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文档简介
生物化学三、DNA复制的酶学参与DNA复制的酶类:DNA复制速度甚快,复制高效率和高度忠实性,都是由于许多酶参与了复制过程。主要有:DNA聚合酶、引物酶、参与DNA解旋、解链的酶、单链结合酶、DNA连接酶以四种脱氧核糖核苷酸为底物1.DNA聚合酶的特点分别是:dATP,dGTP,dCTP,dTTP
简称DNA-pol,需要DNA模板和引物RNA,按5′→3′方向聚合延长互补链。1.1原核生物大肠杆菌DNA聚合酶有三种:
DNA-polⅢ活性最大,是复制延长中真正催化新链脱氧核苷酸聚合的酶。DNA-polⅠ含量最多,对复制中错误进行“校读”作用,并有填补空隙作用DNA-polⅡ只在无DNA-polⅠ及DNA-polⅢ时发挥作用
1.2真核生物DNA聚合酶有五种
DNA-polα和δ在复制延长中起催化作用;
DNA-polε在复制中起校读、修复和填补缺口的作用;
DNA-polγ线粒体的复制中发挥作用;
DNA-polβ在缺乏其它DNA聚合酶时发挥作用。2.引物酶定义:催化RNA引物合成的酶称为引物酶意义:DNA聚合酶不能自行从头以2个游离的单脱氧核苷酸为起点合成DNA链;
因此,首先需要合成一小段多核苷酸作为引物(primer)
这段是RNA链片断,主要为DNA链合成提供自由3-OH末端。3.参与DNA解旋、解链的酶及蛋白质因子3.1解螺旋酶定义:解开DNA双链间的氢键,使其称为单链的酶,或称解链酶。特点:需要水解ATP提供能量3.2拓扑异构酶由于DNA复制前方形成超螺旋结构,阻碍了DNA的解旋、解链;
因此,需要不断松弛DNA模板的超螺旋结构。定义:松弛DNA超螺旋结构的酶,称为拓扑异构酶。分为Ⅰ型和Ⅱ型。DNA拓扑异构酶Ⅰ型通过形成短暂的单链裂解-结合循环,催化DNA复制的拓扑异构状态的变化;特点:剪切一条链,不需要ATP拓扑异构酶Ⅱ型通过引起瞬间双链酶桥的断裂,然后打通和再封闭,以改变DNA的拓扑状态。特点:剪切两条链,需要ATP3.3单链结合酶定义:结合于因DNA双链打开而形成的单股DNA链上的酶,称为单链结合酶(DNA结合蛋白)。意义:维持模板链处于单链状态;
保护单股DNA链不被核酸酶水解。解螺旋酶DNA结合蛋白4.DNA连接酶DNA连接酶,即连接两个冈崎片段;一片段DNA链上脱氧核苷酸的3羟基和相邻另一片段DNA链上脱氧核苷酸的5磷酸基团,形成磷酸二酯键,从而把两个片段的DNA链连接起来。DNA连接酶ATPATP
5.
端粒酶具有逆转录
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