒为载体产生转基因的动物是_________。64.PCR循环时按什么方式扩增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+165.生命科学发展的历史场合中，经历了从描述生物学、_________到创造生物学三个发展阶段。66.黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。67.基因工程药品的试验分为几个时期A、2个B、3个C、4个D、1个68.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_________。69.连接反应中，哪一种组分的作用是激活连接酶反应A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT70.分离总DNA比分离总RNA困难的原因是无处不在的耐高温的DNA酶的存在。71.原生质体就是去处了细胞壁的细胞。72.基因工程最知名的也是饱受争议的应用之一是_____________。73.cDNA文库的特点是什么？74.DNA片段之间的连接方式有哪些？75.常用载体质粒的本质是_________。76.克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的_________的使用。77.在连续流加新鲜培养基的同时连续放出发酵液，这种培养方式是A、补料分批培养B、连续培养C、透析培养D、分批培养78.常用的_________使抗生素失活，解除抗生素对转化细胞在转录和翻译过程中的抑制作用，使转化细胞得以继续生长。79.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的理论上的三大发现对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发现是下列哪些A、发现了生物的遗传物质是DNA而不是蛋白质B、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制C、遗传密码子的破译D、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆E、逆转录酶的使用80.可识别并切割特异DNA序列的称A、限制性核酸外切酶B、限制性核酸内切酶C、非限制性核酸外切酶D、非限制性核酸内切酶81.植物基因工程的常用方法有哪些？82.Cre-loxP系统两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导loxP间的序列互换。83.一般质粒DNA的构型有哪几种？在琼脂糖凝胶电泳中有何特点？84.通过蛋白质工程改建目的基因，不属于定点突变技术的是A、寡聚核苷酸介导的定点突变B、PCR介导的定点突变C、盒式突变D、DNA改组85.DNA经限制性内切酶切割后可产生两种末端：___________和平头末端。卷II参考答案一.综合考核题库1.正确答案:正确2.正确答案:A,B,C,D,E3.正确答案:研究基因的表达情况4.正确答案:碱性磷酸酶5.正确答案:锌指结构域6.正确答案:D7.正确答案:A8.正确答案:错误9.正确答案:D10.正确答案:mRNA检测11.正确答案:正确12.正确答案:外源基因是否进行了转录13.正确答案:D14.正确答案:A15.正确答案:原核生物16.正确答案:B17.正确答案:错误18.正确答案:错误19.正确答案:C20.正确答案:B21.正确答案:错误22.正确答案:克隆载体23.正确答案:A24.正确答案:A25.正确答案:目的基因与克隆载体26.正确答案:转化27.正确答案:D28.正确答案:C29.正确答案:A,B,D30.正确答案:多克隆位点31.正确答案:错误32.正确答案:A33.正确答案:D34.正确答案:D35.正确答案:C36.正确答案:B37.正确答案:C38.正确答案:A,B39.正确答案:D40.正确答案:Northern杂交41.正确答案:一般指利用分子生物学的手段，将不同生物的遗传物质按人们的意志或需要，进行基因的定向改造、突变与重组，从而使生物体的遗传性状发生变异。42.正确答案:黏性末端连接43.正确答案:大肠杆菌DNA聚合酶I44.正确答案:C45.正确答案:A46.正确答案:A47.正确答案:蓝色荧光蛋白48.正确答案:A,B,C,D49.正确答案:B,C,D,E50.正确答案:DNA沿凝胶平面垂直方向移出并转移到膜上，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与凝胶中的相对位置一样。51.正确答案:PCR用双引物，体内复制用单引物。52.正确答案:C53.正确答案:B54.正确答案:D55.正确答案:A56.正确答案:-70℃57.正确答案:指细菌的修饰酶对于DNA碱基结构改变的作用，经修饰酶作用后的DNA可免遭其自身所具有的限制酶的分解。58.正确答案:C59.正确答案:（1）独立复制；（2）有选择标记；（3）有独特的酶切位点；（4）能转化但不扩散。60.正确答案:D61.正确答案:A62.正确答案:D63.正确答案:病毒载体法64.正确答案:B65.正确答案:实验生物学66.正确答案:(1)载体易自身环化；(2)若是用同一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接又不易定向克隆；(3)难插入特定的基因；(4)再者就是大片段DNA的重组率较低，即使用碱性磷酸酶处理了载体，防止了载体的自身环化，载体也有成环的倾向；(5)用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体，增加筛选工作的困难。67.正确答案:B68.正确答案:限制性酶切图谱69.正确答案:B70.正确答案:错误71.正确答案:正确72.正确答案:转基因食品73.正确答案:基因特异性、器官特异性、代谢或发育特异性、不均匀性、各cDNA均可获得表达。74.正确答案:具黏性末端的DNA片段之间的连接、具平末端DNA片段之间的连接、DNA片段末端修饰后进行连接、DNA片段加连杆（linker）后的连接。75.正确答案:DNA分子76.正确答案:酶77.正确答案:B78.正确答案:抗生素抗性基因79.正确答案:A,B,C80.正确答案:B81.正确答案:农杆菌介导法；原生质体法；植物病毒DNA介导法；基因枪法；显微注射法；脂质体介导法；电穿孔法；微激光束法；花粉管导入法。82.正确答案:错误83.正确答案:超螺旋质粒DNA、开环质粒DNA、线状质粒DNA；电泳的泳动速度从大到小分别是：超螺旋质粒DNA>线状质粒DNA>开环质粒DNA。84.正确答案:D85.正确答案:黏性末端卷III一.综合考核题库(共85题)1.将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个基因组DNA克隆,各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_______.2.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？为什么？3.在分离DNA时，要戴手套操作，原因是手上常有________。4.试述分子杂交技术的原理？5.高血压属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、艾滋病C、恶性肿瘤D、血友病6._________是指真核生物基因组中能特异与核基质结合并富含AT的DNA序列。7.以RNA为模板，用反转录酶可同时产生单链和双链的cDNA，双链DNA是由自身引物引导合成，但这种自身引物引导的合成效率远低于外加寡核苷酸引物引导的合成。8.核酸杂交的原理是根据RNA分子间互补。9.λ噬菌体载体根据外源基因整合的方式不同，分为____________和置换型载体两大类。10.BergP的创造性的工作是在体外构建了重组DNA分子，所用的载体是一种具有复制能力的细胞质质粒。11.试述理想质粒载体的构建原理？12._________的编码产物可用简单的生物化学反应或借助特殊的仪器直接观察。13.DNA连接酶根据来源不同，可以分为三类，即_________和T4DNA连接酶及热稳定的DNA连接酶。14.BAC载体的最大容载能力是_______。15.cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。16.基因表达载体中启动子的本质是_________。17.按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类：严紧控制型质粒和_____________。18.下列是构建基因组文库的常用载体，哪一种载体需要用的受体细胞和其余三种不一样A、柯斯质粒B、YACC、BACD、噬菌体19.基因治疗通常采用哪种载体比较合适A、逆转录病毒B、Ti质粒C、噬菌体D、质粒pBR32220.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。21.pBR322质粒克隆载体含有的抗性标记为A、四环素和氨苄青霉素B、氨苄青霉素和庆大霉素C、四环素和庆大霉素D、潮霉素和四环素22.下列哪种酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义A、PwoDNA聚合酶B、Taq聚合酶C、PfuDNA聚合酶D、VentDNA聚合酶23.常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：A、DNA聚合酶B、T4DNA连接酶C、T4RNA连接酶D、RNA聚合酶24.PCR是利用___________的原则，经过高温变性、低温复性、子链延伸的不断循环，选择性的特异扩增目的基因和目的DNA的一种方法。25.限制性内切酶通常保存在_________浓度的甘油溶液中。26.基因工程中常用的DNA聚合酶有A、大肠柑橘聚合酶IB、Klenow大片段酶C、T4噬菌体聚合酶D、T7噬菌体聚合酶E、逆转录酶27.什么是动物乳腺生物反应器？28.关于转化的叙述中错误的是A、处于感受态的细菌易于吸收外源性DNAB、常用的制备感受态的方法是用冰冷的CaCl2溶液处理C、细菌吸收外源性DNA，遗传性状可发生改变D、感受态在细菌生长的任何时期都可出现29.转基因植物技术在农业领域主要有哪些应用？就其中一方面应用进行举例说明。30.生物学上，利用两个不同系进行杂交，培养出比亲本更出色的后代，就是_________。31._________是指利用基因工程原理和技术，将感兴趣的基因在植物中表达并实现稳定遗传。32.质粒具有____________，它是指在自然条件下，很多质粒可以通过称为细菌接合的作用转移到新宿主内。33.在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他的限制酶就不能切割了。34.用于基因治疗的基因不需要满足A、外源基因能在靶细胞中长期稳定存留B、导入基因的方法及载体对宿主细胞安全无害C、基因需要大量表达才能改善症状D、外源基因可有效导入靶细胞35.主要用来提高扩增特异性的特殊PCR是A、反转录PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR36.下面关于细菌人工染色体(BAC)的特征描述，不正确是（）。A、BAC载体在细菌中以环形超螺旋状态存在，使分离操作起来相对容易B、BAC载体在大肠杆菌宿主保持高拷贝C、克隆到BAC载体上的外源片段可以直接进行测序以获得末端序列

D、通过电激法将大质粒转化到大肠杆菌比酵母的转化率提高了10~100

倍37.能防止载体自连的酶是A、T4噬菌体DNA连接酶B、逆转录酶C、碱性磷酸酶D、末端脱氧核苷酸转移酶38.DNA沿凝胶平面垂直方向移出并移除到膜上，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与凝胶中的相对位置一样，因此也称为_____________。39.II型限制性核酸内切酶的识别位点是回文对称结构。40.双酶切或多酶切时，一般先用低盐浓度的酶切，再用高盐浓度的酶切。41.请叙述反转录PCR的含义。42.1986年第一例植物基因工程产品----_________问世。43.克隆羊多利是用的________________法制备的。44.大肠杆菌表达系统是目前使用最为广泛的原核表达系统。45.基因工程所用的克隆载体不需要具备下列哪一个元件A、复制原点B、SD序列C、较高的拷贝数D、选择标记46.下列哪一项不具有吸附DNA的功能A、经特殊处理的滤纸B、尼龙膜C、玻璃膜D、硝酸纤维素膜47._________是指利用基因工程技术，将人们想要研究的基因在动物体实现表达。48.DNA聚合酶I_________的是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子质量为76kDa的大片段。49.除了常规PCR外，还有一些特殊的PCR，常见的有反向PCR、反转录PCR、______________、多重PCR、巢式PCR。50.多利绵羊的诞生是通过胚胎干细胞法制备的。51.荧光定量PCR一般分为______________与探针法。52.如果PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA增加了1倍，那么10个循环就扩增了1000 倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍。53.酿酒酵母表达系统常用启动子有哪些？54.下列哪一项不属于遗传表型检测法A、抗药性标记基因B、LacZ基因蓝白斑筛选C、GFPD、核酸分子杂交55._________是植物细胞出去细胞壁后的部分，是一个质膜包围的裸露细胞。56.在______技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。57.根据结构和功能特性，可将DNA限制性内切酶分为几类A、I型酶B、II型酶C、III型酶D、IV型酶E、V型酶58.常规PCR反应的循环次数一般为多少个周期A、40B、20C、30D、5059.表达载体和基因工程克隆一般载体在元件构成上有何差别？60.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以两个方向插入到EcoRI末端的载体中。61._________质粒是目前使用较为广泛的载体。62.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是A、用RNA探针检测RNA片段B、用DNA探针检测RNA片段C、用DNA探针检测蛋白质片段D、用RNA探针检测DNA片段63.基因克隆中三个基本要点是：克隆基因的类型、受体的选择和_________。64.大肠杆菌DNA聚合酶I是一种多功能酶，具有哪些酶活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性65.原核启动子在转录起始点上游35bp处，有一段长10bp的区域称为A、-10区B、-15区C、-35区D、-45区66.反向PCR是以mRNA为模板进行的一类特殊PCR。67.说明SangerDNA测序法的原理。68.质粒载体的装载容量为10Kb-20Kb。69.下列关于限制酶命名的表示方法，正确的是A、B.amHIB、pstIC、HindIIID、Sau.3AI70.目前已知持续合成能力最强的酶是A、大肠杆菌聚合酶IB、Klenow片段C、T4DNA聚合酶D、T7DNA聚合酶71.基因治疗一般都是通过体内法这一途径进行的。72.控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在①核区大型环状DNA②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上A、①③④B、①②④C、②①④D、②①③73.Bal31核酸酶是Ca2+依赖性的，在反应混合物中加入EDTA便可抑制它的活性。74._________是由磷脂组成的膜状结构，用它包装外源DNA分子，然后与植物原生质体共保温。75.PCR特异性与引物浓度成反比。76.cDNA克隆与基因组克隆有何不同？77.用蓝白斑筛选重组子时，白斑表示外源基因插入到载体中了。78.PCR反应中Taq酶常常没有错配碱基纠错功能，因为它没有A、5’－3’聚合酶活性B、5’－3’外切酶活性C、3’－5’外切酶活性D、3’－5’聚合酶活性79.基因工程中的工具酶有哪些A、限制性核酸内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、碱性磷酸酶E、末端核苷酸转移酶80.下列哪一项不是质粒作载体使用时必须具备的条件A、分子量小B、高拷贝数C、增强子D、MCS81.试述限制性核酸内切酶的命名原则。82.克隆羊多莉是通过哪一个技术制备的A、显微注射法B、逆转录病毒感染法C、胚胎干细胞法D、体细胞核移植法83.何谓转基因植物？84.能通过分泌或运输方式定位于细胞周质甚至穿过外膜进入培养基中的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白85._________的使用，使基因操作技术有了突破性的飞跃，成为2011年的Nature年度技术。卷III参考答案一.综合考核题库1.正确答案:基因组文库2.正确答案:GATATC；AAATTT；因为它们是回文序列。3.正确答案:核酸酶4.正确答案:将标记的核酸探针以碱基互补配对原则与组织细胞中的待测核酸进行特异性