一食品微生物检验的一般步骤

一食品微生物检验的一般步骤一食品微生物检验的一般步骤第1页一.食品微生物检验普通步骤样品采集样品处理样品保留选择参考菌群检验前准备菌落总数大肠菌群致病菌分离培养分离培养增菌纯化染色镜检生化试验血清学试验动物试验结果汇报一食品微生物检验的一般步骤第2页二.检验前准备准备好所需各种仪器。按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌，冷却后送无菌室备用。准备好所用各种试剂，做好普通营养琼脂或其它选择必培养基。做好无菌室或超净工作台灭菌工作，提前1h灭菌30~60min.工作衣、鞋、帽、等灭菌后备用。工作人员进入无菌室后，试验没有完成之前不得随便出入无菌室。一食品微生物检验的一般步骤第3页三.样品采集一食品微生物检验的一般步骤第4页（一）采样目标和意义便于食品卫生质量监督管理判别食品中是否存在有毒有害物质。为新产品、新资源利用、新食品化工产品、新工艺投产前进行卫生判定。一食品微生物检验的一般步骤第5页（二）样品种类大样，就是一整批；中样，是从样品中各个别取得混合样品，普通为200g；小样，也称检样，做分析用，普通为25g。一食品微生物检验的一般步骤第6页（三）采样步骤采样前调查→现场观察→确定采样方案→采样→样品封存→开具采样证实一食品微生物检验的一般步骤第7页（四）采样要求1、严格恪守样品采集操作规程。2、所采样品必须含有代表性。3、采样操作要预防污染，预防变质、损坏、丢失。4、不得加入防腐剂、固定剂等。5、样品采集和现场测定必须有二人以上参加。一食品微生物检验的一般步骤第8页（五）食品微生物检验采样方案一食品微生物检验的一般步骤第9页1、食品卫生学微生物检验取样方案检验目标：检验食品微生物卫生指标是否合格。一食品微生物检验的一般步骤第10页取样方案有：ICMSF取样方案；美国FDA取样方案；世界粮农组织（FAO）取样方案；我国食品取样方案。一食品微生物检验的一般步骤第11页2、食物中毒微生物检验取样检验目标：查找食物中有何病原菌。一食品微生物检验的一般步骤第12页3、人畜共患病病原菌检验取样检验目标：判定畜禽及其产品是否带有些人兽共患病原菌。一食品微生物检验的一般步骤第13页（六）食品微生物检验采样方法采样标准：上能采取完整包装样品就不拆开取样，必须拆开包装取样应按无菌操作进行取样.一食品微生物检验的一般步骤第14页1、液体样品采样方法

充分混匀后，无菌操作打开包装，用100mL无菌注射器抽取,注入无菌盛样容器.一食品微生物检验的一般步骤第15页2、半固体样品采样方法无菌操作打开包装，用无菌勺子从几个部位挖取样品，放入无菌容器。

一食品微生物检验的一般步骤第16页3、固体样品采样方法大块整体食品用无菌刀具和镊子从不一样部位割取，并注意其代表性；小块大包装食品应从不一样部位小块上切取样品，放入无菌容器。若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质情况，应从深部取样。

一食品微生物检验的一般步骤第17页4、冷冻食品采样方法大包装小块冷冻食品按小块个体采取；大块冷冻食品可用无菌刀从不一样部位削取或用无菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质情况，应从深部取样。一食品微生物检验的一般步骤第18页5、生产工序监测采样车间用水：从车间各龙头采样；车间台面、用具、及加工售货员手卫生监测：用5cm2孔无菌采样板和5支无菌棉签擦拭25cm2面积，擦拭后马上用无菌剪刀将棉签头剪入无菌容器中。一食品微生物检验的一般步骤第19页车间空气采样：将5个直径90mm普通琼脂平板分别置于车间四角和中部，打开平皿盖5min，然后盖盖送检。平皿一食品微生物检验的一般步骤第20页（七）采样标签填写标签内容主要：

编号、样品名称、生产单位、生产日期、产品批号、产品数量、存放条件、采样时间、采样人姓名，现场情况。一食品微生物检验的一般步骤第21页×××××采样单样品编号：━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━产品名称（商品名）______规格型号__________注册商标_____________生产厂家_______________通讯地址__________邮政编码□□□□□□受检地点_______________通讯地址__________邮政编码□□□□□□采样地点_______________采样日期__________采样基数______________生产日期_______________批号__________产品依据标准__________有效成份及含量____________________________________________________________检验目地________________检测项目_____________________________

采样人仔细阅读以下句子，然后签字我认真负责地填写了该样品采样单，认可以上填写正当性，被该采亲单位所证实样品系按照采样方法取得，该样品含有代表性、真实性和公正性。代表单位（章）代表单位（章）签字签字日期年月日日期年月日

备注

一食品微生物检验的一般步骤第22页四.样品送检要求1、要快速运输：不要超出3小时；2、若路途遥远，可在1~5℃低温下运输；3、要注意防污染、防散漏、防变质；4、要填写检验申请单。一食品微生物检验的一般步骤第23页五.样品处理方法（一）液体样品（二）固体样品（三）冷冻样品一食品微生物检验的一般步骤第24页(一)液体样品处理瓶装液体样品处理盒装或软塑料包装样品处理一食品微生物检验的一般步骤第25页1.瓶装液体样品处理

用点燃酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开；含有二氧化碳样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验。一食品微生物检验的一般步骤第26页2.盒装或软塑料包装样品处理

将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液纱布在剪开个别，直接吸收样品25mL，或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。一食品微生物检验的一般步骤第27页（二）固体样品处理捣碎均质法剪碎振摇法研磨法整粒振摇法胃蠕动均质法一食品微生物检验的一般步骤第28页1.捣碎均质法将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。一食品微生物检验的一般步骤第29页2.剪碎振摇法将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样深入剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。一食品微生物检验的一般步骤第30页3.研磨法

将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。一食品微生物检验的一般步骤第31页4.整粒振摇法直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。一食品微生物检验的一般步骤第32页（三）冷冻样品冷冻样品，先将中样在0~4℃下解冻，时间不能超出18h，或在45℃下解冻，时间不能超出15min。再取检样25g做稀释处理。一食品微生物检验的一般步骤第33页六.致病菌检验参考菌群选择一食品微生物检验的一般步骤第34页一食品微生物检验的一般步骤第35页一食品微生物检验的一般步骤第36页蛋及蛋制品：沙门氏菌、葡萄球菌、变形杆菌等水产品海产品：链球菌、副溶血性弧菌乳制品：沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌、链球菌、蜡样芽胞杆菌畜禽肉类：肠道致病菌和致病性球菌米面类：蜡样芽胞杆菌、变形杆菌、酵母霉菌等罐头：耐热性芽胞杆菌、嗜热脂肪杆菌、大芽胞杆菌、凝值芽胞杆菌一食品微生物检验的一般步骤第37页七.样品检验（一）、收样：1、收到样品后逐一查对验收，登记编号；如年收到50号样品，编号可写成：00502、马上将样品放在冰箱或冰盒中，并主动做好准备工作。一食品微生物检验的一般步骤第38页（二）、检验

1、选择检验方法：我国：国家标准国外：国际标准：如FAO标准、WHO标准；每个进口国标准：如美国FDA标准、日本厚生省标准、欧共体标准等一食品微生物检验的一般步骤第39页2、检验要求（1）按照标准操作规程进行检验操作，边工作边做原始统计。（2）检测结束，连同结果一起交同条线技术人员复核。复核过程中发觉错误，复核人应通知检测人更正，然后重新复核。（3）检测人和复核人在原始统计上署名，并编写“检测汇报底稿”。（4）全部检测项目完成后，检测人员将原始统计、样品卡、汇报书底稿交科主任作全方面校核。一食品微生物检验的一般步骤第40页3、样品保留（1）阴性样品：在发出汇报可及时处理；（2）阳性样品：在发出汇报以后3天才能处理样品；（3）进口食品阳性样品：要保留6个月才能